Name: تقنية Subnormothermic فيفو السابقين الكبد الإرواء للتخزين، تقييم، وإصلاح الطعوم الكبد الهامشية (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-08-13T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 29 s
Description: تعلم تقنية الإرواء تحت الحرارة الطبيعية للكبد خارج الجسم للحفاظ على الطعوم الهامشية وتقييمها قبل الزراعة. تقلل هذه الطريقة من إصابات الحفظ مقارنة بالتخزين البارد التقليدي.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وأيد هذه الدراسة من المنح البحثية للزرع الجهاز روش مؤسسة أبحاث (ROTRF) وشركة Astellas. وأيد ماركوس Selzner من قبل جائزة التنمية ASTS الوظيفي. وأيد ماتياس Knaak بواسطة منحة أبحاث شركة Astellas. نشكر أوفي Mummenhoff والأسرة برمنغهام على دعمهم السخي.

<ol><li>, Department of Health and Human Service, Organ Procurement and Transplantation Service. Available from: 
 <a target="_blank" href="http://optn.transplant.hrsa.gov">http://optn.transplant.hrsa.gov</a> (2013).</li>
<li>Qiu, J., Ozawa, M., Terasaki, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+transplantation+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Transplants%22%5BJournal%5D)">Liver transplantation in the United States.</a> Clinical Transplants. , 17-28 (2005).</li>
<li>Maheshwari, A., Maley, W., Li, Z., Thuluvath, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biliary+complications+and+outcomes+of+liver+transplantation+from+donors+after+cardiac+death%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Biliary complications and outcomes of liver transplantation from donors after cardiac death.</a> Liver Transpl. 13 (12), 1645-1653 (2007).</li>
<li>Reich, D. J., Hong, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+status+of+donation+after+cardiac+death+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Organ+Transplant%22%5BJournal%5D)">Current status of donation after cardiac death liver transplantation.</a> Curr Opin Organ Transplant. 15 (3), 316-321 (2010).</li>
<li>Grewal, H. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+transplantation+using+controlled+donation+after+cardiac+death+donors%3A+an+analysis+of+a+large+single-center+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Liver transplantation using controlled donation after cardiac death donors: an analysis of a large single-center experience.</a> Liver Transpl. 15 (9), 1028-1035 (2009).</li>
<li>Nguyen, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+outcomes+of+donation+after+cardiac+death+liver+allografts+from+a+single+center%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transplant%22%5BJournal%5D)">Long-term outcomes of donation after cardiac death liver allografts from a single center.</a> Clin Transplant. 23 (2), 168-173 (2009).</li>
<li>Heidenhain, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+and+risk+factors+for+ischemic-type+biliary+lesions+following+orthotopic+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl+Int%22%5BJournal%5D)">Incidence of and risk factors for ischemic-type biliary lesions following orthotopic liver transplantation.</a> Transpl Int. 23 (1), 14-22 (2010).</li>
<li>Moench, C., Uhrig, A., Lohse, A. W., Otto, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CC+chemokine+receptor+5delta32+polymorphism-a+risk+factor+for+ischemic-type+biliary+lesions+following+orthotopic+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">CC chemokine receptor 5delta32 polymorphism-a risk factor for ischemic-type biliary lesions following orthotopic liver transplantation.</a> Liver Transpl. 10 (3), 434-439 (2004).</li>
<li>Iacob, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic%2C+immunological+and+clinical+risk+factors+for+biliary+strictures+following+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Int%22%5BJournal%5D)">Genetic, immunological and clinical risk factors for biliary strictures following liver transplantation.</a> Liver Int. 32 (8), 1253-1261 (2012).</li>
<li>Heidenhain, C., Puhl, G., Moench, C., Lautem, A., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemokine+Receptor-5Delta32+Mutation+is+No+Risk+Factor+for+Ischemic-Type+Biliary+Lesion+in+Liver+Transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Chemokine Receptor-5Delta32 Mutation is No Risk Factor for Ischemic-Type Biliary Lesion in Liver Transplantation.</a> J Transplant. , (2009).</li>
<li>Hashimoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+tissue+plasminogen+activator+in+liver+transplantation+from+donation+after+cardiac+death+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Use of tissue plasminogen activator in liver transplantation from donation after cardiac death donors.</a> Am J Transplant. 10 (12), 2665-2672 (2010).</li>
<li>Staib, W., Scholz, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aStaib%2C+W+%22Stoffwechsel+der+perfundierten+Leber%22">Stoffwechsel der perfundierten Leber</a>. , Springer. (1968).</li>
<li>Brauer, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Physiol%22%5BJournal%5D)">Liver.</a> Annu Rev Physiol. 18, 253-278 (1956).</li>
<li>Boehnert, M. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normothermic+acellular+ex+vivo+liver+perfusion+reduces+liver+and+bile+duct+injury+of+pig+livers+retrieved+after+cardiac+death%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Normothermic acellular ex vivo liver perfusion reduces liver and bile duct injury of pig livers retrieved after cardiac death.</a> Am J Transplant. 13 (6), 1441-1449 (2013).</li>
<li>Guarrera, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermic+machine+preservation+in+human+liver+transplantation%3A+the+first+clinical+series%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transplant%22%5BJournal%5D)">Hypothermic machine preservation in human liver transplantation: the first clinical series.</a> Am J Transplant. 10 (2), 372-381 (2010).</li>
<li>Fondevila, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermic+oxygenated+machine+perfusion+in+porcine+donation+after+circulatory+determination+of+death+liver+transplant%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Hypothermic oxygenated machine perfusion in porcine donation after circulatory determination of death liver transplant.</a> Transplantation. 94 (1), 22-29 (2012).</li>
