Using Fluorescent Proteins to Monitor Glycosome Dynamics in the African Trypanosome

Sarah Bauer; Meghan Conlon; Meredith Morris

doi:10.3791/51647

باستخدام البروتينات الفلورية لرصد ديناميات Glycosome في المثقبيات الأفريقي

JoVE Journal
Immunology and Infection

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Immunology and Infection

Using Fluorescent Proteins to Monitor Glycosome Dynamics in the African Trypanosome

باستخدام البروتينات الفلورية لرصد ديناميات Glycosome في المثقبيات الأفريقي

Full Text

9,407 Views

10:04 min

August 19, 2014

DOI: 10.3791/51647-v

Sarah Bauer¹, Meghan Conlon¹, Meredith Morris¹

¹Department of Genetics and Biochemistry,Clemson University Eukaryotic Pathogens Innovation Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

يصعب دراسة ديناميكيات الجليكوسوم في المثقبيات الأفريقية من خلال تقنيات بيولوجيا الخلية التقليدية مثل المجهر الإلكتروني والفلوري. كوسيلة لمراقبة سلوك العضية الديناميكية ، تم استخدام نظام مراسل عضية الفلورسنت جنبا إلى جنب مع قياس التدفق الخلوي لمراقبة ديناميكيات الجليكوسوم في الوقت الفعلي في الطفيليات الحية.

الهدف العام من التجربة التالية هو مراقبة التغيرات في الوقت الفعلي في تكوين الجليكو في الخلايا الحية. يتم تحقيق ذلك من خلال التعبير عن بروتين فلوري مدمج في تسلسل استهداف Pero Somal PTs الثاني. يتم استيراد بروتين الاندماج إلى مناطق الجليكو الناضجة ، والتي تصبح عضية فلورية.

التدهور وإعادة التدوير إلى فقدان التألق الذي يمكن مراقبته عن طريق التدفق تتعرض خلايا القياس الخلوي لظروف بيئية مختلفة من أجل تحديد العوامل التي تؤدي إلى إعادة تشكيل الجليكو. تظهر النتائج أن تكوين الجليكو يختلف استجابة للتغيرات البيئية بناء على التغيرات في التألق الخلوي عند مرور الخلايا من الوسائط الفقيرة بالمغذيات إلى الوسائط الغنية بالمغذيات. لذا فإن الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل المجهر الإلكتروني والفلوري ، هي أنها تسمح بالتحليل في الوقت الفعلي لآلاف الخلايا.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos