تعد أجنة الدجاج نموذجاً ممتازاً لدراسة التطور المبكر للفقاريات، ويرجع ذلك جزئياً إلى سهولة الحفاظ عليها وانخفاض تكلفتها. وعلى عكس معظم الكائنات النموذجية التي يتم تربيتها في المختبر، يتم شراء بيض الدجاج المخصب من مورد خارجي. بالإضافة إلى ذلك، يتطلب الحفاظ على البيض والعمل به القليل جداً من المعدات المتخصصة. سيوفر هذا الفيديو خلفية عامة حول كيفية الحصول على بيض الدجاج والحفاظ عليه، والتقنيات الأساسية للعمل مع الأجنة النامية، وبعض التطبيقات العملية لهذه الطرق.
قبل أن نناقش العمل مع الكتاكيت في المختبر، دعونا نراجع كيف تعتني الدجاجات ببيضها في الطبيعة. على الرغم من أن البيض يكون مخصباً بالفعل عند وضعه، إلا أن نمو الكتكوت يتوقف عندما يتعرض البيض لدرجات حرارة خارجية أكثر برودة. وبعد وضع حوالي 12 بيضة، تجلس الدجاجة على العش لاستئناف نمو الجنين. وخلال فترة الحضانة، تقوم الدجاجة بتدوير البيض لتدفئته بشكل متساوٍ ومنع الجنين من الالتصاق بالقشرة. وإذا سارت الأمور على ما يرام، فبعد 21 يوماً، ستحصل الأم على مجموعة من الكتاكيت.
إذاً، كيف يجمع العلماء عدداً كافياً من البيض لتجاربهم؟ أمم... قد يستغرق ذلك وقتاً طويلاً. ونظراً لأن الدجاج مستأنس على نطاق واسع، يمكن الحصول على البيض المخصب بسهولة من المفرخات أو مزارع التربية. بل ويمكن طلب البيض في مراحل نمو محددة.
بمجرد وصول البيض إلى المختبر، يمكن تخزينه في درجة حرارة 13 - 16 °C لمدة تصل إلى 5 أيام. وعندما تكون مستعداً لبدء نموه، اترك البيض ليدفأ حتى يصل إلى درجة حرارة الغرفة، ثم انقله إلى حاضنة هزازة عند 37 °C مع رطوبة بنسبة 60% حتى يصل إلى المرحلة المطلوبة.
تتطلب معظم التجارب التي تُجرى على الكتاكيت بضع خطوات تحضيرية، مثل التحقق مما إذا كانت البيوض التي استلمتها مخصبة في المقام الأول. وتتمثل الطريقة السهلة في استخدام مصدر ضوء ساطع أو صندوق فحص البيض لإضاءة البيضة. وباستخدام هذه التقنية، المعروفة باسم الفحص الضوئي (candling)، يمكن رؤية التراكيب الداخلية مثل الأوعية الدموية للتأكد من وجود الجنين.
إن ترك البيضة سليمة يحسن من فرص بقاء الكتكوت على قيد الحياة، ولكن القشرة تمنع الوصول إلى الجنين. ولحل هذه المشكلة، يستخدم الباحثون تقنية تسمى فتح نافذة (windowing).
ابدأ بوضع البيوض على جانبها وتحديد الجزء العلوي لتعريف الجانب الذي سيرتفع إليه الجنين. ولمنع تلف المح (yolk) أثناء فتح النافذة، يتم إزالة كمية صغيرة من الألبومين، أو بياض البيض، لخفض الجنين بعيداً عن القشرة. وللقيام بذلك، قم أولاً بتعقيم القشرة عن طريق مسحها بـ 70% ethanol. وبعد جفاف القشرة، ضع قطعة من الشريط اللاصق بسلاسة فوق الطرف غير المدبب للبيضة. ثم استخدم إبرة معقمة لثقب الشريط والقشرة. أدخل الإبرة إلى الأسفل لتجنب إتلاف المح وقم بإزالة 5 ml من الألبومين. وأخيراً، لمنع تسرب الألبومين، قم بسد الثقب بقطعة أخرى من الشريط اللاصق.