<li>Rougemont, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((One+hour+hypothermic+oxygenated+perfusion+%28HOPE%29+protects+nonviable+liver+allografts+donated+after+cardiac+death%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">One hour hypothermic oxygenated perfusion (HOPE) protects nonviable liver allografts donated after cardiac death.</a> Ann Surg. 250 (5), 674-683 (2009).</li>
<li>Chung, W. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Addition+of+a+kidney+to+the+normothermic+ex+vivo+perfused+porcine+liver+model+does+not+increase+cytokine+response%5BTitle%5D)+AND+%22J+Artif+Organs%22%5BJournal%5D)">Addition of a kidney to the normothermic ex vivo perfused porcine liver model does not increase cytokine response.</a> J Artif Organs. 15 (3), 290-294 (2012).</li>
<li>Brockmann, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normothermic+perfusion%3A+a+new+paradigm+for+organ+preservation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Normothermic perfusion: a new paradigm for organ preservation.</a> Ann Surg. 250 (1), 1-6 (2009).</li>
<li>Hessheimer, A. J., Fondevila, C., García-Valdecasas, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracorporeal+machine+liver+perfusion%3A+are+we+warming+up%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Organ+Transplant%22%5BJournal%5D)">Extracorporeal machine liver perfusion: are we warming up.</a> Curr Opin Organ Transplant. 17 (2), 143-147 (2012).</li>
<li>Vogel, T., Brockmann, J. G., Friend, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ex-vivo+normothermic+liver+perfusion%3A+an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Organ+Transplant%22%5BJournal%5D)">Ex-vivo normothermic liver perfusion: an update.</a> Curr Opin Organ Transplant. 15 (2), 167-172 (2010).</li>
<li>Swindle, M. M., Smith, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Best+practices+for+performing+experimental+surgery+in+swine%5BTitle%5D)+AND+%22J+Invest+Surg%22%5BJournal%5D)">Best practices for performing experimental surgery in swine.</a> J Invest Surg. 26 (2), 63-71 (2013).</li>
<li>Smith, A. C., Swindle, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+swine+for+the+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+J%22%5BJournal%5D)">Preparation of swine for the laboratory.</a> ILAR J. 47 (4), 358-363 (2006).</li>
<li>Cywes, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+intraportal+glucose+infusion+on+hepatic+glycogen+content+and+degradation%2C+and+outcome+of+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Effect of intraportal glucose infusion on hepatic glycogen content and degradation, and outcome of liver transplantation.</a> Ann Surg. 216 (3), 235-246 (1992).</li>
<li>Ishida, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+effects+of+oral%2C+peripheral+intravenous%2C+and+intraportal+glucose+on+hepatic+glucose+uptake+and+insulin+and+glucagon+extraction+in+conscious+dogs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Differential effects of oral, peripheral intravenous, and intraportal glucose on hepatic glucose uptake and insulin and glucagon extraction in conscious dogs.</a> J Clin Invest. 72 (2), 590-601 (1983).</li>
<li>Morsiani, E., Aleotti, A., Ricci, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haemodynamic+and+ultrastructural+observations+on+the+rat+liver+after+two-thirds+partial+hepatectomy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Anat%22%5BJournal%5D)">Haemodynamic and ultrastructural observations on the rat liver after two-thirds partial hepatectomy.</a> J Anat. 4 (Pt 4), 507-515 (1998).</li>
<li>Schön, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liver+transplantation+after+organ+preservation+with+normothermic+extracorporeal+perfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Liver transplantation after organ preservation with normothermic extracorporeal perfusion.</a> Ann Surg. 233 (1), 114-123 (2001).</li>
<li>Currin, R. T., Gores, G. J., Thurman, R. G., Lemasters, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+by+acidotic+pH+against+anoxic+cell+killing+in+perfused+rat+liver%3A+evidence+for+a+pH+paradox%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Protection by acidotic pH against anoxic cell killing in perfused rat liver: evidence for a pH paradox.</a> FASEB J. 5 (2), 207-210 (1991).</li>
<li>Derveaux, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Does+ex+vivo+vascular+resistance+reflect+viability+of+non-heart-beating+donor+livers%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Transplant+Proc%22%5BJournal%5D)">Does ex vivo vascular resistance reflect viability of non-heart-beating donor livers?</a> Transplant Proc. 37 (1), 338-339 (2005).</li>
<li>Guarrera, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypothermic+Machine+Preservation+of+Human+Liver+Allografts%3A+Markers+of+Reperfusion+Injury+%5Babstract%23+1282%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Transpl%22%5BJournal%5D)">Hypothermic Machine Preservation of Human Liver Allografts: Markers of Reperfusion Injury [abstract# 1282].</a> Am J Transpl. 7, Suppl 2. 476(2007).</li>
<li>Tolboom, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subnormothermic+machine+perfusion+at+both+20%C2%B0C+and+30%C2%B0C+recovers+ischemic+rat+livers+for+successful+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Subnormothermic machine perfusion at both 20°C and 30°C recovers ischemic rat livers for successful transplantation.</a> J Surg Res. 175 (1), 149-156 (2012).</li>
<li>Vollmar, B., Menger, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+hepatic+microcirculation%3A+mechanistic+contributions+and+therapeutic+targets+in+liver+injury+and+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">The hepatic microcirculation: mechanistic contributions and therapeutic targets in liver injury and repair.</a> Physiol Rev. 89 (4), 1269-1339 (2009).</li>
<li>Jamieson, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hepatic+steatosis+and+normothermic+perfusion-preliminary+experiments+in+a+porcine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Hepatic steatosis and normothermic perfusion-preliminary experiments in a porcine model.</a> Transplantation. 92 (3), 289-295 (2011).</li>
</ol>

