قياس وظيفة الجهاز التنفسي في الفئران عن طريق تخطيط التحجم غير مقيد كامل الجسم

الهدف العام من هذا الإجراء هو قياس المعلمات التنفسية من قوارض واعية باستخدام تخطيط تحجم الجسم بالكامل غير المقيد. يتم تحقيق ذلك عن طريق معايرة مضخم الجسر أولا. بمجرد المعايرة ، يتم وضع الفأر داخل غرفة التحجم ويسمح له بالتأقلم قبل الاختبار.

بعد ذلك ، يتم تسجيل تغيرات الضغط التي تحدث داخل الغرفة. ثم يتم حساب معلمات الجهاز التنفسي المتعددة من المعلومات التي تم الحصول عليها أثناء استخدام نظام تخطيط التضخم. تظهر النتائج أن تخطيط تحجم الجسم بالكامل غير المقيد هو تقييم موثوق به لوظائف الرئة في القوارض.

تتمثل المزايا الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل تخطيط التحجم الغازي في أن لا يتم تخديرها ، مما يعني أننا لا نربط القطع الأثرية بالتخدير. بالإضافة إلى ذلك ، نظرا للطبيعة غير الغازية لهذا البروتوكول ، فأنت يسمح بتدابير طولية. بشكل عام ، يميل الأفراد الجدد في هذه التقنية إلى التقليل من شأن الوقت اللازم لتأقلم مع غرفة البلازما.

للبدء ، قم بإعداد مضخم جسر آلة الحصول على البيانات ومحول الضغط. عندما تكون جاهزا ، انتقل إلى الكمبيوتر وافتح برنامج التحليل. افتح خيار إعدادات القناة الموجود في شريط أدوات الإعداد وقم بتغيير عدد القنوات التي يتم تسجيلها إلى قناة واحدة.

بعد ذلك ، قم بإعداد جهاز عمود الماء كما هو موضح. قم بتوصيل ماصتين مصليتين سعة خمسة ملليلتر بأنابيب بلاستيكية. املأ الأعمدة بالماء وتأكد من توازن مستويات المياه.

باستخدام المسطرة ، قم بتوصيل قطعة واحدة من الأنابيب البلاستيكية بالجزء العلوي من كل ماصة. لمعايرة مضخم الجسر ، أولا ، قم بتوصيل حقنة سعة مليلتر واحد مملوءة ب 300 ميكرولتر من الهواء على الجانب الأيمن من عمود الماء. قم بتوصيل الأنبوب الأيسر بالموصل الموجود على محول الضغط.

بعد ذلك ، افتح قائمة التمرير لأسفل وحدد مضخم صوت الجسر. أدخل الإعدادات الصحيحة وانقر فوق صفر لتعيين التتبع عند صفر مللي فولت تقريبا. عندما تصبح جاهزا ، اضغط على حقنة المليلتر الواحد ، سيؤدي الضغط الناتج إلى تحريك الماء في العمود بمقدار سنتيمتر واحد ويظهر ارتفاعا مفاجئا في البرنامج بسبب تغير الضغط.

بعد ذلك ، حدد وحدات الإدخال من نافذة مضخم الصوت الجسر وقم بتمييز تتبع الخلفية قبل السنبلة ، والمعروف أيضا باسم منطقة الصفر. انقر فوق السهم الموجود بجوار 0.1 لإنتاج إشارة الخلفية ضمن نطاقات سالب 0.002 مللي فولت وموجب 0.002 مللي فولت. اكتب صفر في النافذة المجاورة لنافذة إشارة الخلفية.

قم بتمييز منطقة الضغط المتزايد على الرسم البياني من وقت ضغط المحقنة. انقر فوق السهم الموجود بجوار 0.2. يجب أن تكون القيمة في حدود 0.9 إلى 1.2 مللي فولت.

بعد ذلك ، اكتب واحدا في النافذة. بجانب نافذة الضغط المتزايد ، انتقل إلى تحديد الوحدات وحدد السنتيمترات H2O واضغط على موافق. ارجع إلى قائمة مضخم الصوت للجسر.

حدد مللي فولت واحد واضبط مكبر الصوت على الصفر. سيؤدي ذلك إلى إكمال المعايرة ويمكن إزالة عمود الماء بأمان. للحصول على أفضل النتائج ، يجب إدخال الاختبار إلى غرفة تخطيط التحجم قبل أسبوع واحد من بدء التجريب.

للبدء ، ضع درجة الحرارة الرطوبة النسبية ، وقم بفحص الطرف الكامل من غرفة التحجم وسجل درجة الحرارة والرطوبة والضغط الجوي. بعد تسجيل وزن ودرجة حرارة جسمه ، ضعه في غرفة تخطيط التضخم وأغلق الغرفة. بعد ذلك ، أدخل محول الطاقة والحقنة في الفتحتين على الجانب الآخر من الغرفة.

