تقدير مختبر صافي الغذائية الكفاءة نقل المتجانسات PCB إلى بحيرة سمك السلمون المرقط ( Salvelinus namaycush) من فريسته

الهدف العام من التجربة التالية هو تقدير كفاءة النقل الغذائي الصافي لمتجانسات ثنائي الفينيل متعدد الكلور إلى سمك السلمون المرقط في البحيرة من فريستها ، ثم تحديد ما إذا كانت درجة الكلور أو درجة ذوبان الدهون في متجانس ثنائي الفينيل متعدد الكلور لها تأثير على كفاءة النقل الغذائي الصافية. يتم تحقيق ذلك من خلال إجراء تجربة معملية أولا يتم فيها تغذية سمك السلمون المرقط في البحيرة بغذاء طبيعي مثل بلو على مدى أربعة أشهر على الأقل. كخطوة ثانية ، يتم استخدام الاستخراج والتنظيف لاستخراج مركبات ثنائي الفينيل متعدد الكلور من سمك السلمون المرقط في البحيرة وأنسجة blo وإعداد المستخلصات لإجراء القياس الكمي.

بعد ذلك ، يتم استخدام قياس الطيف الكتلي لكروماتوغرافيا الغاز باستخدام التأين الكيميائي السالب لتحديد تركيزات متجانسات ثنائي الفينيل متعدد الكلور في أنسجة السمك. وتبين النتائج أن كفاءات النقل الغذائي الصافية لمتجانسات ثنائي الفينيل متعدد الكلور إلى تراوت البحيرة من فرائسها لا تتأثر بشكل كبير بدرجة كلورة متجانسات ثنائي الفينيل متعدد الكلور. تظهر النتائج أيضا أن نشاط سمك السلمون المرقط في البحيرة لا يبدو أن له تأثيرا كبيرا على كفاءة النقل الغذائي الصافي.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل حقن الملوثات مباشرة في أسماك SIVs أو في طعام أسماك SIVs ، هي أن أسماك SS تتراكم الملوثات بطريقة تحاكي بشكل أفضل عملية تراكم الملوثات في الأسماك الحديدية في بيئتها الطبيعية. يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية لأن خطوات التركيز والاستخراج تتطلب عناية كبيرة ليتم إجراؤها بشكل صحيح. من الأفضل تعلم هذه الخطوات من خلال الملاحظة البصرية.

سيوضح هذا الإجراء جيم أوكيف ، كيميائي من مختبري. أولا ، قم بإذابة كمية مناسبة من الأسماك المفترسة المخزنة مسبقا في فريزر سالب 30 درجة مئوية. قطع الأسماك المفترسة المذابة إلى قطع تزن حوالي جرام إلى خمسة جرامات باستخدام سكين الطهاة.

بعد ذلك ، قم بوزن كمية الأسماك المفترسة التي سيتم وضعها في كل خزان وقم بإسقاط القطع في كل خزان. بعد السماح للأسماك المفترسة بالتغذية لمدة ساعة تقريبا ، قم بإزالة الطعام الذي تم تناوله واتركه يجف في الهواء لمدة 20 دقيقة تقريبا. بمجرد وزن الطعام ، سجل كمية الطعام الموضوعة في كل خزان وكمية الطعام التي تم تناولها لكل خزان.

بعد التضحية بالأسماك المفترسة وتجميدها ، حدد مجموعة من مركبات الأسماك المفترسة والأسماك و / أو الأسماك المفترسة لإذابة الجليد ، واترك المركبات تذوب جزئيا باستخدام التجانس بالحجم المناسب. كل من المركبات. لكل مركب ، ضع عينة من 50 إلى 100 جرام من الجانس في برطمان نظيف وأسيتون ومغسول ومصنف.

