Name: الماوس استئصال الرئة نموذج النمو الرئة التعويضي (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-12-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 22 s
Description: تعلم استئصال الرئة الأيسر في الفئران لدراسة النمو التعويضي للرئة اليمنى. تُستخدم هذه الطريقة لاستكشاف آليات تجديد الأنسجة الرئوية ونمو الأسناخ.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

يود المؤلفون أن يعرب عن تقديرهم لقسم الخدمات البيطرية في مستشفى سينسيناتي للأطفال لمساعدتهم. تم دعم هذه المخطوطة من قبل المعاهد الوطنية للصحة K12 HD028827. علمت آنا بيرل دكتوراه المؤلفين هذا الإجراء الجراحي.

بيان استخدام الحيوان: ملاحظة: أجريت جميع الإجراءات في هذه الدراسة مع موافقة واتباع المبادئ التوجيهية للاستخدام الحيوان المؤسسي ولجنة الرعاية (IACUC) في مستشفى سينسيناتي للأطفال. تم الحصول القديمة أسابيع ثمانية C57BL / 6J الفئران الذكور من جاكسون مختبرات (بار هاربور، ME) والسماح للتأقلم لمدة أسبوع واحد قبل استخدامها. حتى عملية جراحية، وتم إيواء الحيوانات في منشأة حاجز خالية من مسببات الأمراض، وقدمت طعام تعقيمها وتصفيتها libdium المياه الإعلانية. تم تزويد كل قفص الفأر مع الهواء مخصص والماء، وكان مسك غرف على دورة الليل والنهار 12 ساعة. وبعد الشفاء من الجراحة، واستمرت الفئران في أقفاص مع قمم تصفيتها، شريطة تعقيمها libidum الإعلان طعام، وقدمت تصفيتها الماء من زجاجة الماء. 1. إعداد الأدوات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل 6 الكامشات الجلد باستخدام مشابك الورق والدبابيس. تطور تقويمها مشابك الورق على السيقان من الدبابيس الورقية، لإيف 5 سم أسلاك الفولاذ التوالي على نهاية واحدة وجعل واحدة 0.5 سم &quot;U&quot; على شكل الخطاف في نهاية السلك. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل بعض 15 × 15 سم الستائر الجراحية مربع باستخدام غلاف بلاستيكي. إعداد خلع الملابس واحدة في الماوس. وضع برج رقة بين كل التفاف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعقيم جميع الأدوات الجراحية جنبا إلى جنب مع كومة من البلاط 12 × 12 بوصة الفلين والشاش، ومسحات القطن ذات الرؤوس. </li></ol> 2. إعداد ماوس <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لحث التخدير مع 2٪ الأيزوفلورين. وزن الحيوان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في منطقة إعداد الجراحية مخصصة يحلق الصدر الأيسر ومنطقة الرقبة مع ماكينة حلاقة كهربائية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق قطرة من مرهم مصطنعة المسيل للدموع لعيون الفأر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطهير الرقبة والصدر الأيسر مع الكلورهيكسيدين وايزوبروبيل. كرر مرتين أكثر من ذلك. </li></ol> 3. ماوس أورو-التنبيب الرغامي والتهوية الميكانيكية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لديهم غير معقمة مكان فني الجراحية مستلق الماوس في منطقة الجراحية قبل تحسنت.</li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكيد عمق التخدير عن طريق توثيق عدم وجود استجابة إلى مخلب قرصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد غسل اليدين وارتداء الملابس الجراحية، وقناع، وقبعة، وارتداء القفازات الجراحية المعقمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد اللف وباستخدام تقنية العقيم، وجعل شق عمودي 1 سم فوق الأمامية منتصف الرقبة لفضح الحنجرة. بخفة التراجع عضلات حزام مع منحنية، مسننة 10 سم ملقط وفضح الحنجرة والقصبة الهوائية عن طريق نشر عضلات حزام مع غيض من مقص على التوالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج شفويا 22 G صريحا طرف angiocatheter في منتصف القصبة الهوائية (الشكل 1A) وتأكيد بصريا التنسيب (الشكل 1B). الحفاظ على التخدير وتهوية باستخدام 1-3٪ الأيزوفلورين من خلال القوارض التنفس الصناعي (225 ميكرولتر في السكتة الدماغية، 200 ستوكس لكل دقيقة). توظيف حد ضغط 15 سم H 2 O. </li></ol> 4. ماوس استئصال الرئة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الماوس في موقف استلقاء الجانبي الأيمن مع الخلفية التي تواجه الماوس،المشغل (الجانب الأيسر لأعلى). استخدام الاغطية البلاستيك الختم الذاتي كما ثنى العقيمة. قطع طريق ثنى، استخدم حادة مقص منحني يميل إلى جعل 2 سم قطع طويلة بالتوازي مع الضلوع في 4 و 5 تشرين عشر الفضاء وربي. إدراج غيض منحني مقص حادة وتشريح الجلد بعيدا عن الضلوع الكامنة والعضلات الوربية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التراجع الجلد مع أربعة الكامشات لفضح مربع 1.5 × 1.5 سم نافذة الجراحية (الشكل 2A). تأمين الكامشات إلى لوحة