لقص القشرة، ضع قطعة من الشريط اللاصق فوق المنطقة التي تخطط لفتح النافذة فيها. وباستخدام مقص، اصنع ثقباً صغيراً في القشرة وابدأ في قص فتحة دائرية. خلال هذه العملية، سيمنع الشريط اللاصق شظايا القشرة من السقوط على الجنين.
وحتى بعد فتح النافذة، قد يصعب رؤية الأجنة في مراحلها المبكرة بسبب صغر حجمها وشفافيتها. ولتحسين التباين بين الجنين والمح، يمكن استخدام حبر الهند (India ink) المخفف وغير السام. يُحقن الحبر في المح أسفل الجنين ويُترك لينتشر. يمكن الآن رؤية الجنين بتباين أعلى مقابل الخلفية الداكنة. وبعد إجراء المعالجات التجريبية، يجب إعادة إغلاق النافذة بالشريط اللاصق وإعادة وضع البيضة في الحاضنة.
بعد أن أصبحت على دراية بالتقنيات الأساسية للتعامل مع البيض، دعونا نرى كيف تُستخدم هذه الطرق لإجراء تجارب على أجنة الدجاج.
في البداية، يمكن استخدام عملية الفحص الضوئي (candling) لتحديد موقع البنى الجنينية في البيض السليم. على سبيل المثال، تُستخدم الأغشية خارج الجنينية لجنين الدجاج بشكل شائع لإكثار الفيروسات. ولإصابة الغشاء، يتم إجراء الفحص الضوئي لتحديد الواجهة بين التجويف السلوي وكيس الهواء، وذلك لحقن الفيروس مباشرة في التجويف السلوي دون إلحاق الضرر بالجنين. وبعد بضعة أيام من التحضين، يمكن حصاد أعداد كبيرة من الجزيئات الفيروسية من السائل السلوي.
تعد عملية فتح نافذة في البيضة (Egg windowing) ممارسة مفيدة للغاية لأنها تتيح الوصول إلى الجنين لإجراء التجارب. تبدأ العديد من التجارب بإيصال DNA إلى أنسجة محددة عن طريق الحقن المجهري. ثم تُوضع أقطاب كهربائية حول النسيج المستهدف ويُطبق مجال كهربائي لنفاذية غشاء الخلية مؤقتاً ودفع الأحماض النووية إلى داخل الخلية.
عند إجراء تجارب على الأجنة المبكرة، يكون حقن حبر الهند (India ink) مفيداً بشكل خاص لتصوير الأنسجة الشفافة. حيث يسمح التباين المحسن هنا للباحثين بحقن محلول DNA مجهرياً في نطاقات نسيجية دقيقة. وفي النهاية، يمكن لهذه التقنية أن تنتج خلايا مُعلمة بشكل فردي، والتي يمكن مراقبتها بمرور الوقت لتتبع انقسامات الخلايا.
لقد شاهدت للتو فيديو JoVE حول رعاية الصيصان. تناول هذا العرض الأساسيات المتعلقة بالتعامل مع بيض الدجاج وصيانته، والتقنيات الشائعة للعمل مع الصيصان، وبعض الأمثلة على كيفية تطبيق هذه الطرق في الأبحاث البيولوجية. شكراً للمشاهدة!
تُعد الكتاكيت (Gallus gallus domesticus) أداة بحثية قيمة، ليس فقط لدراسة مفاهيم هامة في تطور الفقاريات وعلم الأعصاب وبيولوجيا الأورام، بل وأيضاً كنظام…
الفصول في هذا الفيديو
0:00
نظرة عامة
0:44
مناولة البيض والعناية بها
2:08
تجهيز البيض للتجارب
4:31
التطبيقات
6:14
الملخص
حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.