بعد تغطية البرطمان ، قم بتخزينه عند سالب 30 درجة مئوية حتى وقت معالجة الاستخراج. تزن 20 جراما من أنسجة السمك المتجانسة المذابة في دورق سعة 200 مل ، ثم حوالي 40 جراما من كبريتات الصوديوم واخلطها جيدا باستخدام ملعقة. أضف محلول سبايك بديل يحتوي على المتجانسات 30 و 61 و 161 و 166 بتركيز ينتج تركيزا نهائيا يبلغ 20 نانوغرام لكل ملليلتر.

في المستخلص. اترك العينة تجف في درجة حرارة الغرفة أثناء الخلط كل 20 دقيقة بعد أن تصل العينة إلى قوام الرمل الجاف. قم بإعداد جهاز استخراج سولي مع قارورة سعة 500 مل تحتوي على رقائق غليان تفلون وجورب و sl ومكثف.

ثم يضاف خليط السمك المجفف إلى كشتبان زجاجي بقاع قرص خشن. أضف 150 مل من محلول مخلوط مسبقا من 50٪ هكسان و 50٪ كلورو ميثان إلى الدورق المستخدم في العينة وحرك أثناء كشط جدران الدرق. باستخدام ملعقة ، انقل المذيب إلى الجزء العلوي من السوليت ، مما يسمح له بالدوران عبر السوليت وفي القارورة.

بعد تكرار الخطوة السابقة ، ضع الجورب المضاء بالقارورة المرفقة على عنصر تسخين وقم بإرفاق مكثف. بعد ذلك ، قم بتشغيل عنصر التسخين ، مع غليان المذيب برفق. ثم استخرج المذيب لمدة لا تقل عن 16 ساعة ، مع التأكد من توفير الماء البارد للمكثفات.

بمجرد أن يبرد المذيب ، تحقق لمعرفة ما إذا كان أي من قوارير العينة يحتوي على الماء. بالنسبة للقوارير التي تحتوي على الماء ، أضف كبريتات الصوديوم ولفها حتى يتم امتصاص الماء. بعد ذلك ، ركز العينة باستخدام مكثف عينة النيتروجين.

بعد أن يكون حجم العينة أقل من ملليلترين ، انقل العينة إلى قارورة حجمية سعة خمسة ملليلتر. ثم ارفع الحجم النهائي إلى خمسة ملليلتر باستخدام خمسة إلى سبع غسلات صغيرة من الهكسان لنقل العينة المتبقية من الأواني الزجاجية السابقة إلى القارورة الحجمية. في هذه المرحلة ، انقل العينة إلى قارورة سعة 10 مليلتر وقم بتسميتها بمعلومات العينة.

تحضير هلام السيليكا المحمض عن طريق إضافة 44 جراما من حمض الكبريتيك المركز إلى 100 جرام من هلام السيليكا المنشط. ثم أضف 10 جرامات من هلام السيليكا المحمض إلى عمود كروماتوغرافيا صغير يحتوي على سدادة صغيرة من الصوف الزجاجي في الأسفل. بعد التنظيف المسبق للعمود ب 10 ملليلتر من الهكسان ، أضف ملليلترا واحدا من مستخلص العينة إليه ، وقم بمسح العمود ب 20 مل من الهكسان واجمع العينة في أنبوب زجاجي مدبب سعة 20 مل.

بعد ذلك ، ضع الأنبوب الزجاجي على مبخر النيتروجين أو جهاز NVAP تحت تيار من النيتروجين واغمره في الماء الساخن. بمجرد تركيز العينة إلى أقل من مليلتر واحد ، انقلها إلى قارورة حجمية سعة مليلتر واحد. ثم ارفع الحجم النهائي إلى مليلتر واحد باستخدام غسلتين إلى ثلاث غسلات صغيرة من الهكسان لنقل العينة المتبقية من الأنبوب إلى القارورة الحجمية.