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

في نموذج الخنزير الذي يحاكي زرع الكبد DCD، أثبتنا أن نضح الكبد subnormothermic مع الخلوية نتائج حل نضح في نضح المعلمات مستقرة، الحد الأدنى من الإصابة الكبدية، والاستقلاب الكبدي النشط. وقد ثبت لدينا نضح subnormothermic انشاء لاستعادة التوازن الكبد والتمثيل الغذائي. يتم استعادة تخزين الجليكوجين ويتم تجاهل الأيض. فيفو السابقين نضح الكبد وتقنية الحفاظ يقدم لأول مرة الفرصة لتقييم علامات على وظيفة الكسب غير المشروع والإصابات خلال الحفاظ على الجهاز وقبل الزرع. بجانب التقييم العيانية من التجانس نضح الكسب غير المشروع، والقيم تدفق توفر مؤشرا جيدا على بقاء الكسب غير المشروع ومدى الإصابة الدماغية كانت قد تعرضت في وقت سابق 29. استهلاك الأكسجين وإنتاج الصفراء وعلامات على وظيفة التمثيل الغذائي. مستويات أنزيمات الكبد مثل AST يمكن استخدامها لوsess درجة وديناميات الإصابة الكبدية 30. قد يسمح هذا التقييم الكسب غير المشروع شامل وموثوق التمييز بين الأجهزة هامشية للزرع وغير زرع. اخترنا درجة حرارة subnormothermic من 33 درجة مئوية في نظام نضح لدينا لأن درجة حرارة كافية للسماح التمثيل الغذائي وكذلك ATP وتوليف الجليكوجين. في الوقت نفسه، فإنه يوفر الطلب على الاكسجين انخفضت بالمقارنة مع إعدادات نضح سوي الحرارة التي توفر السلامة الإضافية ضد الإصابة الدماغية. بشكل عام، أظهرت درجات الحرارة نضح فوق 30 درجة مئوية لتقليل الإصابة الدماغية الباردة، وتوفير ما يكفي من النشاط الأيضي 31. على عكس المجموعات الأخرى، لم نستخدم الدم الكامل كما الإرواء، ولكن حل الزلال-normo ناضح (ستين) مع خلايا الدم الحمراء وغسلها وتصفيتها. باستبعاد مكونات البلازما وكذلك thrombocytes والكريات البيض، والحل هو نضح ديوقع لتقليل إشارات الموالية للالتهابات خلال نضح خارج الحي. بالإضافة إلى تقييم الكسب غير المشروع، وظروف نضح مستقرة على مدى عدة ساعات تسمح العلاج الكسب غير المشروع. أظهرت جزيئات عديدة لتخفيف الاصابة ضخه تحت ظروف تجريبية 32. ومع ذلك، فقد جعلت نظام العلاج تقريبا أي طريقها إلى الممارسة السريرية، ومع ذلك. سبب واحد ويبدو أن عدم وجود فرصة لتطبيق هذه العلاجات أثناء التخزين البارد. والكبد النشط عملية الأيض في الجسم الحي بحكم نظام نضح هو الأمثل لتطبيق أي نوع من العلاج. في هذا الصدد، والعلاج ليس فقط لتحسين الظروف ضخه مثل تخفيف من نشاط خلايا كوبفر أو الكسح أنواع الاكسجين التفاعلية هي يعقل ولكن أيضا العلاجات مثل العلاج الجيني لحالة الكسب غير المشروع، على سبيل المثال، ضد التهاب الكبد C تكرار. ويمكن أن تشمل الاستراتيجيات المحتملة الأخرى على تخفيض تنكس دهني خلال نضح خارج الحيفترة 33. باختصار، فيفو السابقين الكبد نضح هو استراتيجية رواية لتقليل الإصابة الدماغية الباردة وتقييم الطعوم الكبد هامشية السابقة لزرع الكبد. يوفر إعداد نضح في فيفو السابقين فرصة فريدة لإصلاح وحالة الطعوم قبل الزرع.