الفلين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشريح وصولا الى الأضلاع باستخدام ملقط المنحنية، واستخدام طرف واحد من ملقط المنحنية لدخول التجويف الصدري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام طرف حادة مقص الدقيقة، استخدام أقل شفرة لدخول التجويف الصدري. جعل 0.5 سم شق بين الأضلاع وتكرار في الاتجاه المعاكس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام اثنين من الكامشات المتبقية، فتح القفص الصدري في المحور الأمامي الخلفي وتأمين الكامشات إلى لوحة الفلين (الشكل 2B). </li> &lt;لى&gt; استخدام الملقط ذات الرؤوس حادة مقوسة في اليد اليسرى، فهم الرئة اليسرى وتهجير الجزء العلوي من الرئة اليسرى أفقيا ودون المستوى خلال بضع الصدر حتى يتعرض الشريان الرئوي الأيسر والقصبات الهوائية (الشكل 3A، B). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عقد تحميل التيتانيوم الأوعية الدموية microclip قضيب في يده اليمنى مع الجسم من قضيب في راحة وغيض المنحني مشيرا بعيدا عن النخيل (الشكل 3C)، حرك طرف قضيب في الصدر على طول انحناء الجانب الخلفي من اليسار الرئة والقصبات الهوائية مقطع اليسار والشريان الرئوي (الشكل 3D). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة قضيب ولكن الحفاظ على الرئة اليسرى تراجع. فهم حادة طرف المقص الصغير مع اليد اليمنى وقطع القصبات الهوائية والشريان الرئوي البعيدة إلى مقطع وإزالة الرئة اليسرى (الشكل 3E). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الكامشات الصدري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام ملقط حادة منحنية لقرصة حتى 1 سم من الجلد أقل شأنا من incisiولكن على أعلى مستوى الحجاب الحاجز وإدراج G angiocatheter 24 عن طريق الجلد وداخل تجويف الصدر الأيسر (الشكل 4A، B). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام 5-0 خياطة البرولين لوضع اثنين من الغرز انقطاع في جميع أنحاء ال 4 و 5 الأضلاع عشر لإغلاق التجويف الصدري. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الكامشات الجلد. استخدام مجموعتين من ملقط لتقريب الجلد على طول شق والغراء إغلاق الجلد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توصيل 3 مل بالتركيبة قفل المحقنة إلى angiocatheter وإزالة الهواء المتبقي من خلال تطبيق الشفط لطيف وسحب angiocatheter. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الغراء شق الرقبة مغلقة تستخدم مجموعتين من ملقط كما كان من قبل. </li></ol> 5. ماوس الشام استئصال الرئة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فضح الرئة اليسرى كما ورد في بروتوكول &quot;ماوس استئصال الرئة&quot;. رفع القفص الصدري مع ملقط حادة منحنية للسماح للهواء في تجويف الصدر الأيسر (الشكل 5A، B). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع G angiocatheter 24 في ثو الأيسرراكيك تجويف على النحو الوارد أعلاه والحرص على عدم جرح الرئة اليسرى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام 5-0 خياطة البرولين والحرص على عدم ثقب في الرئة (الشكل 5C)، ومكان اثنين من أطوال من مواد خياطة الجروح في 3 الثالث / 4 و 5 تشرين عشر / 6 interspaces عشر ضلع (الشكل 5D). وضع كل من أطوال مواد خياطة الجروح قبل ربط للتقليل من مخاطر ترك فتق الرئة. ربط مواد خياطة الجروح لجعل اثنين من غرز انقطاع (الشكل 5E). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الغراء الجلد فوق شق الصدر، وإزالة الهواء المتبقي مع angiocatheter، والغراء شق الرقبة على النحو الوارد أعلاه. </li></ol> 6. الإنعاش، تسكين، والإنعاش <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إيقاف الأيزوفلورين، وإدارة 0.1 ملغم / كغم من البوبرينورفين و 0.5 مل من الطبيعي تحت الجلد المالحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عند استئناف التنفس العفوي، وإزالة الأنبوب الرغامي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة الماوس حتى يصبح مرة أخرى المتنقلة. المشي resum عادةوفاق عدة دقائق بعد إزالة الأنبوب الرغامي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الماوس في 27 ° C حاضنة (مرطب، 25٪ أكسجين) لاسترداد O / N. ملاحظة: ونحن نضع عدة الكريات من طعام المبللة بالماء على الأرض قفص للساعة 24 الأولى بعد الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدارة 0.1 ملغم / كغم من البوبرينورفين عن طريق الحقن داخل الصفاق مرتين يوميا لمدة ثلاثة أيام بعد الجراحة. والحرص على عدم فتح موقع الجراحي عند التعامل مع الحيوانات. </li></ol> 7. ماوس المراقبة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وزن الفئران في 1 و 3 و 5 و 7 أيام بعد الجراحة. </li></ol>

