الهيكل العظمي إجراءات خزعة العضلات البشرية باستخدام تقنية التعديل بيرجستروم

الهدف العام من هذا الإجراء هو استخدام تقنية Bergstrom المعدلة لعمل عينة خزعة من العضلات الهيكلية من الجوانب الواسعة لمتطوع بشري. يتم تحقيق ذلك عن طريق تخدير الجلد والأنسجة تحت الجلد أولا في موقع الخزعة. في الخطوة الثانية ، يتم إجراء شق من خلال أنسجة الجلد تحت الجلد ، وتراكب اللفافة على عضلة الهيكل العظمي.

بعد ذلك ، يتم تقديم إبرة الخزعة من خلال الشقوق في العضلة الهيكلية ، ويتم جمع عينة الخزعة في الخطوة النهائية. تتم إزالة إبرة الخزعة بعناية ويتم إغلاق الشق بمادة لاصقة جراحية. في النهاية ، يمكن تحضير عينات خزعة العضلات الهيكلية للتحليلات النسيجية وتحليلها بحثا عن التغيرات الكيميائية الحيوية والتعبير عن بروتينات وجينات معينة في ظل ظروف التمرين المختلفة.

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال فسيولوجيا العضلات الهيكلية ، مثل ما هي الاستجابات الكيميائية الحيوية والجزيئية والخلوية لممارسة التمارين الشاقة. سيوضح الإجراء الدكتور جيرالد فيريس ، طبيب من مستشفانا المحلي ، وماسكي تاناكا ، فني من مختبرنا. بعد الحصول على موافقة مستنيرة ، اطلب من الشخص الاستلقاء على طاولة مبطنة مع وضع الفخذ المكشوف للساق بطريقة مريحة مع لف منشفة صغيرة تحت الكعب بحيث يتم تمديد الركبة بالكامل ورفعها حوالي سنتيمتر واحد.

بعد ذلك ، اطلب من الشخص أن ينقبض عضلة الفخذ المكشوفة مؤقتا بحيث يمكن تصور موقع الخزعة الجانبي الواسع أمام اللفافة مباشرة. لاتا ما يقرب من ثلث المسافة بين الجزء العلوي من الرضفة والمغرق الأكبر. ثم استخدم المقص لإزالة الشعر من منطقة حوالي 15 × 15 سم حول موقع الخزعة وتعقيم المنطقة بمسحات مبللة مسبقا في مطهر موضعي لحصاد الخزعة باستخدام معدات الوقاية الشخصية المناسبة وتقنية الصرف الصحي.

قم أولا برش كلوريد الإيثيل على موقع الشق حتى يبدو الجلد مبيضا. بعد ذلك ، أدخل إبرة قياس 25 أفقيا في الأدمة ، وشفط الإبرة وقم بتوزيع ما يقرب من 100 ميكرولتر من الليدوكائين لإنتاج فقاعة قطرها من ملليمترين إلى أربعة ملليمترات تحت سطح الجلد. ثم ادفع الإبرة إلى الأنسجة تحت الجلد ، واستنشق مرة أخرى وقم بتوزيع ما يقرب من مليلتر واحد من الليدوكائين لتشكيل فقاعة أخرى.

بمجرد أن تهدأ الفقاعة الثانية ، أدخل الإبرة في موقع الشق ، وتوقف عن اللفافة السطحية ، وشفط الإبرة مرة أخيرة ، ثم قم بحقن الأربعة ملليلتر المتبقية من الليدوكائين ببطء أثناء سحب الإبرة من الفخذ. بعد دقيقتين إلى ثلاث دقائق ، افحص موقع الخزعة برفق بطرف مشرط معقم لتأكيد التخدير. عندما يكون الموقع جاهزا ، قم بعمل شق مستقيم بطول سنتيمتر واحد عبر الجلد والأنسجة تحت الجلد بزاوية 45 درجة فيما يتعلق بعظم الفخذ.