زراعة الكبد هو الخيار الوحيد لعلاج المرضى الذين يعانون من أمراض الكبد في نهاية المرحلة أو سرطان الكبد المتقدم. على مدى السنوات ال 25 الماضية، ازداد عدد من الانتظار مرشحي القائمة تدريجيا وتجاوز عدد الطعوم المتاحة. انخفض عدد من المانحين القلب بفوزه على مدى العقد الماضي. في نفس الوقت، وأرقام الطعوم هامشية، مثل التبرع بعد الموت القلبي (DCD)، وكذلك الكبد الدهنية القديمة وزادت 1،2. غالبا ما يتم رفض ترقيع هامشية لزراعة الكبد بسبب فرصة أكبر من الكسب غير المشروع الأساسي وظيفة غير أو تأخير. في ترقيع DCD، وتطوير نوع الدماغية قيود الصفراوية (ITBS) هي التي تثير قلقا خاصا. مع ساكنة تقنية الحفاظ الباردة التقليدية، تحدث ITBS في حوالي 10-40٪ من الطعوم DCD. في الغالبية العظمى من المرضى، ITBS يؤدي إلى إعادة زرع أو موت المريض. خصوصا مطولة مرات الدماغية الحارة والباردة هي مخاطرعوامل ITBS 3-7. سن المانحة، كما تم مناقشة الاستعداد الجيني الوراثي (مثل CCR5 دلتا 32)، واختيار الحل الحفاظ كعوامل خطر إضافي 7-10. وقد اقترح خثار مكروي الجزئي للسفن peribiliary كآلية محتملة لITBS بعد زرع الكبد مع DCD الطعوم 11. قبل إدخال السريري لزراعة الكبد، وقد استخدمت فيفو السابقين perfusions الكبد لدراسة الاستقلاب الكبدي وعلم وظائف الأعضاء 12،13. بعد أن اكتشف زرع الكبد طريقها إلى إعداد سريرية في 1960s، بذلت محاولات لا تعد ولا تحصى لاستخدام فيفو السابقين الكبد نضح كوسيلة من وسائل المحافظة عن طريق محاكاة التغذية والأوكسجين الظروف الفسيولوجية. وقد تم التحقيق فائدتها لحفظ الطعوم هامشية في العقد الماضي، لكنها لم تصل الرعاية السريرية القياسية. وصفنا مؤخرا انخفاضا في القناة الصفراوية إصابة في DCD زرع الكبد التي كتبها فيفو السابقين perfused لحفظ 14. وقدمت مقاربات مختلفة بشأن حل الارواء. تتراوح التحديد من الحلول الخلوية مثل الدم الكامل من الحيوان المانحة أو الخلايا الحمراء معبأة في تركيبة مع البلازما البشرية، إلى نهج ديكي مثل آلة جامعة ويسكونسن الحل، الحل IGL، أو ستين الحل 14-19. تتراوح درجة حرارة 4-37 ° C 20. التسميات في منخفض الحرارة، subnormothermic، وسوي الحرارة هو متغير جدا وغير متناسقة. وتهدف جميع التقنيات، والحلول، وضبط درجة الحرارة مختلفة في 1) شروط نضح مستقرة، 2) الأوكسجين الكافي، و 3) إعادة إنشاء وظيفة الجهاز. تعزيز قدرة الحفاظ فضلا عن قدرة تقييم الجهاز والعلاج خلال نضح سوي الحرارة وsubnormothermic تواجه أعلى التعقيد التقني والتكاليف مقارنة مع 20،21 نضح منخفض الحرارة. وضعنا خارج الحي الكبد نظام نضح subnormothermic خلال 4 سنوات الماضية. النظام يمكن أن تستخدم ل1) &quot;إعادة شحن&quot; محتوى الطاقة في الكبد، 2) لتقييم جودة الكسب غير المشروع، وو3) إصلاح كبد هامشية قبل الزرع. بروتوكول التالية يحتوي على كافة المعلومات لنضح الكبد مستقرة.

<table><tbody><tr><td>دائرة</td><td>Maquet (Hirrlingen ، GER)</td><td></td> <td>خزان رئيسي مخصص (3 لتر ، 3/8 بوصة تدفق خارجي) 
خزان البوابة (1.5 لتر ، 1/4 بوصة ، التدفق الخارج) 
مضخة الطرد المركزي 
الأكسجين 
مرشح الخلايا الليكويتية </td></tr><tr><td>أنابيب (1/4 "× 1/16")</td> <td>Raumedic (Helmbrechts ، GER)</td> <td>MED7506</td><td></td></tr><tr><td>أنابيب (3/8 بوصة × 3/32 بوصة)</td> <td>Raumedic (Helmbrechts ، GER)</td> <td>MED7536</td><td></td></tr><tr><td>موصلات الأنابيب</td><td>Raumedic (Helmbrechts ، GER) أحجام</td><td></td> <td>مختلفة</td></tr><tr><td>مرشح غسيل الكلى ، Optiflux F160NR</td><td>Fresenius Medical Care (Waltham ، MA)</td> <td>F160NR</td><td></td></tr><tr><td>حل</td><td>STEEN XVIVO (G & ouml ؛ teborg ، SWE)</td> <td>19004</td><td>2 لتر</td></tr><tr><td>مركز حمض غسيل الكلى A</td><td>Baxter (Mississauga ، ON)</td> <td>D12188M</td><td>45 مل</td></tr><tr><td>من الأحماض الأمينية ، Travasol 10٪</td> <td>باكستر (ميسيسوجا ، أونتاريو)</td> <td>JB6760</td><td>100 مل</td></tr><tr><td>بيروفات الصوديوم</td><td>سيجما ألدريتش (سانت لويس ، ميزوري)</td> <td>P2256</td><td>1.1 جم</td></tr><tr><td>هيبارين</td><td>ساندوز كندا (تورنتو ، أونتاريو)</td> <td>10750</td><td>40,000 وحدة</td></tr> دولية <tr><td>كالسيوم غلوكونات</td><td>الشركاء الصيدلانيين في كندا (ريتشموند هيل ، أونتاريو)</td> <td>C31110</td><td>10 مجم</td></tr><tr><td>الأنسولين سريع المفعول</td><td>بائعين</td><td></td> مختلفين <td>1,000 وحدة دولية</td></tr><tr><td>سيفازولين</td><td>بائعين مختلفين</td><td></td><td>1 جم</td></tr><tr><td>ميترونيدازول</td><td>باكستر (ميسيسوجا ، أونتاريو)</td> <td>JB3401</td><td>500 مجم</td></tr></tbody></table>

تقنية subnormothermic<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; الكبد الإرواء للتخزين، تقييم، وإصلاح الطعوم الكبد الهامشية

Technique of Subnormothermic Ex Vivo Liver Perfusion for the Storage, Assessment, and Repair of Marginal Liver Grafts