<ol><li>Strueby, L., Thebaud, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+bronchopulmonary+dysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+review+of+respiratory+medicine%22%5BJournal%5D)">Advances in bronchopulmonary dysplasia.</a> Expert review of respiratory medicine. , (2014).</li>
<li>Donn, S. M., Sinha, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+the+understanding+and+management+of+bronchopulmonary+dysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+fetal+%26+neonatal+medicine%22%5BJournal%5D)">Recent advances in the understanding and management of bronchopulmonary dysplasia.</a> Seminars in fetal & neonatal medicine. 14, 332(2009).</li>
<li>Molen, T., Miravitlles, M., Kocks, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((COPD+management%3A+role+of+symptom+assessment+in+routine+clinical+practice%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+chronic+obstructive+pulmonary+disease%22%5BJournal%5D)">COPD management: role of symptom assessment in routine clinical practice.</a> International journal of chronic obstructive pulmonary disease. 8, 461-471 (2013).</li>
<li>Seifert, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin+shedding+and+tissue+regeneration+in+African+spiny+mice+%28Acomys%29%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Skin shedding and tissue regeneration in African spiny mice (Acomys).</a> Nature. 489, 561-565 (2012).</li>
<li>Vidal, P., Dickson, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+of+the+distal+phalanx.+A+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+hand+surgery%22%5BJournal%5D)">Regeneration of the distal phalanx. A case report.</a> Journal of hand surgery. 18, 230-233 (1993).</li>
<li>Potter, P. C., Levine, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+Regeneration+Following+Chronic+Suppurative+Osteitis+of+the+Distal+Phalanx%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+surgery%22%5BJournal%5D)">Bone Regeneration Following Chronic Suppurative Osteitis of the Distal Phalanx.</a> Annals of surgery. 80, 728-729 (1924).</li>
<li>McKim, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+of+the+Distal+Phalanx%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Medical+Association+journal%22%5BJournal%5D)">Regeneration of the Distal Phalanx.</a> Canadian Medical Association journal. 26, 549-550 (1932).</li>
<li>Brown, L. M., Rannels, S. R., Rannels, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implications+of+post-pneumonectomy+compensatory+lung+growth+in+pulmonary+physiology+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Respir+Res%22%5BJournal%5D)">Implications of post-pneumonectomy compensatory lung growth in pulmonary physiology and disease.</a> Respir Res. 2, 340-347 (2001).</li>
<li>Holder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regeneration+and+compensatory+growth%5BTitle%5D)+AND+%22British+medical+bulletin%22%5BJournal%5D)">Regeneration and compensatory growth.</a> British medical bulletin. 37, 227-232 (1981).</li>
<li>Hsia, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+from+a+canine+model+of+compensatory+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">Lessons from a canine model of compensatory lung growth.</a> Curr Top Dev Biol. 64, 17-32 (2004).</li>
<li>Butler, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+for+adult+lung+growth+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Evidence for adult lung growth in humans.</a> N Engl J Med. 367, 244-247 (2012).</li>
<li>Konerding, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+dependence+of+alveolar+angiogenesis+in+post-pneumonectomy+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Angiogenesis%22%5BJournal%5D)">Spatial dependence of alveolar angiogenesis in post-pneumonectomy lung growth.</a> Angiogenesis. 15, 23-32 (2012).</li>
<li>Kho, A. T., Liu, K., Visner, G., Martin, T., Boudreault, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+dedifferentiation+and+redevelopment+phases+during+postpneumonectomy+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Identification of dedifferentiation and redevelopment phases during postpneumonectomy lung growth.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, 542-554 (2013).</li>
<li>Wang, W., Nguyen, N. M., Guo, J., Longitudinal Woods, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+Monitoring+of+Compensatory+Lung+Growth+in+Mice+after+Pneumonectomy+via+%283%29He+and+%281%29H+Magnetic+Resonance+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Noninvasive Monitoring of Compensatory Lung Growth in Mice after Pneumonectomy via (3)He and (1)H Magnetic Resonance Imaging.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 49, 697-703 (2013).</li>
<li>Gibney, B. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+murine+post-pneumonectomy+lung+regeneration+by+18FDG+PET+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+research%22%5BJournal%5D)">Detection of murine post-pneumonectomy lung regeneration by 18FDG PET imaging.</a> EJNMMI research. 2, 48(2012).</li>
<li>Rawlins, E. L., Perl, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+a%27MAZE%27ing+world+of+lung-specific+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">The a'MAZE'ing world of lung-specific transgenic mice.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 46, 269-282 (2012).</li>
<li>Ochs, M., Muhlfeld, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+microscopy+of+the+lung%3A+a+problem-based+approach.+Part+1%3A+basic+principles+of+lung+stereology%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Quantitative microscopy of the lung: a problem-based approach. Part 1: basic principles of lung stereology.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, L15-22 (2013).</li>
<li>Ysasi, A. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+unilateral+diaphragmatic+paralysis+on+postpneumonectomy+lung+growth%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effect of unilateral diaphragmatic paralysis on postpneumonectomy lung growth.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 305, L439-445 (2013).</li>
<li>Dane, D. M., Yilmaz, C., Estrera, A. S., Hsia, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separating+in+vivo+mechanical+stimuli+for+postpneumonectomy+compensation%3A+physiological+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%22%5BJournal%5D)">Separating in vivo mechanical stimuli for postpneumonectomy compensation: physiological assessment.</a> Journal of applied physiology. 114, 99-106 (2013).</li>
<li>Mortola, J. P., Magnante, D., Saetta, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expiratory+pattern+of+newborn+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%22%5BJournal%5D)">Expiratory pattern of newborn mammals.</a> Journal of applied physiology. 58, 528-533 (1985).</li>
<li>MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+simple+method+of+mouse+lung+intubation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+applied+physiology%22%5BJournal%5D)">An improved simple method of mouse lung intubation.</a> Journal of applied physiology. 106, 984-987 (2009).</li>
</ol>

