ديسمبر 29, 2014
تأثيرا وقائيا محتملا ضد الاضطرابات التنكسية العصبية. ومع ذلك، لا توجد حاليا طريقة سهلة لتحديد فعالية إجراءات التخصيب. يصف هذا البروتوكول طريقة "صندوق الألغاز" البسيطة لتقييم الوظيفة المعرفية للحيوان ، من أجل الكشف عن فعالية الإثراء البيئي.
الهدف العام من التجربة التالية هو تقييم فعالية الإثراء البيئي على الوظيفة المعرفية في الفئران. يتم تحقيق ذلك عن طريق إنشاء صندوق ألغاز يحتوي أولا على غرفتين. ثم يتم تعويد الفئران على ساحة الاختبار ويسمح لها باكتشاف مدخل صندوق المرمى المحمي.
بعد ذلك ، تواجه الفئران تحديا مع مجموعة متنوعة من العوائق أو الألغاز التي تسد مدخل الملجأ. تظهر النتائج أن الإثراء البيئي يحسن الأداء بشكل موثوق في صندوق الألغاز. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الأخرى هي سهولتها وبساطتها في كل من بناء الصندوق وكذلك تنفيذه ، وحقيقة أنها مرنة للغاية في تصميم المهام بمستويات مختلفة من الحمل المعرفي.
لذلك يمكن استخدام هذه الطريقة لمعالجة مجموعة من الأسئلة في مجال علم الأعصاب ، لا سيما تلك المرتبطة بتقييم فعالية التدخلات البيئية. على الرغم من أن هذه الطريقة يمكن أن توفر نظرة ثاقبة لتأثير الإثراء البيئي على الإدراك ، إلا أنه يمكن تطبيقها أيضا على أنظمة أخرى مثل النماذج الحيوانية المعدلة وراثيا للأمراض البشرية والاختبارات قبل السريرية للعلاجات الجديدة. للبدء ، قم بتعيين الفئران الحامل بشكل عشوائي إما لظروف السكن القياسية عن طريق وضعها في قفص فأر قياسي أو الحالة المخصبة عن طريق وضعها في أقفاص بحجم الفئران.
ضع مجموعة متنوعة من الأشياء المصممة لزيادة التحفيز الحسي والحركي في قفص التخصيب كل يومين إلى ثلاثة أيام. حرك هذه الأشياء داخل القفص وقم بتحديث أي أشياء تم تدميرها عند فطام الجنس ، الجراء ، وفصلها في ظروف سكنية تتفق مع البيئة التي نشأوا منها من أجل الحالة المخصبة. تأكد من وجود ما بين ثلاثة و 10 فئران لكل قفص مع فئران وخمسة فئران للمجموعة القياسية.
يجب أن يبدأ الاختبار السلوكي بمجرد وصول هذه إلى سن الرشد. في الأسبوع 12 إلى 14 ، يتم إنشاء صندوق الألغاز من ست قطع من الأكريليك الأبيض ، ويتم وضع قطعة من الأكريليك الأسود بفتحة مربعة مقطوعة في الجانب 150 ملم من طرف واحد لتقسيم الصندوق إلى قسمين. يتم وضع قطعة من الأكريليك الأبيض فوق المقصورة الأصغر لإنشاء صندوق هدف داكن.
يمكن تثبيت غطاء الأكريليك على جسم الصندوق الرئيسي بواسطة مفصلات أو تركه مجانا لإزالته تماما أثناء الاختبار السلوكي. بعد ذلك ، انضم إلى ثلاث قطع من الأكريليك لإنشاء قناة على شكل حرف U لاستخدامها كعائق أثناء الاختبار التالي. أولا ، قم بتنظيف صندوق الألغاز جيدا بنسبة 70٪ من الكحول.
كرر هذه الخطوة بين اختبار كل. بعد ذلك ، ضع فأرة حمراء نظيفة ، كوخ الإسكيمو داخل صندوق المرمى واستبدل الغطاء عندما تصبح جاهزا. ضع الماوس في الطرف البعيد من قسم الحقل المفتوح المواجه لمربع الهدف.