وقد أدى نجاح زراعة الكبد في نقص الجهاز الدرامي. في معظم مناطق زراعة 20-30٪ من المرضى على قائمة الانتظار لزرع الكبد يموتون دون تلقي زرع الأعضاء أو شطب لتطور المرض. استراتيجية واحدة لزيادة تجمع المانحة هي استخدام الطعوم هامشية، مثل الكبد الدهنية، الطعوم من المانحين القديمة، أو التبرع بعد الموت القلبي (DCD). تقنية المحافظة الحالية للتخزين البارد ثابت هو التسامح سيئة فقط من كبد هامشية مما أدى إلى تلف الجهاز كبير. بالإضافة إلى ذلك، التخزين البارد جهاز ثابت لا يسمح تقييم الكسب غير المشروع أو إصلاح قبل الزرع. وقد أدت هذه العيوب الحفاظ ثابت البارد مصلحة في الحفاظ دافئ الجهاز perfused لللحد من الإصابات الدماغية الباردة، وتقييم الطعوم الكبد خلال المحافظة، واستكشاف فرصة لإصلاح كبد هامشية قبل الزرع. وبريه الأمثلشروط المؤكد والتدفق ودرجة الحرارة نضح وتكوينها من الحل نضح والحاجة إلى حاملة الأكسجين وكانت مثيرة للجدل في الماضي. على الرغم من نتائج واعدة في العديد من الدراسات على الحيوانات، ومدى تعقيد وتكاليف حالت دون التطبيق السريري أوسع حتى الآن. في الآونة الأخيرة، مع التكنولوجيا وتعزيز فهم أفضل لعلم وظائف الأعضاء الكبد خلال فيفو السابقين نضح نتائج التروية الكبد الحار قد تحسن ويمكن تحقيق نتائج جيدة على الدوام. ستقدم هذه الورقة المعلومات حول استرجاع الكبد، وتقنيات التخزين، ونضح الكبد معزولة في الخنازير. سنقوم توضيح) متطلبات لضمان امدادات الاوكسجين الكافي إلى الجهاز، ب) الاعتبارات الفنية عن الجهاز نضح والحل نضح، وج) الجوانب الحيوية من أجهزة معزولة.

أدناه، فإننا نقدم نتائج التجارب 5 نضح مع DCD-الطعوم بعد 45 دقيقة وتسخين ونقص التروية 4 ساعة البارد قبل بداية subnormothermic فيفو السابقين الارواء. الهدف الرئيسي لنضح الكبد خارج الجسم الحي هو ضمان امدادات الاوكسجين الكافي إلى الجهاز. نقص التروية يسبب تضيق الأوعية، وبالتالي زيادة مقاومة نضح. تحقيق تدفقات الأوعية الدموية مستمرة مع الضغوط مستقرة هو مؤشر جيد على الأوكسجين الكافي. خلال فترة التدريب من 1-2 ساعة وتحسنت الحل نضح والجهاز تصل إلى 33 ° C، والذي توفى في مقاومة الأوعية الدموية في الكبد. مرة واحدة ويتم تحقيق درجة الحرارة المستهدفة من 33 درجة مئوية، ومستوى تدفق القيم في، مجموعة الفسيولوجية نحو مستمر لبقية الوقت نضح 6 ساعة (أرقام 3A-3D). في الوقت نفسه، يصبح الجهاز نشط عملية الأيض. الشكل 4A يظهر بو ريدي &lt;الفرعية&gt; 2، علامة من استهلاك الأوكسجين. ضمن 2 ساعة الأولية الوريدية ص 2 الانخفاضات إلى هضبة ثابتة. في هذه حالة نشطة عملية الأيض، والكبد تبدأ إنتاج الصفراء (الشكل 4B). يوفر مديال على توازن الكهارل متوازن (أرقام 4C-4D). وجهت لفرط بوتاسيوم الدم الأولي بسرعة. يخدم قياس AST على الانترنت ورصد الضرر الكبد. الشكل 5 يعرض فقط الضحلة زيادة AST الخطية خلال الفترة نضح بأكملها. H &amp; E تلطيخ بعد 6 ساعات من نضح يكشف الكبدية نخر &lt;5٪ مع مفصص سليمة وهيكل الجيبية (الشكل 6). تلطيخ PAS في النقطة الزمنية نفسها معارض تجديد تخزين الجليكوجين الخلوي مقارنة استنفدت التخزين الباردة في الحفاظ DCD-الطعوم (الشكل 7). <img alt="الرقم 3" src="/files/ftp_upload/51419/51419fig3highres.jpg" /> الرقم 3. التدفقات الإرواء والضغط (ن = 5، تظهر أشرطة الخطأ الانحراف المعياري). (A، B) الشريان الكبدي (HA) التدفق والضغط: خلال المرحلة الاحترار في ساعة الأولى 1-2، ويزيد من تدفق في الضغوط مستقرة وثابتة بعد ذلك. النظر في خفض الضغط الوريدي البابي (C)، أرتفاع تدفق HA نحو نهاية نضح قد يكون رد فعل autoregulatory الكبد (C، D) والمدخل الوريدي (PV) يزيد من تدفق المقابلة لتدفق HA خلال في 2 ساعة الأولى من الاحترار. ما زالت الضغوط مستقرة نسبيا. <img alt="الرقم 4" src="/files/ftp_upload/51419/51419fig4highres.jpg" /> الرقم 4. المعلمات الرصد (ن = 5، تظهر أشرطة الخطأ الانحراف المعياري). (A) وريدي بو 2 كعلامة من الطلب على الاكسجين وانخفاض النشاط الأيضي داخل المرحلة الأولى من الاحترار بسبب cellula تفعيلهاص الأيض. يبقى مستقرا بعد ذلك (B) إنتاج الصفراء كعلامة من النشاط الأيضي يبدأ في درجات الحرارة حوالي 30 درجة مئوية، وبالتالي، بين الساعة الاولى والثانية من نضح (C، D) ومديال يضمن التوازن المنحل بالكهرباء.؛ وفرط بوتاسيوم الدم الأولي بسرعة متوازن. <img alt="الرقم 5" src="/files/ftp_upload/51419/51419fig5highres.jpg" /> الشكل 5. AST (ن = 5، تظهر أشرطة الخطأ الانحراف المعياري) AST هو علامة الحساسة الإصابة الكبدية؛ وتشير الزيادة الضحلة أي إصابة كبيرة خلال فيفو السابقين الارواء. <img alt="الرقم 6" src="/files/ftp_upload/51419/51419fig6highres.jpg" /> الرقم 6. H &amp; E تلطيخ (20X التكبير). (A) عينة الكبد الشام قبل التروية الدافئ، واحدة فصيص الكبد تمثيلي مع البنيان سليمةه (B) عينة الكبد بعد 45 دقيقة من نقص التروية دافئ، 4 ساعة نقص التروية الباردة، و 6 ساعة من نضح subnormothermic، العمارة مفصص سليمة دون نخر وإلا الحد الأدنى من تورم الخلايا، والمتوسعة المساحات الجيبية أقل ما يقال بالمقارنة مع عينة صورية.