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

قدمنا ​​وصفا أكثر تفصيلا للإجراءات PNX PNX الفار الفار وصورية الإبلاغ عنها حتى الآن. لقد حققنا القارئ على بينة من العديد من المخاطر الشائعة أن المحققين تعلم الإجراء تواجه عادة، ولقد أوجز العديد من التقنيات التي طورها المختبر لدينا لتخفيف ضد هذه المزالق. غيرها من المختبرات التي تستخدم هذا النموذج قد وضعت تعديلات تقنية أخرى أو استخدام أدوات مختلفة. عند تقييم الاختلافات في التقنيات، وسوف المحققين الفردية أن تقرر ما إذا كانت هذه الاختلافات تؤثر بشكل كبير على النتائج التجربة. <p cl...

والوظيفة الرئيسية للرئة هو توفير للأوكسجين والكربون ثاني أكسيد الصرف بين كائن حي والغلاف الجوي. في البشر، مجموعة من الشروط الخلقية والمكتسبة تؤدي إلى انخفاض مساحة الرئة مما يؤدي إلى اختلال وظائف الرئة. على الرغم من أن مجموعة من العلاجات مثل الستيرويدات المستنشقة، موسعات القصبات، الأكسجين الإضافي، والتهوية الميكانيكية المزمنة وتستخدم للتخفيف من عواقب اختلال وظائف الرئة 1-3، فإن العلاج المثالي لهذه الشروط تشجيع إعادة نمو أنسجة الرئة وظيفية - أي والرئة التجدد. وقد تم توثيق وترميم الأنسجة الثدييات أيضا. وشائك الفأر الأفريقي يمكن أن تتجدد مناطق واسعة من الجلد دون تشكيل ندبة 4. السلامية البعيدة في البشر يمكن تجديد التالية الإصابة أو بتر 5-7. بعد استئصال الرئة (PNX)، يحدث نمو الرئة التعويضي في الفئران 8، 9 الفئران، والقيامع 10، والبشر 11. بحكم التعريف، ونمو الرئة التعويضي ينطوي التوسع ليس فقط من الأجواء الحالية، ولكن إعادة تحوجز لهذه الأجواء الموسع مع التوسع في دوران الأوعية الدقيقة المرتبطة 12. وقد أثبت تحليل الجينات التعبير أن هذا النموذج يلخص العديد من الأحداث يشير التنمية الرئة 13. بعد أربعة أسابيع الماوس PNX، مساحة السنخية ما يعادل ذلك من الشام الحيوانات تعمل 14. في هذا المخطوط، وصفنا PNX الماوس والإجراءات PNX صورية.

<table><tbody><tr><td>قضيب مشبك الأوعية الدموية مقاس 6 بوصات</td><td>Teleflex Medical (WECK)</td> <td>137062</td><td></td></tr><tr><td>مشبك أحمر صغير من التيتانيوم Horizon</td><td>Teleflex Medical (WECK)</td> <td>1201</td><td></td></tr><tr><td>نمط ضيق ملقط منحني 12 سم</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>11003-12</td><td></td></tr><tr><td>ملقط منحني مسنن 10 سم ملقط Graefe</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>11052-10</td><td></td></tr><tr><td>حامل</td> <td>إبرة Castroviejoأدوات العلوم الدقيقة</td><td>12565-14</td><td></td></tr><tr><td>مقص حول مستقيم 9 سم (طرف حاد)</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>14075-09</td><td></td></tr><tr><td>مقص مستقيم 8.5 سم مقوى</td><td>أدوات العلوم</td><td>الدقيقة 14090-09</td><td></td></tr><tr><td>طرف مستقيم غير حاد مقص زنبركي كوهان فاناس</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>15000-12</td><td></td></tr><tr><td>غراء الجلد</td><td>الللوتور</td><td>32046</td><td></td></tr><tr><td>22 جم قسطرة</td><td></td><td></td><td></td>وعائية</tr><tr><td>24 جرام قسطرة</td><td></td><td></td><td></td>وعائية</tr><tr><td>3 مل حقنة</td><td></td><td></td><td></td>قفل لور</tr><tr><td>4 ضاعات</td><td></td><td></td><td></td>قصيرة</tr><tr><td>2 ضاغطات</td><td></td><td></td><td></td>طويلة</tr><tr><td>5-0 برولين على إبرة قطع منحنية</td><td>Ethicon</td><td>8698G</td><td></td></tr><tr><td>0.5 مل حقنة على إبرة</td><td></td><td></td><td></td> 27 جرام</tr><tr><td>عادي المحلول</td><td></td><td></td><td></td>الملحي</tr><tr><td>Buprenorphine</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Press-n-Seal wrap</td> شركة <td>Glad Products Company</td><td></td><td></td></tr><tr><td>12 × 12 بوصة مكدس لوح الفلين</td><td>مستودع Office Depot</td><td></td><td></td></tr><tr><td>70٪ الإيثانول</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>البيتادين</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ماوس</td> التنفس <td>الصناعي Hugo Sachs Elektronnik</td><td>Minivent Type 845</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane Vaporizer</td><td>OHMEDA</td><td>Excel 210 SE</td><td></td></tr><tr><td>مرهم دموع اصطناعي</td><td>Puralube</td><td>NDC: 17033-211-38</td><td></td></tr></tbody></table>

