أكتوبر 11, 2014
على الرغم من نموذج معروف، خنزير غينيا يمثل حاليا مكانة في العلوم التجريبية والحيوان هو البيانات المحدود المتاح على تنفيذ معظم الإجراءات. هنا نقدم أربعة أساليب مختلفة لغير محطة في تقنيات أخذ العينات الدموية في الجسم الحي واعية إما مخدرة أو خنازير غينيا.
الهدف العام من هذا الفيديو هو توضيح منهجية أربع تقنيات مختلفة لأخذ عينات الدم في خنازير غينيا. الإجراءات المعروضة ليست نهائية ما لم تتجاوز أحجام العينات أو عدد العينات إرشادات جمع الدم. في المختبر ، نرى هنا سبب الوريد الجانبي والوريد الرصغي.
يمتد الوريد الوريدي ظهريا وجانبيا فوق المفصل الرصغي. يجب أخذ ثلاث عينات كحد أقصى من كل ساق خلفية ، ويمكن جمع ما يقرب من 100 إلى 400 ميكرولتر من الدم لكل عينة. تشمل المعدات اللازمة ماكينة حلاقة كهربائية ، وحمام ماء دافئ ، ومنشفة نظيفة ، وبعض الصوف القطني ، ومطهر مثل الكحول بنسبة 70٪ ، والإبر المعقمة ، و 21 خانق أو أنابيب تجميع أصغر.
وإذا كان الهدف هو قياس نسبة الجلوكوز في الدم وأخذ عينات AccuCheck ، فيمكن أخذ عينات الدم من الرأس أو الوريد الرصغي في خنازير غينيا بدون تخدير. يتم تقييد خنزير غينيا بواسطة مساعد مدرب ويجب استخدام تقنية الصرف الصحي. يتم حلق الشعر الذي يغطي منطقة الرصغ بماكينة حلاقة كهربائية وغسل الساق الخلفية وتسخينها في حمام مائي فاتر.
بالإضافة إلى تنظيف الساق ، فإن هذا يجعل الأوردة تتمدد وتصبح أكثر وضوحا. يتم تمديد الساق الخلفية وتحقيق الركود عن طريق تطبيق ضغط لطيف لأسفل فوق الركبة مباشرة ، مما يسمح للوريد بأن يصبح مرئيا مباشرة قبل أخذ العينات. تمسح المنطقة المحلوقة بمطهر.
يتم ثقب الوريد بإبرة أو إبرة ، ويمكن جمع الدم في أنبوب شعري أو ميكروتي. عندما يتم جمع الدم ، يتم تخفيف الركود والضغط اللطيف بقطعة من الصوف القطني لتسهيل الإرقاء ، يمكن رؤية الشرايين والأوردة السطحية على السطح الظهري لأذن خنزير غينيا هنا. يمكن استخدام هذه الأوعية لأخذ عينات الدم عندما يكون هناك حاجة إلى حجم صغير جدا.
يمكن أن يكون أحد الأمثلة على ذلك لقياسات الجلوكوز في الدم. يتم تقييد خنزير غينيا بلطف مع ترك الأذن في متناول اليد. يجب أن يكون موقع البزل محضرا للصرف الصحي قبل أخذ العينات ، لكن الحلاقة ليست ضرورية.
يمكن تطبيق ضغط طفيف في قاعدة الأذن لجعل الأوردة أكثر وضوحا. يتم ثقب الوريد بإبرة أو إبرة وخز وجمع الدم في أنبوب شعري أو تحليله على الفور لمستويات الجلوكوز في الدم باستخدام نظام عينة AccuCheck. عندما يتم جمع الدم ، يجب الضغط اللطيف على موقع البزل لتسهيل الإرقاء.
توضح هذه الصورة موضع خنزير غينيا لأخذ عينات الدم الوداجي وسبب الوريد الوداجي. يتم تنفيذ الإجراء حصريا على مخدر. تشمل المعدات اللازمة أدوية التخدير وماكينة الحلاقة الكهربائية من الصوف القطني ، ومطهر مثل سماعة الطبيب الكحولية بنسبة 70٪ ، ومرهم العين المحايد ، ومحاقن مليلتر واحد ، وإبر معقمة ، عادة 23 أو 25.
يمكن استخدام Gorge Heparin و EDTA لغسل المحاقن قبل أخذ العينات لمنع التخثر. توجد مجموعة متنوعة من بروتوكولات التخدير لخنازير غينيا. في هذه الحالة ، يتم تخدير عن طريق التخدير المتوازن بمزيج من جيبة البلاط السوليت والبوتيف المحقون تحت الجلد في الرقبة.