ترقيع هامشية، مثل الكبد الدهنية، الطعوم من المانحين القديمة، أو كبد استرجاع بعد وفاة القلب (DCD) تتسامح التقليدي والتخزين البارد ثابت سيئة فقط. وضعنا نموذجا جديدا من subnormothermic فيفو السابقين نضح الكبد للمحافظة، والتقييم، وإصلاح الطعوم الكبد هامشية قبل الزرع.

تقنية Subnormothermic<em&gt; فيفو السابقين</em&gt; الكبد الإرواء للتخزين، تقييم، وإصلاح الطعوم الكبد الهامشية

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. In most transplant regions 20-30% of patients on the waiting list for ...

الهدف من هذا الإجراء هو الحفاظ على طعم الكبد وتقييمه في ظل ظروف فسيولوجية تقريبا. يتم تحقيق ذلك عن طريق استرداد طعم الكبد أولا من خنزير متبرع. في الخطوة الثانية ، يتم قنية الكبد ، ثم يتم توصيل الكسب غير المشروع بدائرة التروية خارج الجسم الحي.في الخطوة الأخيرة ، تتم مراقبة خصائص التروية وخصائص طعم الكبد لوقت التروية المطلوب. في النهاية ، يتم استخدام مستويات ترانسفيراز أمينو الأسبارتات أو ST والتحليلات النسيجية للخزعات المتني لإظهار الحفاظ على الإصابة وقابلية بقاء طعم الكبد. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على طرق الحفظ الحالية ، مثل التخزين الثابت ، هي أن الحفظ في ظل ظروف فسيولوجية يؤدي إلى تقليل إصابة الحفظ ويسمح بالتقييم الوظيفي والعلاج للكسب غير المشروع قبل زرع الأعضاء الفعلي.مباشرة بعد إحداث الموت القلبي عن طريق إدارة كلوريد البوتاسيوم ، قم بجمع 1.6 لتر من الدم من خنزير يوركشاير ذكر يتراوح وزنه من 30 إلى 35 كيلوغراما في أكياس CPDA ، وأغلق البطن ، واترك الكبد داخل البطن لمدة 45 دقيقة للحث على إصابة إقفارية دافئة مباشرة قبل نهاية نقص التروية الدافئ. الوقت يقذف الشريان الأورطي والوريد البابي بخطوط تدفق الأعضاء في هذا الوقت أيضا. استخدم التروية المزدوجة عن طريق ضغط الشريان الأورطي والأكياس التي تحركها الجاذبية البابية لشطف الكبد بمحلول جامعة ويسكونسن.ثم اقطع الكبد من الخنزير ، واترك جميع الأوعية المتبقية طويلة وضعها في كيس الأعضاء. قم بتقليد الأجزاء الكبدية فوق وتحت الحمراء من كهف الوريد السفلي بنصف بوصة في ثلاثة أثمان من مخفضات البوصة بقفل إغراء. قم بتقشير الوريد البابي وشريان الكبد بثلاثة أثمان بوصة في ربع بوصة وربع بوصة بثلاثة أثمان البوصة.يقلل بقفل إغراء في هذا الوقت أيضا. ثم أغلق الكيس وقم بتخزين الكبد على الثلج حتى التروية. لإعداد دائرة التروية خارج الجسم الحي ، قم بتوصيل تدفق الخزان الرئيسي بمضخة طرد مركزي ومؤكسج تجاري خلف الأكسجين.قسم الأنبوب إلى سطرين. قم بتوصيل خط واحد بجهاز غسيل الكلى الذي يتم تصريفه مرة أخرى في الخزان الرئيسي. قم بتوصيل الخط الآخر بمرشح تقليل الكريات البيض.قم بتقسيم الخط بعد مرشح تقليل الكريات البيض إلى خط شرياني لتزويد الشريان الكبدي بثمانية وإلى خط وريدي بوابة لتوصيل النفهات ثمانية إلى خزان ثان يتم تصريفه في الوريد البابي عن طريق تدفق الجاذبية. قم بتثبيت تدفق البوابة ثم قم بتوصيل الخط الشرياني بحلقة كهف الوريد التي يتم تصريفها في الخزان الرئيسي. لاستعادة السوائل ، اضبط درجة حرارة بدء الدائرة والحمام المائي على 20 درجة مئوية.ثم قم بتغطية الحمام بغشاء غير منفذ لجمع الاستسقاء أو تسرب الثمانية. قم بتوصيل خط شفط مدفوع بمضخة الأسطوانة بالخزان الرئيسي. ثم حرر مشبك التدفق من الخزان الرئيسي واملأ الدائرة بمحلول التروية.ابدأ تشغيل مضخة الطرد المركزي بسرعة 1،500 طلقة في الدقيقة ، مع التأكد من إخراج كل الهواء من الدائرة. ثم قم بتشغيل مصدر الغاز إلى الأكسجين. يعد توصيل الكبد بالدائرة أصعب جزء من الإجراء.احرص على تجنب التواء الأنبوب وإزالة أي فقاعات لمنع إعاقة تدفق الكبد. يجب أيضا متابعة مستوى خزان البوابة بعناية. يجب ألا تكون فارغة أبدا.قم بإزالة الكبد من الجليد وإخراج محلول جامعة ويسكونسن بالمحلول الملحي. ثم ضع الكبد على الغشاء فوق الحمام المائي. قلل سرعة مضخة الطرد المركزي إلى 1000 طلقة في الدقيقة ، وضع مشابك في الجانب الشرياني من حلقة كهف الوريد.