الماوس استئصال الرئة نموذج النمو الرئة التعويضي

Mouse Pneumonectomy Model of Compensatory Lung Growth

في البشر ، يساهم إصلاح الرئة المصابة وإعادة تشكيلها في مجموعة من اضطرابات الرئة الحادة والمزمنة التي قد تؤدي في النهاية إلى الإعاقة أو الوفاة. النماذج الحيوانية القائمة على الإصابة لإصلاح الرئة وتجديدها محدودة بالاستجابات الخاصة بالإصابة ، مما يجعل من الصعب التمييز بين التغييرات المتعلقة بالاستجابة للإصابة وحل الإصابة من التغييرات المتعلقة بإصلاح الرئة وتجديد الرئة. ومع ذلك ، فإن استخدام النماذج الحيوانية لتحديد مسارات إشارات الإصلاح والتجديد هذه أمر بالغ الأهمية لتطوير علاجات جديدة تهدف إلى تحسين وظيفة الرئة بعد إصابة الرئة. يستخدم نموذج استئصال الالتهاب الرئوي في الفأر نمو الرئة التعويضي لعزل إشارات الإصلاح والتجديد هذه من أجل تحديد آليات إعادة الفصل السنخي بشكل أكثر وضوحا. هنا ، نصف تقنيتنا لإجراء استئصال الالتهاب الرئوي في الفئران واستئصال الالتهاب الرئوي الوهمية. يمكن استخدام هذه التقنية جنبا إلى جنب مع تتبع النسب أو غيرها من نماذج الفئران المعدلة وراثيا لتحديد الآلية الجزيئية والخلوية لإصلاح الرئة وتجديدها.

. ويرد مؤامرة من PNX وصورية تعمل الأوزان الماوس في الشكل 6 في أيدينا، والبقاء على قيد الحياة على الدوام 95-100٪ لكلا PNX وصورية استئصال الرئة. للحصول على وصف لكيفية الرئة اليمنى إعادة ينمو في هذا النموذج وبالطبع الوقت المتوقع، نشير للقارئ أن المخطوطات من غيبني 15 آخرون وانغ وآخرون (14). يجب تجنب العديد من المخاطر المشتركة لتنفيذ الإجراءات صورية استئصال الرئ...

استئصال الرئة الفأر هو نموذج شائع الاستخدام لنمو الرئة التعويضي. يمكن استخدام هذا الإجراء جنبا إلى جنب مع تتبع النسب أو نماذج الفئران المعدلة وراثيا لتوضيح الآليات الأساسية.

In humans, disrupted repair and remodeling of injured lung contributes to a host of acute and chronic lung disorders which may ultimately lead to ...