ابدأ المؤقت على الفور وسجل الوقت الذي يستغرقه لدخول الغرفة الأخرى. أوقف المؤقت. عندما تدخل جميع الكفوف الأربعة للحيوان قسم مربع الهدف ، قم بإنهاء التجربة.
إذا لم يدخل إلى مربع الهدف خلال فترة زمنية محددة مسبقا. بعد التجربة ، قم بإزالة وضعه في قفص احتجاز منفصل. حافظ على فجوة من 60 إلى 182 بين التجارب لكل.
قم بإجراء ثلاث تجارب يوميا لمدة خمسة أيام متتالية. طوال فترة الاختبار ، أدخل أربع حالات انسداد مع ثلاث تجارب لكل حالة. أولا ، أدخل القناة على شكل حرف U التي تم إنشاؤها مسبقا ، وسجل الوقت الذي يستغرقه لدخول مربع الهدف لإنشاء حالة عائق أخرى.
ضع الفراش داخل القناة وحولها قبل اختبار العوائق الأخرى التي يمكن إدخالها. قم بتضمين وضع منديل أو سدادة رغوية داخل المدخل. يجب دائما إجراء التجربة الثالثة لحالة انسداد معينة في يوم لاحق بعد اكتمال الاختبار ، احسب الوقت المستغرق لإكمال كل تجربة ، بما في ذلك التجارب الفارغة حيث لم تكمل المهمة خلال الوقت المحدد.
أخيرا ، استخدم مقاييس متكررة على NOVA لتقييم تأثير حالة السكن على الأداء داخل صندوق الألغاز. تمثل هذه البيانات أداء مهمة صندوق الألغاز للحيوانات البالغة التي نشأت منذ الولادة في بيئات مخصبة أو قياسية. حلت التي نشأت في بيئة غنية مهام العرقلة داخل صندوق الألغاز بشكل أسرع بكثير من تلك التي تربى في بيئة قياسية مع حدوث اختلافات الذروة بين اليومين الثاني والرابع من الاختبار.
عند محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر التعامل مع حيواناتك بشكل مناسب لمنع السلوكيات غير المتوقعة الناجمة عن الإجهاد. لذلك بعد هذا الإجراء ، يمكن استخدام طرق أخرى مثل الكيمياء المناعية أو التدخلات الجراحية المستهدفة أو الفيزيولوجيا الكهربية في الجسم الحي لكشف الآليات التي تكمن وراء التأثيرات السلوكية المرصودة. لذلك بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية الحصول على تقييم أولي فعال وموثوق للوظيفة المعرفية في نموذج AMAs.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تقيم هذه الدراسة فعالية الإثراء البيئي على الوظيفة الإدراكية في الفئران باستخدام طريقة صندوق الألغاز البسيطة. وتشير النتائج إلى أن الإثراء البيئي يعزز الأداء الإدراكي بشكل موثوق.
تتيح المقاييس السلوكية الكمية، مثل صندوق الأحجية (Puzzle Box)، تقييمًا سريعًا وقابلًا للتكرار للوظيفة المعرفية في النماذج قبل السريرية، مما يدعم التحقق من الأهداف في المراحل المبكرة وتقليل المخاطر الميكانيكية في أبحاث الأمراض التنكسية العصبية. وتسهل بساطة هذه الطريقة ومرونتها إجراء تقييم قابل للتوسع للتدخلات البيئية، مما يوجه قرارات المحفظة البحثية بشأن استراتيجيات الحماية العصبية. كما أن دمج مثل هذه المقاييس يعزز الثقة التنبؤية في مسارات العلوم العصبية الترجمية.
يندرج مقايسة صندوق الألغاز (Puzzle Box assay) ضمن التسلسل الممتد من مرحلة الاكتشاف المبكر وصولاً إلى الدراسات قبل السريرية، مما يتيح اختبار الفرضيات، والتحقق من صحة الأهداف، والفحص السريع للتدخلات البيئية أو الجينية في نماذج القوارض.