March 20th, 2014
في التجربة التالية وصفنا بروتوكول للتكييف الخوف التتبع في الفئران. هذا النوع من الذاكرة النقابي يشمل فترة التتبع التي تفصل بين التحفيز محايدة والتحفيز دون شروط.
الهدف العام من التجربة التالية هو تقييم التعلم والذاكرة المعتمدين على الحصين في الفئران من خلال استخدام تكييف الكرة النزرة. يتم تحقيق ذلك من خلال تدريب أولا على ربط النغمة السمعية بحافز مكروه. في اليوم التالي ، يتم وضع في سياق جديد ويتم تسجيل سلوك التجميد كرد فعل على النغمة.
في اليوم الثالث ، يتم إرجاع إلى السياق الأصلي ويتم تسجيل سلوك التجميد. تظهر النتائج أن الفئران المدربة على إقران نغمة الصدمة تظهر سلوكا تجميدا أكثر من تلك التي لم تتلقى الصدمة. يمكن استخدام هذه الطريقة لتقديم نظرة ثاقبة حول التعلم والذاكرة المعتمدة على الحصين والفئران ، وهي مفيدة بشكل خاص عند استخدامها في دراسة المعدلة وراثيا والضربة القاضية.
يتم تنفيذ الإجراء التالي في غرفة تكييف الخوف الموجودة داخل غرفة أكبر لتخفيف الصوت. مع إغلاق باب الغرفة ، يجب أن تصل الأضواء إلى المستوى المطلوب من الإضاءة ، إذا تم وضعها بشكل صحيح ، فيجب أن يكون ضوء مؤشر مستوى الضوء مطفأ. استخدم مقياس الصوت لتأكيد مستوى ثابت من ضوضاء الخلفية داخل كل غرفة.
بعد ذلك ، قم بمعايرة النغمة المستخدمة أثناء التدريب. استخدم جهاز معايرة خارجي لمعايرة مستوى الصدمة. ضع سلك واحد على شريط وثلاثة أو أربعة أشرطة أخرى.
استخدم مولد الصدمات لإدارة الصدمة والمعايرة حتى يتم الوصول إلى المستوى الصحيح. كرر هذه الخطوة لكل غرفة تكييف الخوف. بمجرد تجهيز الجهاز ، انقل الأشخاص إلى غرفة احتجاز منفصلة عن غرفة الاختبار لتقليل المعالجة المفرطة.
قبل الاختبار ، قم بتسمية ذيول قبل 30 دقيقة على الأقل من الاختبار أو في اليوم السابق. عندما تكون جاهزا للبدء ، انقل فأرة الاختبار إلى قفص نظيف يحمل علامة لنقله إلى غرفة تكييف الخوف. ضع الماوس في الغرفة ، وأغلق الباب وابدأ تشغيل البرنامج.
في اليوم الأول من التدريب ، يسمح للفئران باستكشاف الغرفة لمدة ثلاث دقائق. يقدم البرنامج بعد ذلك نغمة 22 ، متبوعا بفاصل تتبع 22 ينتهي بصدمة خفيفة في القدم. راقب الموضوع للتأكد من أنه تلقى المحفزات البغيضة.
يفصل الفاصل الزمني 202 بين المحاكمات بين خمس تجارب تكييف. بعد التجارب ، اسمح للحيوان بالبقاء في غرفة الاختبار لمدة دقيقة واحدة قبل إزالته ، ثم ضع مرة أخرى في قفص النقل والعودة إلى غرفة الاحتجاز. إذا كانت هناك فئران إضافية ليتم اختبارها في قفصها المنزلي بشكل فردي ، فقم بإخضاع الفأر حتى تنتهي جميع الفئران من الاختبار.
نظف غرفة الاختبار بنسبة 30٪ من الأيزوبروبانول استعدادا للحيوان التالي. كرر هذه الخطوات حتى يتم تدريب جميع الفئران. أعد جميع الفئران إلى غرفة مستعمرتها.
بعد اختبار آخر فأر في المجموعة في اليوم التالي ، يتم اختبار. لتتبع ذاكرة الخوف. في هذا اليوم ، استبدل فراش أقفاص النقل بورق ممزق لتغيير سياقها.
كما تم تغيير سياق الغرفة. ضع لوح رغوي تحت ملحق أكريليك شفاف على الأرض لتغيير قوامه ومظهره. ضع مقسم أكريليك داخل منطقة الاختبار.
قم بتغيير الرائحة عن طريق وضع مستخلص الفانيليا في قارب مصل اللبن تحت الأرض. أدخل في هذا اليوم ، قم بتنظيف الغرفة بنسبة 70٪ من الإيثانول بدلا من 30٪ من الأيزوبروبانول بين كل فأر. عندما تصبح جاهزا ، ضع الماوس في غرفة الاختبار وابدأ البرنامج.
تبدأ الجلسة بفترة أساسية مدتها دقيقتان تليها ثلاثة عروض تقديمية باللون الثاني والعشرين. هناك فاصل زمني بين المحاكمات 222 بين كل عرض لهجة. بعد انتهاء الجلسة ، أعد الفئران إلى قفص منزلها واستمر حتى يتم اختبار جميع استعدادا للاختبار في اليوم التالي.
استعادة نفس السياق المستخدم في اليوم الأول. نظف الغرفة بنسبة 30٪ من الأيزوبروبانول. يتم إجراء التكييف السياقي في اليوم الثالث.
باستخدام نفس أقفاص النقل مثل اليوم الأول ، استرجع ماوس الاختبار من غرفة الاحتجاز. ضع الماوس في غرفة الاختبار ثم ابدأ تشغيل البرنامج لاختبار الذاكرة السياقية. قم بتشغيل برنامج لتسجيل سلوك التجميد لمدة ثماني دقائق.
بعد هذا الوقت ، أعد الفأر إلى قفص منزله واستمر في الاختبار كما هو موضح سابقا ، تظهر النتائج التمثيلية زيادة في سلوك التجميد لدى التي تتلقى إقران نغمة الصدمة على مدار جلسة التدريب. في سياق جديد ، كان لدى الفئران التي تلقت حافز الصدمة المكروهة تجميد أكبر مقارنة بالفئران التي لم تتلق الصدمة أثناء تتبع النغمة الأساسية والفاصل الزمني بين التجارب. عند العودة إلى السياق الأصلي ، أظهرت التي تتلقى حافز الصدمة المكروهة سلوك تجميد أعلى باستمرار خلال فترة الثماني دقائق.
بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية استخدام تتبع تكييف الخوف من أجل فهم التعلم المعتمد على الحصين والذاكرة والفئران.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
تصف هذه التجربة بروتوكولاً لتكييف الخوف المتتالي في الفئران، والذي يقيم التعلم والذاكرة المعتمدة على الحُصين. يتضمن البروتوكول ربط نغمة سمعية بمنبّه مزعج وقياس سلوك التجمد لدى الفئران في سياقات مختلفة.