الهدف من هذا الإجراء هو إجراء عملية استئصال الرئة اليسرى لتحفيز النمو التعويضي للرئة اليمنى. يتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق إجراء عملية بضع الصدر الأيسر وكشف السرة الرئوية اليسرى. وتتمثل الخطوة الثانية من الإجراء في ربط السرة الرئوية اليسرى والشريان الرئوي الأيسر.تتمثل الخطوة الثالثة في إزالة الرئة اليسرى. والخطوة النهائية هي إغلاق فتحة الصدر. يمكن استخدام نموذج استئصال الرئة في الفئران لدراسة نمو الرئة التعويضي بالتزامن مع تقنيات قياس حيوية أو كيميائية حيوية أخرى لتوضيح آليات نمو وتجدد السنخ الرئوي.يمكن لهذه الطريقة الإجابة على بعض الأسئلة الرئيسية في مجال نمو الرئة وتجددها، مثل ما هي العمليات الخلوية الرئيسية المشاركة في عملية التجزئة، وما هي العمليات الجزيئية الخلوية الحرجة اللازمة لإعادة بدء التجزئة؟ وبشكل عام، سيواجه الباحثون الجدد في هذه التقنية صعوبة في واحدة من عدة خطوات رئيسية، حيث قد يواجهون صعوبة في عملية القسطرة الرغامية.قد يواجهون صعوبة في إنشاء نافذة جراحية مناسبة، أو صعوبة في تحديد السرة الرئوية ووضع المشابك عليها، كما قد يواجهون صعوبة في تجنب إصابة الرئة اليسرى أثناء عملية بضع الصدر الوهمية. وسيقوم شانغ لو، مساعد المختبر الأقدم في مختبري، بشرح هذا الإجراء. للبدء، بعد تحريض التخدير في الفأر باستخدام 2% isof fluorine، يتم حلاقة منطقة الصدر والرقبة اليسرى باستخدام حلاقة كهربائية، ثم توضع مرهم الدموع الاصطناعية على عيني الفأر وتُطهر المنطقة عن طريق المسح بـ chlorhexidine ثلاث مرات، يليه isopropyl alcohol ثلاث مرات، ثم chlorhexidine مرة أخرى.ثلاث مرات. أكد عمق التخدير بتوثيق عدم وجود استجابة لقرصة بسيطة بعد إجراء شق عمودي بطول 1 سنتيمتر فوق منتصف الرقبة من الأمام لكشف الحنجرة، واستخدم ملقطاً مسنناً بطول 10 سنتيمتر لإبعاد العضلات السوارية برفق. ثم استخدم أطراف مقص مستقيم لمباعدة العضلات السوارية.بعد ذلك، أدخل قسطرة وعائية ذات طرف غير مدبب بمقاس 22 gauge عن طريق الفم في منتصف الرغامي، وأكد موضع القسطرة بصرياً من خلال الشق. ضع الفأر على جهاز تنفس للقوارض وحافظ على التخدير باستخدام 2% isof fluorine، مع تحديد ضغط قدره 15 centimeters.Water. ضع الفأر الذي لا يزال تحت التخدير في وضع الاستلقاء الجانبي الأيمن بحيث يكون الجانب الأيسر من الظهر مواجهاً للمُشغل.ضع غطاءً بلاستيكياً ذاتياً الإغلاق فوق جسم الفأر كستارة معقمة. استخدم مقصاً منحنياً ذا طرف غير مدبب لإجراء قطع بطول سنتيمترين موازياً للأضلاع عند المسافة الوربية الرابعة والخامسة. ثم أدخل طرفي المقص وقم بتشريح الجلد بعيداً عن الأضلاع والعضلات الوربية الموجودة تحته.ضع أربعة مباعدات على الجلد لتشكيل نافذة جراحية بمقاس 1.5 في 1.5 سنتيمتر. ثبت كل مباعد بلوحة الفلين. استخدم ملقطاً منحنياً للتشريح وصولاً إلى الأضلاع، ثم قم بتشريح العضلات الوربية تشريحاً غير حاد.لكشف الضلعين الرابع والخامس، استخدم أحد طرفي ملقط منحني لعمل ثقب للدخول إلى تجويف الصدر. الآن استخدم الشفرة السفلية لمقص جراحي دقيق ذو طرف غير مدبب للضغط على طول الشق حتى تدخل الشفرة السفلية في التجويف الصدري. قم بعمل شق بطول 0.5 centimeter بين الأضلاع، ثم كرر العملية في الاتجاه المعاكس.بعد ذلك، افتح الصدر على طول المحور الأمامي الخلفي عن طريق إدخال مباعدين وتثبيتهما بلوحة الفلين. الآن، قم بتحميل جهاز وضع المشابك الدقيقة. بعد ذلك، وباستخدام ملقط ذو طرف غير حاد ومنحنٍ يُمسك باليد غير المهيمنة، أمسك الرئة اليسرى وحرك الجزء العلوي جانبيًا وإلى الأسفل عبر عملية بضع الصدر حتى ينكشف الشريان الرئوي الأيسر والقصبة الهوائية.