اضغط على ابدأ في البرنامج وقم بالتسجيل لمدة تصل إلى 45 ثانية. تأكد من تسجيل خمس ثوان من البيانات عندما لا يتحرك. توقف عن التسجيل بعد 45 ثانية وقم بإزالة الماوس من غرفة تخطيط التضخم.

سجل على الفور درجة حرارة الغرفة ورطوبتها. أعد الماوس إلى رذاذ القفص وامسح الغرفة بنسبة 80٪ لكل حجم. يسمح الإيثانول للغرفة بالجفاف والعودة إلى درجة الحرارة والرطوبة الأساسية قبل الانتقال إلى الماوس التالي.

للبدء ، افتح البرنامج في وضع ملء الشاشة وحدد البيانات. افتح نافذة لوحة البيانات المصغرة وحدد قياسات الدورة في العمود الأيسر ومتوسط الارتفاع الدوري. في العمود الأيسر من العمود الأول، حدد الخيار، وقم بتعيين مقياس الحد الأدنى لاكتشاف الذروة إلى واحد.

سيؤدي ذلك إلى تقديم انكماش الضغط بسبب قياس PT لحجم المد والجزر في لوحة البيانات المصغرة. حدد قياسات الدورة متبوعة بعدد الأحداث لتقديم قياس التردد F. بعد ذلك ، حدد قياسات الدورة متبوعة بمتوسط الفترة الدورية لتقديم إجمالي وقت دورة التنفس لقياس الثواني T لتوليد قيم ذروة الإلهام ووقت انتهاء الصلاحية ، والتأكد من أن المؤشر يتجاوز مباشرة الحد الأقصى لقيع الذروة ، وأضف تعليقا على تسعة قمم وقيعان متسلسلة.

افتح نافذة جديدة وانقر فوق معلومات التحديد في العمود الأيسر والمدة في العمود الأيمن قبل التحديد. حسنا ، حدد الماكرو الموجود في الجزء العلوي من البرنامج لبدء التسجيل. بعد ذلك ، حدد موقع مربع التعليق الأول باستخدام الأداة الدقيقة.

انتقل إلى بداية الملف، متبوعا بالتعليق الأول وحدد الأمر إضافة إلى لوحة البيانات. أخيرا ، حدد بدء التكرار من أوامر الماكرو وتأكد من تعيين نافذة عدد التكرارات على تسعة. استخدم خيار البحث عن التالي وحدد الأمر إضافة إلى لوحة البيانات.

عند الانتهاء، حدد وكرر. أوقف التسجيل واحفظ الماكرو بناء على رقم. يمكن الآن تشغيل الماكرو للحصول على الإلهام ووقت انتهاء الصلاحية بين كل تعليق.

نظرا لأن انتهاء الصلاحية والإلهام يحدثان على التوالي ، تظهر البيانات بهذا الترتيب وتحتاج إلى تقسيمها يدويا. يوضح أثر التنفس هذا البيانات المتسقة المناسبة من تحكم. تمت إضافة تسعة تعليقات متتالية في قمم وقيعان تذبذبات التنفس للحصول على معلمات الجهاز التنفسي.

توضح هذه الأمثلة الآثار دون المستوى الأمثل الأكثر شيوعا والتي لا ينبغي أبدا استخدامها للتحليل. تم تسجيل هذا الأثر أثناء استنشاق وتحريك أثر مع التذبذبات التي تزداد تدريجيا بمرور الوقت وعادة ما يكون ناتجا عن التكثيف وتراكم الرطوبة. الضوضاء في هذا التتبع ناتجة عن تفاعل أو الباحث مع المعدات.

يوضح هذا الشكل وظيفة الرئة للفأر المصاب بالتليف الرئوي الناجم عن البيوميسين. لاحظ النمط غير المنتظم في تتبع التنفس. بمجرد إتقان التقنية ومعايرة المعدات ، يمكن جمع البيانات من كل في غضون خمس دقائق.

يمكن بعد ذلك تحليل البيانات التي تم جمعها وتصديرها إلى جدول بيانات Excel. في حين أن محاولة هذا الإجراء مهمة لتأقلم الفأر مع غرفة تحجم الأشكال قبل جمع البيانات ، فقد يختلف هذا بين سلالات الفئران. في المتوسط ، نستخدم الفئران الستة السوداء C 57 للمراهقين ، وسيستغرق ذلك من أربعة إلى خمسة أيام قبل جمع البيانات.