وهناك طريقة استنساخه للغاية ومباشرة إلى تنفيذ في فيفو قلع العين في الفأر بعد فتح العين

الهدف العام من هذا الإجراء هو إزالة العين بنجاح من الفأر المخدر بطريقة مباشرة للغاية وقابلة للتكرار. يتم تحقيق ذلك عن طريق إزاحة مقلة العين أولا عن طريق الضغط برفق على الكانثوس باستخدام ملقط منحني. الخطوة الثانية من الإجراء هي توجيه الملقط خلف العين ، لفهم العصب البصري بإحكام.

الخطوة الثالثة هي القيام بحركات دائرية. مع إمساك اليد بالملقط ، سيتحرك جسم الماوس في نفس الاتجاه. الخطوة الأخيرة هي زيادة سرعة الحركات تدريجيا لضمان انقباض العصب البصري مما يؤدي إلى انفصال مقلة العين.

في النهاية ، يمكن استخدام العين لدراسة المسار البصري AFR طوليا ، على سبيل المثال ، عن طريق الكشف عن عمليات اللدونة المختلفة للحرمان الحسي في دماغ الفأر. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية ، والتي غالبا ما تستخدم الخياطة والتشريح الحاد ، هي أن طريقة التشريح لدينا تعتمد ببساطة على انقباض العصب البصري ، مما يؤدي إلى الحد الأدنى من النزيف أو عدم النزيف ومن السهل جدا تعلمه. ابدأ بتخدير الفأر باستخدام حقن داخل الصفاق لمزيج من الكيتامين والمين في محلول ملحي.

تأكد من التخدير عن طريق التحقق من ردود أفعال الماوس. اضغط على أصابع القدم بالملقط وتحقق من وجود استجابة انعكاسية. إذا لم تكن هناك استجابة ، فاستخدم قضيبا قطنيا مائلا و 70٪ إيثانول لتنظيف الجفون والمنطقة المحيطة بالعين.

إذا لم تكن هناك استجابة لومض العين ، فتابع مع العين في التنوي. ضع الماوس على سطح ثابت ومسطح وسلس وجاف. عقم أطراف الملقط المسنن المنحني في معقم الخرز الزجاجي.

أفضل حجم للطرف للاستخدام هو 0.5 × 0.4 ملم. بعد ذلك ، اضغط برفق على الكانثوس بالملقط حتى يتم إزاحة مقلة العين من التجويف ويمكن الوصول إلى العصب البصري. ثم قم بتوجيه الملقط خلف العين واضغط بقوة على العصب البصري مع الإمساك بالعصب البصري ، وابدأ ببطء في تحريك الملقط في دوائر في اتجاه أقل مقاومة.

مع إبقاء الماوس على طاولة العمليات ، يجب تأمين الماوس. يجب أن يتحرك جسمه أيضا. تسريع تدريجي حتى بعد سبع إلى 15 حركة دائرية ، ينقبض العصب البصري وتنفصل مقلة العين.

إذا كانت الدورات سريعة جدا أو تم سحب الملقط بقوة شديدة ، فسوف ينكسر العصب قبل الأوان وسيتبع ذلك الترافع. ابدأ بعكس التخدير. أعط الفأر حقنة داخل الصفاق من aamaz جميع هيدروكلوريد في محلول ملحي.

ثم يدار 0.05 في العضل. يجب إعطاء ملليلتر من مسكنات الألم المحضرة مثل الميلوكسيكام والمسكن كل 24 ساعة. الآن ، ضع مرهم العين على العين المتبقية لمنع جفاف القرنية.

لو تم تطبيق هذا قبل الجراحة ، لكان قد لطخ على الطاولة. انقل الماوس إلى قفص احتجاز ، وتحكم في درجة حرارة جسم الفأر باستخدام لوحة تسخين أو بطانية أثناء تعافيه عندما يستعيد التحكم في المحرك ، ونقله مرة أخرى إلى قفص منزله. تتميز الإزالة الناجحة للعين بعدم وجود نزيف أو أي ضرر جسدي واضح للأنسجة الحجاجية أو محجر العين.

يجب أن تحتوي العين المنزوعة على ملامح كرة أرضية سليمة مثل القرنية الملساء والمشيمية. يجب أن يكون العصب البصري ضيقا عند قاعدة الشبكية. يجب أن يظهر الطول المتبقي للعصب على قطعا نظيفا ويجب ألا تتلف منطقة الدماغ المحيطة.

أجريت تجربة باستخدام هذه التقنيات متبوعة باكتشاف Z 2 68 mRNA عن طريق التهجين المشع في C two للكشف عن النشاط العصبي المستحث بصريا في القشرة الدماغية. على عكس الضوابط المحفزة بصريا ، أظهرت الفئران ذات العينين والنواة نشاطا أساسيا في القشرة البصرية اليمنى واليسرى بسبب النقص الكامل في المدخلات البصرية. على هذا النحو ، تم الكشف عن الحدود بين القشرة البصرية وغير البصرية.

كشف الاستئصال أحادي العين عن المنطقتين الأحادية على أنهما ناقصان النشاط في القشرة البصرية المقابلة لإزالة الصبغة. تقع هذه المناطق وسطيا وجانبيا في المنطقة المجهرية المركزية. بمجرد إتقانها ، يمكن القيام بهذه التقنية في أقل من دقيقة واحدة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.

لذلك ، فإنه يوفر طريقة فعالة لفحص النشاط أو اللدونة أو الظواهر الأخرى في المسار البصري للأنف والأذن والحنجرة.