يمكن تخفيف هذا الخليط بالمحلول الملحي لجعل الجرعات أكثر دقة. بعد الحقن ، يجب إعادة خنزير غينيا إلى قفصه وتركه بهدوء. عادة ما يظهر تأثير البيئة المحيطة بعد حوالي 10 دقائق ويستمر لمدة 30 إلى 40 دقيقة قبل أخذ العينات.
يتم تقييم عمق التخدير عن طريق فحص ردود الفعل ويتم إعطاء مرهم العين المحايد لحماية العينين. يتم الاقتراب من الوريد الوداجي مع وضع خنزير غينيا على ظهره ، وتتراجع الأرجل الأمامية كل ثلاثة أشهر. يتم حلق المنطقة وتحضيرها بشكل معقم ، ويتم تحسس الترقوة ، ويتم إدخال إبرة 23 خانق مثبتة على حقنة سعة ملليلتر واحد تقريبا على طول خط الوسط ، فقط الجمجمة ظهريا إلى الترقوة.
يجب أن تبقى المحقنة في زاوية تصاعدية ووسطية طفيفة. بمجرد اختراق الجلد ، يتم تطبيق ضغط سلبي طفيف على المحقنة حيث يقع الوداج بشكل سطحي تماما ويكفي عمق الإدخال من حوالي ثلاثة إلى أربعة ملليمترات. عندما يتم جمع العينة ، حرر توتر الأرجل الأمامية واضغط برفق على جانب الثقب.
يمكن بعد ذلك إعادة إلى قفص التعافي ، ولكن يجب مراقبته لضمان الإرقاء والتعافي من التخدير. عندما يتعافى خنزير غينيا تماما من التخدير ، قد يعود إلى قلمه. تختلف السمات التشريحية لخنزير غينيا اختلافا طفيفا عن تلك الموجودة في نماذج القوارض الأخرى ، وتعديل تقنيات أخذ العينات ضروري لاستيعاب الاختلافات الخاصة بالأنواع والحصول على عينات جيدة كافية في أقصر وقت ممكن.
على المدى الطويل والقصير. في الجسم الحي ، غالبا ما تتطلب الدراسات أخذ عينات دم متكررة. يجب النظر بعناية في اختيار التقنية من أجل تقليل التوتر وعدم الراحة وضمان البقاء على قيد الحياة ، فضلا عن الامتثال لمتطلبات حجم العينة وإمكانية الوصول إليها.
تم اختبار جميع الطرق الموصوفة بدقة وتطبيقها بنجاح لأخذ عينات الدم المتكررة في الجسم الحي. في الدراسات التي أجريت في منشأتنا البحثية ، يمثل خنزير غينيا مكانا مناسبا في علوم التجريبية ، ولكن تتوفر بيانات محدودة حول تنفيذ الإجراءات الأساسية. في ورقة الفيديو هذه ، قدمنا أربعة طرق مختلفة لأخذ عينات الدم غير الطرفية في الجسم الحي في الواعية أو المخدرة ، بشرط ألا تتجاوز أحجام العينات وعدد العينات إرشادات جمع الدم في المختبر.
يوصى باستخدام هذه الإجراءات في خنازير غينيا عند الحاجة إلى أخذ عينات دم متكررة. في بروتوكول الدراسة الخاص بك.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
يوضح هذا الفيديو أربع تقنيات لسحب عينات الدم غير النهائية في خنازير غينيا، وذلك في حالتي اليقظة والتخدير. وتُعد هذه الطرق بالغة الأهمية للباحثين الذين يعملون على هذا الكائن النموذجي، والذي تتوفر عنه بيانات إجرائية محدودة.
يدعم سحب عينات الدم غير النهائي في خنازير غينيا الدراسات الطولية في الجسم الحي من خلال تمكين جمع عينات متكررة وعالية الجودة مع الحفاظ على رفاهية الحيوان. وتعد هذه القدرة بالغة الأهمية في تقييمات الحركية الدوائية والديناميكية الدوائية قبل السريرية، حيث يساهم سحب العينات المتسلسل في توجيه عملية تقييم الارتباط بالهدف وتقليل المخاطر الآلية. وتعالج هذه التقنيات فجوة منهجية في نموذج متخصص ولكنه ذو صلة ترجمياً، مما يعزز موثوقية البيانات في سير عمل الاكتشاف المبكر.
تدمج طرق أخذ العينات هذه في سير عمل بيولوجيا الاكتشاف من خلال توفير مصفوفات بيولوجية موثوقة لتحليل المسارات المستهدفة وتقييم المركبات الرائدة.