Polyacrylamide Gels for Invadopodia and Traction Force Assays on Cancer Cells

Rachel J. Jerrell; Aron Parekh

doi:10.3791/52343

الهلام بولي أكريلاميد لInvadopodia وقوة الجر فحوصات على خلايا سرطان

JoVE Journal
Medicine

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Medicine

Polyacrylamide Gels for Invadopodia and Traction Force Assays on Cancer Cells

الهلام بولي أكريلاميد لInvadopodia وقوة الجر فحوصات على خلايا سرطان

Full Text

12,716 Views

08:48 min

January 4, 2015

DOI: 10.3791/52343-v

Rachel J. Jerrell¹, Aron Parekh¹

¹Department of Otolaryngology,Vanderbilt University Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

صلابة الميكانيكية في المكروية الورم تلعب دورا حاسما في سلوك القيادة الخبيث من خلال زيادة النشاط invadopodia وأكتوميوزين انقباض. باستخدام المواد الهلامية بولي أكريلاميد (جزء من الكميات المسندة)، invadopodia وقوة الجر فحوصات يمكن استخدامها لدراسة خصائص الغازية ومقلص من الخلايا السرطانية في الاستجابة إلى matrix صلابة.

الهدف العام من هذا الإجراء هو إنشاء مواد هلامية بولي أكريلاميد يمكن استخدامها في كل من فحوصات الغازية والبوديا وقوة الجر لدراسة الخصائص الغازية والانقباضية للخلايا السرطانية. يتم تحقيق ذلك عن طريق تنشيط زلات الغطاء 14 ملم أولا في عوالم أطباق الأزهار الزجاجية للتأكد من أن المواد الهلامية بولي أكريلاميد مرتبطة بالزجاج. بعد ذلك ، يتم تحضير محاليل بولي أكريلاميد لكلا المقايسين لإنتاج مواد هلامية ذات صلابة أو خصائص ميكانيكية مختلفة.

ثم يتم تحضير فحوصات podia التي تم غزوها بطبقة رقيقة من المصفوفة خارج الخلية المصنفة بالفلورسنت للكشف عن التدهور. أخيرا ، يتم زرع المقايسات بالخلايا السرطانية للحضانة الليلية ، متبوعة بتثبيت وتلطيخ الغازي ، وألواح البوديا ، وتصوير الخلايا الحية لألواح قوة الجر. في النهاية ، يتم استخدام المجهر الفلوري لتصوير الغازي والبوديا وتدهور المصفوفة خارج الخلية.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos