Development of an IFN-&#947; ELISpot Assay to Assess Varicella-Zoster Virus-specific Cell-mediated Immunity Following Umbilical Cord Blood Transplantation

Insaf Salem Fourati; Anne-Julie Grenier; &#201;lyse Jolette; Natacha Merindol; Philippe Ovetchkine; Hugo Soudeyns

doi:10.3791/51643

وضع النطاقي الحماقي الفيروسات محددة بوساطة خلية الحصانة ELISPOT الفحص لتقييم الإنترفيرون γ-عقب ال...

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Development of an IFN-γ ELISpot Assay to Assess Varicella-Zoster Virus-specific Cell-mediated Immunity Following Umbilical Cord Blood Transplantation

وضع النطاقي الحماقي الفيروسات محددة بوساطة خلية الحصانة ELISPOT الفحص لتقييم الإنترفيرون γ-عقب الحبل السري زرع الدم

Full Text

16,389 Views

08:04 min

July 9, 2014

DOI: 10.3791/51643-v

Insaf Salem Fourati¹, Anne-Julie Grenier¹, Élyse Jolette¹, Natacha Merindol¹, Philippe Ovetchkine^2,3, Hugo Soudeyns^1,3

¹Unité d'Immunopathologie Virale, Centre de Recherche du CHU Sainte-Justine, Department of Microbiology, Infectiology & Immunology, Faculty of Medicine,Université de Montréal, ²Infectious Diseases Service, CHU Sainte-Justine, Faculty of Medicine,Université de Montréal, ³Department of Paediatrics,Université de Montréal

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

أجيال جديدة من المقايسات وظيفية مثل انترفيرون غاما (الإنترفيرون γ) ELISPOT، الذي كشف عن إنتاج السيتوكينات على مستوى خلية واحدة وتقديم كل من توصيف الكمي والنوعي للاستجابات الخلايا التائية يمكن استخدامها لتقييم الاستجابات بوساطة الخلايا المناعية الموجهة ضد الحماق النطاقي فيروس (جدري الماء).

الهدف العام من الإجراء التالي هو الكشف عن إنتاج IFN جاما على مستوى الخلية المفردة لتقييم الاستجابة المناعية بوساطة الخلية الموجهة ضد فيروس الحماق النطاقي أو VZV. يتم تحقيق ذلك عن طريق طلاء آبار صفيحة بقعة زقاق 96 بئر أولا بجسم مضاد أحادي النسيلة يلتقط IFN. في الخطوة الثانية ، يتم طلاء الخلايا وتحفيزها بمستضد VZV.

بعد ذلك ، تتم إزالة الخلايا ويتم تصنيف جاما IFN التي تم التقاطها بجسم مضاد للكشف ، وفي النهاية يمكن قياس حجم وجودة الاستجابات المناعية بوساطة الخلية الموجهة ضد BZV. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل PMHC والرعشة وتلوين السيتوكين داخل الخلايا هي أن إنترفيرون جاما. الاختبار القوي القابل للتكرار وغني بالمعلومات يمكن إجراؤه على عينات الدم الوريدية باستخدام معدات منخفضة التقنية نسبيا مثل الحاضنات وأجهزة الطرد المركزي ومجاهر التشريح.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Explore More Videos

علم المناعة العدد 89 الحماق النطاقي الفيروس الخلية بوساطة الحصانة وخلايا T انترفيرون غاما ELISPOT زرع دم الحبل السري