ثم أمسك مكرر المشابك الوعائية الدقيقة من التيتانيوم وهو محمل في اليد المهيمنة، بحيث يكون جسم الأداة في راحة اليد وطرف المنحنى موجهاً بعيداً عنها. مرر طرف الأداة داخل الصدر على طول انحناء الجانب الخلفي للرئة اليسرى، ثم قم بتثبيت القصبة الهوائية اليسرى والشريان الرئوي. أخرج الأداة مع الإبقاء على الرئة اليسرى مبعودة.أمسك بالمقصات الدقيقة ذات الرأس غير المدبب باليد اليمنى واقطع الشعبة الهوائية والشريان الرئوي في المنطقة البعيدة عن المشبك ثم أزل الرئة اليسرى. بعد إزالة الرئة، قم بإخراج مباعدات الأضلاع. ثم استخدم الملقط غير المدبب المنحني لرفع سنتيمتر واحد من الجلد أسفل الشق ولكن فوق مستوى الحجاب الحاجز، وأدخل قسطرة وعائية قياس 24 gauge عبر الجلد وصولاً إلى التجويف الصدري الأيسر.بعد ذلك، ضع غرزتين متقطعتين من خيوط البرولين 5-0 حول الضلعين الرابع والخامس. ولإغلاق التجويف الصدري، قم بإزالة مباعدات الجلد واستخدم مجموعتين من الملاقط لتقريب الجلد على طول الشق، ثم استخدم لاصق الأنسجة لإغلاق الجلد. وأخيرًا، قم بتوصيل حقنة lu lock سعة 3 ml بالقسطرة الوعائية وأزل الهواء المتبقي عن طريق تطبيق شفط خفيف وسحب القسطرة الوعائية.يتم الانتهاء من العملية بلصق الرقبة، ويُغلق الشق باستخدام مجموعتين من الملاقط كما هو متبع في إغلاق الشق الصدري. بعد كشف الرئة اليسرى للفأر المخدر كما تم توضيحه سابقاً، استخدم ملاقط غير حادة ومنحنية لرفع القفص الصدري والسماح بدخول الهواء إلى التجويف الصدري الأيسر. أدخل قسطرة وعائية Laser 24 gauge في التجويف الصدري الأيسر كما تم توضيحه سابقاً، مع الحرص على عدم إصابة الرئة اليسرى. باستخدام خيط جراحي proline 5-0 ومع توخي الحذر لعدم ثقب الرئة.ضع طوليْن من مادة الخياطة في المسافات الوربية الثالثة والرابعة والخامسة والسادسة. ضع كلا الطوليْن من مادة الخياطة قبل الربط لتقليل مخاطر فتق الرئة اليسرى. اربط مادة الخياطة لعمل غرزتين متقطعتين.قم بلصق الجلد فوق الشق الصدري. قم بإزالة الهواء المتبقي باستخدام القسطرة الوعائية، ثم قم بلصق شق الرقبة كما تم توضيحه سابقاً. أوقف تشغيل isof fluorine وأعطِ 0.1 milligrams per kilogram من buprenorphine و 0.5 milliliters من المحلول الملحي الطبيعي تحت الجلد.عندما يستأنف الفأر التنفس التلقائي، قم بإزالة الأنبوب الرغامي. راقب الفأر حتى يستعيد القدرة على الحركة. وعادةً ما يستأنف المشي بعد عدة دقائق من إزالة الأنبوب الرغامي.قم بإعطاء 0.1 milligrams per kilogram من buprenorphine عن طريق الحقن داخل الصفاق مرتين يومياً لمدة ثلاثة أيام بعد الجراحة. راقب الحيوان بعناية خلال هذه الأيام الثلاثة، واحرص على عدم فتح موقع الجراحة عند التعامل مع الحيوانات. توضح هذه الصورة فقدان الوزن بعد الجراحة.بعد 24 ساعة من الجراحة، ستفقد الفئران التي خضعت لعملية استئصال الرئة (pneumectomy) متوسط 1.5 grams، بينما ستفقد الفئران في مجموعة الشام (sham) متوسط 1.1 grams. وتستعيد كلتا المجموعتين وزنهما الذي كان قبل الجراحة بحلول اليوم الثالث بعد الجراحة. تظهر هذه الصورة الفلورية صبغ المناعة الفلورية لبروتين tropo elastin في الفص الملحق تحت ظروف الضبط.يظهر هنا التألق المناعي لبروتين التروپويلاستين (tropo elastin) في الفص الملحق بعد 72 ساعة من عملية استئصال الرئة (pneumo omy)، حيث لوحظ زيادة في الفراغات الهوائية الموجودة. وتُظهر صورة التألق المناعي لـ TRO Elastin النهائية هذه الفص الملحق بعد أربعة أسابيع من عملية استئصال الرئة. يرجى ملاحظة نمو الفص وتجدده.بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن تكتسب فهماً جيداً لكيفية تنفيذ نموذج استئصال الرئة في الفئران لدراسة نمو الرئة التعويضي، وكيفية إجراء عملية بضع الصدر الوهمية، والتي تُستخدم كمجموعة ضابطة لهذا الإجراء.