ثم مرة واحدة في كل اتجاه ، أدخل المشرط بعمق كاف لعمل شق عبر اللفافة في العضلات. بشكل عام ، يجب على الأفراد الجدد في هذه الطريقة التحلي بالصبر لأنهم يتعلمون الشعور بالتغيير في المقاومة بين الأنسجة تحت الجلد واللفافة عند إعطاء التخدير الموضعي وعند قطع الجلد والأنسجة تحت الجلد واللفافة. أدخل الآن إبرة الخزعة في الأنسجة بنفس الزاوية التي تم بها إجراء الشق حتى يدخل الطرف إلى اللفافة.

تقدم الإبرة بعد اللفافة بزاوية هبوطية أثناء تقدمها إلى العضلات. اطلب من الشخص أن يظل مسترخيا وعدم تقلص عضلة الفخذ أثناء تقدم الإبرة. ثم بمجرد أن تصبح إبرة الخزعة في موضعها ، افتح حقنة 60 مليلتر يمكن التخلص منها على علامة 40 إلى 50 مليلتر لإنشاء شفط داخل إبرة الخزعة.

اسحب المبزل الداخلي للخارج حوالي سنتيمتر واحد لفتح نافذة القنية الخارجية مع الحفاظ على موضع القنية الخارجية داخل العضلة. ثم أغلق المبزل الداخلي بسرعة لقطع عينة العضلات وجمعها. بعد ذلك ، افتح قضيب الإيقاف لتحرير الشفط وقم بتدوير إبرة الخزعة 90 درجة ، وكرر العملية حتى ثلاث مرات ليصبح المجموع أربعة مقاطع.

ثم قم بإزالة إبرة الخزعة من الفخذ عند إزالة الإبرة. اسحب المبزل الداخلي للخلف سنتيمترا واحدا وافحص بصريا تجويف القنية الخارجية لتقدير ما إذا كان قد تم جمع كمية كافية من الأنسجة. ضع ضغطا مباشرا على موقع الخزعة بشاش معقم وكيس ثلج لمدة 10 إلى 15 دقيقة.

خلال هذا الوقت ، قم بإزالة الأنسجة من إبرة الخزعة بعد وضع الجليد ، اسحب الشق مغلقا بيد واحدة مع وضع طبقة واحدة من المادة اللاصقة الجراحية على الجزء العلوي من الشق الجاف باليد الأخرى. بعد علاج المادة اللاصقة لمدة 90 ثانية تقريبا ، ضع إغلاق الشريط بشكل عمودي على الشق ، ثم ضع ثلاث إلى أربع ضمادات شاش غير معقمة بوصتين في بوصتين فوق موقع الشق وقم بتثبيتها بغلاف لاصق ذاتي الالتصاق لتطبيق ضغط مباشر على الأنسجة. أخيرا ، أعط الموضوع تعليمات شفهية ومكتوبة حول العناية المناسبة بالجروح وردود الفعل الطبيعية وغير الطبيعية وإرشادات النشاط لما يلي ، من يوم إلى أربعة أيام.

في دراسة كروس أوفر عشوائية مضبوطة بالدواء الوهمي ، ركض رياضيو التحمل الذكور على أجهزة المشي لمدة ثلاث ساعات بنسبة 70٪ VO O2 كحد أقصى ، واستهلكوا 6٪ من الكربوهيدرات أو مشروب وهمي بمعدل لتر واحد في الساعة. تم أخذ خزعات أنسجة العضلات الهيكلية قبل التمرين وبعده ، ولوحظ زيادة التعبير الجيني للسيتوكينات المختلفة في أنسجة العضلات الهيكلية التي تم الحصول عليها من رياضيي التحمل ذوي الخبرة بعد ثلاث ساعات من الجري ، ومن المثير للاهتمام ، على الرغم من عدم وجود تأثير على العضلات الهيكلية ، فقد لوحظ استنفاد الجليكوجين ، ولوحظ تناول الكربوهيدرات لتخفيف مستويات IL ستة و IL ثمانية مستويات mRNA بعد تطوره. مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال فسيولوجيا العضلات لاستكشاف مبادئ مثل استخدام ركيزة الوقود أثناء شدة مختلفة من التمرين ، وتلف العضلات الناجم عن التمرين ، والإشارات بين الخلايا وغيرها.