ثم قم بقطع الأنبوب بين المشابك وقم بتوصيل كل من تدفقات كهف الوريد بخط كهف الوريد. حرر المشبك من الخط الشرياني. صب النفوس ثمانية في القنية الشريانية للتخلص من الفقاعات وتوصيل الخط بالقنية.قم بزيادة مضخة الطرد المركزي إلى 1،500 طلقة في الدقيقة وحرر المشبك الثاني من خط كهف فينر وحرر المشبك من الخزان الوريدي للبوابة لملئه. دع محلول التروية يصب في قنية البوابة ثم قم بتوصيله. الحرص على الحفاظ على استقرار مستويات السوائل في خزان البوابة.بعد توصيل الكبد بالدائرة ، ارفع درجة حرارة الحمام المائي إلى 33 درجة مئوية خلال ال 60 دقيقة القادمة. تهدف إلى بدء تدفق الشرياني بحوالي 250 مل في الدقيقة عند 40 ملم من الزئبق. قد يصل هذا إلى 700 مل في الدقيقة أثناء التروية.بمجرد زيادة الضغط حتى 70 ملم من الزئبق ، استهدف تدفق الوريد المنفذ من 500 إلى 600 مل في الدقيقة عند ثلاثة إلى خمسة ملليمترات من الزئبق. بعد رفع درجة الحرارة ، سيزداد التدفق الوريدي للمنفذ حتى 1 ، 100 مل في الدقيقة. اخفض الخزان الرئيسي لضبط التدفق الخارج على سالب ملليغرامين من الزئبق لمنع احتقان الكبد عن طريق انسداد التدفق الوظيفي ، مع التأكد من عدم وجود فقاعات هواء في الأنبوب الكاف.اضبط تدفق الكاليز ثمانية على 500 مل في الساعة. الحرص على ضبط تدفق غسيل الكلى بحيث لا يتم تخفيف أو تركيز PERFUSE الثماني. حافظ على درجة حموضة منخفضة أثناء بدء التروية لحماية العضو.ضبط الضغط الجزئي لثاني أكسيد الكربون بشكل مستمر وصولا إلى 25 إلى 30 ملم من الزئبق بحيث يصل الرقم الهيدروجيني إلى مستوى فسيولوجي في غضون ساعة. لتقليد الظروف الفسيولوجية ، قم بحقن الجلوكوز والأنسولين باستمرار في الوريد البابي. حقن بيكربونات الصوديوم أو البوتاسيوم بعناية في الدائرة تحت التحكم المتكرر في الدم والغاز والكهارل ، ومراقبة التروية عن طريق غازات الدم الوريدية والشريانية الدورية وتحليلات ST.مراقبة تدفق الأوعية الدموية والضغط. سيحافظ التروية المستقرة على مقاومة مستمرة للأوعية الدموية في نهاية فترة التروية خارج الجسم الحي. قم باستدعاء نظام التروية لأسفل ، ثم بعد فصل الأنبوب عن الكبد ، قم بإخراج PERFUSE ثمانية بشكل مزدوج من الكبد بمحلول جامعة ويسكونسن البارد.أخيرا ، قم بتخزين الكبد على الثلج في كيس معقم قبل الزرع. يعد تحقيق تدفقات الأوعية الدموية المستمرة مع ضغوط مستقرة مؤشرا جيدا على الأكسجين الكافي. بمجرد الوصول إلى درجة الحرارة المستهدفة البالغة 33 درجة مئوية ، مستوى قيم التدفق عند نطاق ثابت ، فسيولوجي تقريبا لبقية فترة التروية ، في نفس الوقت يصبح العضو نشطا تمثيليايوضح هذا الرسم البياني ضغط الأكسجين الجزئي الوريدي، وهو علامة على استهلاك الأكسجين. خلال الساعتين الأوليين ، ينخفض ضغط الأكسجين الجزئي الوريدي إلى هضبة ثابتة في ذلك الوقت. في هذه الحالة النشطة الأيضية ، يبدأ الكبد في إنتاج الصفراء ويوفر جهاز غسيل الكلى توازن متوازن للإلكتروليت.يعمل قياس A ST عبر الإنترنت كمراقبة للتلف الخلوي الكبدي. على سبيل المثال ، في هذه التجربة ، لوحظت زيادة ضحلة في A ST خلال فترة التروية بأكملها. يكشف تلطيخ H و e بعد ست ساعات من التروية عن نخر خلايا الكبد أقل من 5٪ مع بنية فصيصية وجيبية سليمة.يظهر تلطيخ BAS للكبد المتدفق خارج الجسم الحي في نفس النقطة الزمنية تخزين الجليكوجين الخلوي المتجدد مقارنة بالتخزين المستنفد الذي لوحظ في ترقيع الموت القلبي للمتبرع المحفوظ على البارد. بعد هذا الإجراء ، يمكن إجراء نموذج إعادة تروية الأعضاء مثل زراعة الكبد لدراسة تأثير نضح الكبد خارج الجسم الحي على إصابة إعادة التروية ووظيفة الأعضاء.

technique-subnormothermic-ex-vivo-liver-perfusion-for-storage

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

&lt; p class = "jove_content" &gt; يمكن تحقيق دراسة فسيولوجيا الأعضاء الحيوانية من خلال إجراء نظام نضح تجريبي خارج الجسم الحي. يمكن أن تكون إضافة كلية الخنازير ، كعضو متماثل إلى نموذج نضح الكبد خارج الجسم الحي الذي تم تطويره مسبقا خطوة رئيسية لتحقيق بيئة فسيولوجية أفضل.