بعد ذلك ، انقل العينة إلى قارورة أخذ العينات الأوتوماتيكية سعة 1.8 مليلتر تحمل معلومات العينة. أضف أربعة ميكرولترات من المعيار الداخلي المناسب ، والذي يكون في هذه الحالة عشاري كلورو الشمر إلى القارورة. يمكنك استخدام المعايير المناسبة لمعايرة الأداة.

ثم قم بإعداد نظام قياس الطيف الكتلي الكروماتوغرافي في وضع التأين الكيميائي السالب مع الهيدروجين كغاز ناقل بمعدل واحد مليلتر في الدقيقة والميثان كغاز كاشف. استخدم عمودا شعريا من السيليكا منصهرة مغطى ب DB XLB عند 0.25. سمك فيلم ميكرومتر للفصل.

حقن ميكرولتر إلى اثنين من العينة باستخدام وضع الحقن المقسم. في هذه المرحلة ، قم بتحليل جميع المعايير والعينات بالطريقة القياسية الداخلية باستخدام الكربون 13 المسمى DECA chloro b fennel. قم بإجراء فحص للمعايرة الأولية عن طريق تشغيل معيار مصدر ثان وسهم الكلور 1242 و 1260 ، ثم قارن القيم المتوقعة لمتجانسات الكلور الأسهم مع الكميات المرصودة من إجراء الفحص هذا.

بمجرد الانتهاء من إجراء المعايرة الأولي بنجاح ، أكمل تحليل جميع العينات. قم بإجراء فحص معايرة كل 10 عينات باستخدام أي من مخاليط المعايرة من المعايرة الأولية. أظهرت تراوت بحيرة تري نموا كبيرا مثل سمك السلمون المرقط في البحيرة الأولية.

تراوح متوسط الأوزان من 694 إلى 907 جراما بينما تراوح متوسط أوزان سمك السلمون المرقط النهائي من 853 إلى 1،566 جراما. زاد متوسط تركيزات متجانسات ثنائي الفينيل متعدد الكلور في تراوت البحيرة أثناء التجربة لجميع متجانسات ثنائي الفينيل متعدد الكلور. لم يختلف متوسط كفاءة النقل الغذائي الصافي لتراوت البحيرة النشط اختلافا كبيرا عن سمك السلمون المرقط غير النشط.

احتفظ تراوت البحيرة النشط بمتجانسات ثنائي الفينيل متعدد الكلور من الطعام الذي استهلكته بنفس كفاءة سمك السلمون المرقط غير النشط تقريبا ل 66 من 75 متجانسا ثنائي الفينيل متعدد الكلور. كان الخطأ المعياري حول متوسط تقدير كفاءة النقل الغذائي الصافي صغيرا لستة من متجانسات ثنائي الفينيل متعدد الكلور التسعة الأخرى. وكانت الأخطاء المعيارية بشأن متوسط تقدير كفاءة النقل الغذائي الصافية منخفضة إلى حد ما حيث أظهرت درجة المعالجة بالكلور التقديرات المتزايدة لكفاءة النقل الغذائي الصافية انخفاضا طفيفا.

ومع ذلك، فإن كفاءة النقل الغذائي الصافية لم تتفاوت بشكل كبير مع زيادة درجة الكلور في متجانسات ثنائي الفينيل متعدد الكلور AS log KOW، وانخفضت كفاءة النقل الغذائي الصافية بشكل كبير. كان معدل الانخفاض هذا مختلفا اختلافا كبيرا عن الصفر ، ولكنه كان يساوي 7٪ لكل وحدة من KOW اللوغاريتمية. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تقدير كفاءات النقل الغذائي الصافي لمتجانسات CB إلى أسماك ous من فرائسها باستخدام تجربة معملية يتم فيها تغذية الأسماك بغذاء طبيعي.

لا تنس أن العمل مع المذيبات العضوية مثل الهكسان ودي كلورو الميثان يمكن أن يكون خطيرا ويجب دائما اتخاذ الاحتياطات مثل التهوية المناسبة عند تنفيذ هذا الإجراء.