mouse-pneumonectomy-model-of-compensatory-lung-growth

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

التهاب القصيبات المسد هو المعوق الرئيسي لبقاء طويل الأمد للمتلقي زرع الرئة وعدم وجود نموذج ما قبل السريرية قوي يحول دون دراسة مسد إمراض مناعي التهاب القصيبات. خلافا لغيرها من عمليات زرع الأعضاء الصلبة، وأوعية دموية فأر زرع رئة إلا في الآونة الأخيرة وضعت. هنا نعرض لدينا نموذج تطويرها بشكل مستقل التهاب القصيبات مسد الفئران بعد زرع رئة واحدة orthotopic.

تطوير النزلات الشعبية مسد في نموذج الفئران من زرع الرئة Orthotopic

نقدم هنا بروتوكولا لقياس منحنى حجم ضغط الرئة في الفئران ببساطة وموثوقية ، مما يدل على أنه حساس بما فيه الكفاية للكشف عن التغيرات المتني المظهري في اثنين من أمراض الرئة الشائعة ، التليف الرئوي وانتفاخ الرئة. يوفر هذا المقياس وسيلة لتحديد التغيرات الهيكلية للرئة من خلال تطوير علم الأمراض.

قياس منحنى الضغط الحجم في الرئتين ماوس

تصف هذه الدراسة نجاح توليد نموذج جديد للحيوان مرض الانسداد الرئوي المزمن (COPD) وذلك بتعريض الفئران لتركيزات عالية من الأوزون مرارا وتكرارا.

جيل طراز انسداد الشعب الهوائية المزمن في الفئران بالتعرض للأوزون المتكررة

منطقة سطح الرئة الداخلية (عيسى) هو معيار حاسم لتقييم مورفولوجيا الرئة وعلم وظائف الأعضاء في أمراض الرئة والتجدد السنخي الناجم عن الاصابة. نحن تصف هنا طريقة موحدة التي يمكن أن تقلل من التحيز قياس عيسى في كل من استئصال رئوي الرئوي ونماذج الفئران زرع الاصطناعية.

طريقة موحدة لقياس المساحة الداخلية الرئة السطحية عن طريق استئصال رئوي الماوس وزرع الاصطناعية

بنيومونيكتومي اليسرى القوارض أسلوب قيمة في الأبحاث ارتفاع ضغط الدم الرئوي. نقدم هنا، بروتوكولا لوصف الإجراء pneumonectomy الفئران والرعاية بعد العملية الجراحية لضمان الحد الأدنى من معدلات الاعتلال والوفيات.

بنيومونيكتومي اليسرى جنبا إلى جنب مع مونوكروتاليني أو سكر كنموذج لارتفاع ضغط الدم الرئوي في الفئران

هنا ، نقدم تحسينات لنموذج زراعة رئة الفئران التي تعمل على تحسين النتائج. نحن نقدم دليل حجم للأصفاد على أساس وزن الجسم ، واستراتيجية قياس للتأكد من الفضاء الوربي 4 عشر ، وطرق إغلاق الجرح و BAL (غسل القصبات الهوائية) جمع السوائل والأنسجة.

نموذج زرع رئة الفئران لإصابة نقص التروية / التروية الدافئة: تحسينات لتحسين النتائج

نقدم نموذج رئة خنزير خارج الجسم الحي لعرض الميكانيكا الرئوية ومناورات التوظيف السنخية لأغراض التدريس. يمكن استخدام الرئتين لأكثر من يوم واحد (حتى خمسة أيام) مع الحد الأدنى من التغييرات في متغيرات الميكانيكا الرئوية.

إكس فيفو نموذج تجريبي للخنازير لدراسة وتدريس ميكانيكا الرئة

يصف هذا البروتوكول تطوير نموذج خنزير صغير حديثي الولادة لإصابة الرئة الحادة التي تنمذج الأحداث المسببة للأمراض المبكرة التي تحدث في الرئة الخدجية ، بما في ذلك كمية الفاعل بالسطح دون الكافية ، وفرط التأكسج ، والتهوية عالية الضغط ، والالتهاب ، لتسهيل فهم المحفزات الجزيئية لخلل التنسج القصبي الرئوي وتعزيز الترجمة العلاجية.

تطوير نموذج إصابة الرئة الحادة للخنزير الصغير حديثي الولادة يعيد إنشاء البيئة المبكرة لرئتي الخدج

وتصف هذه الورقة طريقة striaghforward وكفاءة تنبيب الفئران لقياس وظائف الرئة أو تقطير الرئوي، التي تسمح للفئران لاسترداد ويكون درس في أوقات لاحقة. الإجراء ينطوي على مصدر الضوء غير مكلفة الالياف البصرية الذي ينير مباشرة القصبة الهوائية.

طريقة بسيطة لتركيب الانبوبة الرئة ماوس

وقد ثبت التصوير بالموجات فوق الصوتية التشخيصية أن تكون فعالة في تشخيص مختلف أمراض الجهاز التنفسي في مواضيع الإنسان والحيوان. علينا أن نظهر بروتوكول الموجات فوق الصوتية الشاملة التي يستخدمها مختبر الدكتور تسوه لتحليل حركية الحجاب الحاجز وتحديدا في نماذج الماوس. وهذا هو أيضا أسلوب البحوث غير الغازية التي يمكن أن توفر معلومات كمية عن وظيفة الماوس العضلات التنفسية.

التشخيص بالموجات فوق الصوتية التصوير من ماوس الحجاب الحاجز وظيفة

تعلم استئصال الرئة الأيسر في الفئران لدراسة النمو التعويضي للرئة اليمنى. تُستخدم هذه الطريقة لاستكشاف آليات تجديد الأنسجة الرئوية ونمو الأسناخ.

الماوس استئصال الرئة نموذج النمو الرئة التعويضي

استكشف المزيد من الفيديوهات