خطوات تجربة الكبد والكلى الخنازير الذاتية خارج الجسم الحي

نقدم هنا بروتوكولا يصف نضح آلة الأكسجين خارج الموقع لترقيع الكبد المتبرع. تحتوي هذه المقالة على بروتوكول خطوة بخطوة لشراء وإعداد طعم الكبد للتروية الآلية ، وإعداد سائل التروية ، وتجهيز آلة التروية وإجراء نضح آلة الحرارة العادية المؤكسجة لطعم الكبد.

خارج الموقع سوي الحرارة آلة الإرواء من الأكباد المانحة

نحن تصف طريقة فيفو السابقين نضح الجهاز الطعوم الكبد الإنسان في درجة حرارة subnormothermic (21 ° C).

المحافظة على الكبد وظيفية الإنسان والاسترداد من قبل وسائل Subnormothermic آلة الإرواء

وقد أدى النقص الحاد في الجهاز زيادة استخدام الطعوم الكلى هامشية للزرع. وقد أثار هذا الاهتمام في وسائل التخزين البديلة، لأن الطعوم هامشية خاصة يتسامح مع التخزين البارد سيئة. تقنية سوي الحرارة خارج الجسم الحي الكلى التروية (NEVKP) تمثل طريقة الحفاظ رواية لترقيع الكلى قبل الزرع.

سوي الحرارة<em&gt; السابقين فيفو</em&gt; الإرواء الكلى للحفاظ على الكلى الطعوم قبل الزرع

وهناك نقص كبير من المانحين كبد، وجرى توسيع نطاق معايير المانحين الكبد. وقد وضعت نورموثيرميك السابقين فيفو الكبد التروية (نيفلب) لتقييم وتعديل وظيفة الجهاز. يوضح نموذج الفئران من نيفلب هذه الدراسة واختبارات قدرة سي-الكاتالاز، للتخفيف من حدة الضرر الحفاظ على الكبد.

نموذج حيوانات صغيرة من نضح الكبد نورموثيرميك السابقين فيفو

نادرا ما تم استكشاف التروية الآلية خارج الجسم الحي (NEVP) للحفاظ على الطعم الخيفي للبنكرياس. نقدم تقنية مبتكرة للحفاظ على الطعم الخيفي للبنكرياس قبل الزرع.

نضح البنكرياس خارج الجسم الحي للحفاظ على الطعم الخيفي للبنكرياس قبل الزرع

يمكن استخدام نموذج الخنازير لتروية آلة الحرارة المعيارية للكبد (NMP) ، الموصوف هنا ، بنجاح لدراسة NMP كاستراتيجية حفظ ، وأداة لتقييم الجدوى ، ومنصة لإصلاح الأعضاء. إنه يحمل قيمة انتقالية عالية ، ولكنه يمثل تحديا تقنيا ويتطلب عمالة مكثفة.

نضح الكبد المعزول Normothermic الخنازير

تم إنشاء نظام نضح الكبد خارج الجسم الحي (NEVLP) لكبد الفئران. يتطلب هذا النظام خبرة في الجراحة المجهرية ولكنه يسمح بنتائج نضح قابلة للتكرار. تسهل القدرة على استخدام كبد الفأر التحقيق في المسارات الجزيئية لتحديد إضافات الفوسات الجديدة وتمكن من تنفيذ التجارب التي تركز على إصلاح الأعضاء.

نورموذرميك خارج الجسم الحي آلة الكبد التروية في الماوس

يحدد هذا البروتوكول منهجية إنشاء نموذج خنزير باستخدام التروية الآلية التي يتم التحكم فيها بدرجة حرارتها المتغيرة (MP) للحفاظ على الكبد المتبرع ، متبوعا بزراعة الكبد تقويم العظام (OLTx). يهدف إلى تعزيز معدل نجاح OLTx باستخدام كبد التبرع من المتبرع بعد موت الدورة الدموية (DCD) وإنشاء نموذج مستقر.

الحفاظ على التبرع بالخنازير بعد الموت أثناء الدورة الدموية (DCD) الكبد عن طريق التروية وزراعة الكبد بتقويم العظام

هنا ، نقدم بروتوكولا لإنشاء نموذج طويل الأمد للتخزين البارد للكبد وزرعه في السنجاب الأرضي Daurian (DGS) ، والذي كان يمثل تحديا تقنيا في نماذج القوارض القياسية.

التخزين البارد للكبد وزرعه في السناجب الأرضية Daurian المتكيفة على البارد

تعلم تقنية الإرواء تحت الحرارة الطبيعية للكبد خارج الجسم للحفاظ على الطعوم الهامشية وتقييمها قبل الزراعة. تقلل هذه الطريقة من إصابات الحفظ مقارنة بالتخزين البارد التقليدي.

تقنية Subnormothermic

استكشف المزيد من الفيديوهات