تقنية جراحية لزرع الأنسجة المهندسة الأوعية الدموية الطعوم واللاحقة في فيفو الرصد

بروتوكول خطوة بخطوة لوضع بين الموضعية من الأنسجة المهندسة سفن (TEVs) في الشريان السباتي من الأغنام باستخدام نهاية إلى نهاية مفاغرة في الوقت الحقيقي والتقييم الرقمي في الجسم الحي حتى التضحية الحيوانية.

الهدف العام من هذا الإجراء هو توفير بروتوكول قابل للتكرار للزرع الجراحي للطعوم الوعائية وأجهزة جديدة في الشريان السباتي. يتم تحقيق ذلك عن طريق الاستئصال الأول ، وهو جزء من الشريان السباتي الأصلي في الأغنام. الخطوة الثانية هي الخياطة في الطعم الوعائي المشار إليه هنا باسم الوعاء المصمم للأنسجة أو TEV باستخدام غرز بسيطة متقطعة وإنشاء مفاغرة.

بعد ذلك ، قسطرة مسبار التدفق. وهكذا يتم تثبيت البلورات المترية على الشريان السباتي والطعم الوعائي. في النهاية ، بعد الزرع ، يسمح هذا الإجراء بتسجيل تغييرات القطر وتدفق الدم والضغوط الشريانية في الجسم الحي طوال مدة التجربة.

من هذه القياسات ، يمكن مراقبة الامتثال الديناميكي وسرعة الموجة النبضية والمعلمات الديناميكية الدموية الأخرى لمتابعة إعادة التصميم في الجسم الحي. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها توفر بروتوكولا محسنا ومفصلا لزرع الكسب غير المشروع للأوعية الدموية يمكن أن يصبح ممارسة قياسية ، وبالتالي تقليل التباين الجراحي وتوفير وسيلة للدراسة في الجسم الحي. بشكل عام ، قد يكافح الأفراد الجدد في هذه الطريقة لأنهم قد لا يكونون على دراية بتفاصيل إجراء الزرع الأمثل وأهمية مراقبة ترقيع الأوعية الدموية والتكيف وإعادة التشكيل في الجسم الحي.

يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال تطوير الكسب غير المشروع الوعائي والبيولوجيا ، مثل ظروف هندسة أنسجة الأوعية الدموية المثلى وإعادة تشكيل الكسب غير المشروع للأوعية الدموية والمرض. تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية إلى علاج استبدال الأوعية الدموية لأنها توفر إجراء لدراسة تطور ترقيع الأوعية الدموية بشكل أفضل للتطبيقات السريرية. من خلال هذه الطريقة ، يمكننا تقديم رؤى حول دراسة هندسة أنسجة الأعضاء بأكملها وإعادة تشكيل الأوعية الدموية والأمراض مثل ارتفاع ضغط الدم أو حتى زرع الأعضاء بالكامل.

خطرت لنا هذه الفكرة لأول مرة عندما استخدمنا نموذج التحويلة الشريانية الوريدية خارج الجسم الحي لتقييم الظروف المثلى لتطوير طعم الأوعية الدموية المصمم بالأنسجة. يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا ضروريا لأن وضع الغرز والأجهزة أمر بالغ الأهمية للسالكية والحصول على البيانات بنجاح. لبدء هذا الإجراء ، قم بحث الأغنام على التخدير وإعداد الأغنام للجراحة.

كما هو موضح في بروتوكول النص ، قم بعمل شق تقريبي بطول 12 سم بالطول فوق عنق خط الوسط البطني باستخدام الكي الكهربائي. بعد ذلك ، قم بعزل الشرايين السباتية اليمنى واليسرى عن طريق إزالة النسيج الضام. باستخدام تقنية التشريح الحادة ، قم بالوصول إلى أسفل الستارة المعقمة وأدر رأس الأغنام بحيث يمكن تصور جانب الرقبة تحت الستارة.

استخدم إرقاء منحني بطول ثمانية سنتيمترات للنفق عبر الفراغ تحت الجلد بين شق الرقبة البطني وجانب الرقبة. افتح وأغلق الإرقاء لتشريح مساحة للأنبوب بعرض 1.5 سم تقريبا. قم بالوصول إلى أسفل الستارة المعقمة وقم بعمل شق 1.5 سم عبر الجلد فوق أطراف المرقئ بشفرة معقمة رقم 11.

قم بتمرير أنبوب tigon الذي يحتوي على جميع الأسلاك والأنابيب عبر النفق تحت الجلد. أمسك الأسلاك والأنابيب فوق الستارة المعقمة. ثم قم بالوصول إلى أسفل الستارة لإزالة أنبوب tigon الخارجي من الرقبة ، مع تعريض الأسلاك المزروعة أثناء مغادرتها عنق الأغنام.

اسحب الخطوط الفردية للخارج لتقليل أي تراخي في المساحة تحت الجلد. اترك مسافة كافية لربط الأجهزة بالشريان بشكل صحيح. بعد وضع مجسات تدفق دوبلر وإعطاء الهيبارين كما هو موضح في بروتوكول النص ، قم بتثبيت الشريان السباتي باستخدام مشابك الأوعية الدموية غير الساحقة واستئصال جزء يبلغ طوله حوالي أربعة سنتيمترات.

قم بخياطة الوعاء المصمم للأنسجة أو TEV في مكانه باستخدام غرز بسيطة متقطعة بسبيكة 7.0 proline F. خياطة أحادية الذراع مزدوجة. أولا ، قم بتثبيت أربع نقاط من TEV على الشريان الأصلي عن طريق وضع غرزتين متعارضتين على كل من الأطراف القريبة والبعيدة.

ثم أضف خمس إلى ست خيوط جراحية أخرى على الجانب السطحي لكل من الأطراف القريبة والبعيدة. لبدء مفاغرة في وقت واحد ، قم بتدوير المشابك الوعائية 180 درجة ، وأعد التوتر على خيوط التثبيت ، وأضف خمسة إلى ستة خيوط إضافية متقطعة إلى الأطراف القريبة والبعيدة على الجانب المستدير من TEV. بمجرد خياطة TEV بإحكام في مكانه ، قم بتدويرها مرة أخرى إلى الموضع الأصلي وقم بإزالة المشابك الوعائية واحدة تلو الأخرى ، المشبك البعيد أولا.

بعد ذلك ، قم بخياطة بلورات بالموجات فوق الصوتية ملليمتر واحد على الجوانب المتعارضة من TEV. باستخدام 7.0 ، يقوم البرولين بقسطرة الشريان باستخدام قسطرة معدلة عيار 18 مع لوحة منسوجة من التفلون. خياطة اللويحة على جدار الشرايين مع 5.0 في الزاوية للسيطرة على أي نزيف.

استخدم الإعصار للصق أنبوب التجويف الصغير بالقسطرة التي تم شطفها بالمحلول الملحي. بعد ذلك ، قم بتأمين الخطوط والأسلاك المزروعة في العضلات القريبة باستخدام حرير 2.0 وإبرة مستدقة. للقيام بهذا الموضع ، يقوم سلك مسبار تدفق الأوعية الدموية بالتوازي مع الوعاء مع تدلل المسبار والسلك الممتد للدوران ، ثم الدوران للخلف نحو العضلات الجانبية.

قم بتأمين السلك في العضلات المجاورة باستخدام حرير 2.0 على إبرة مستدقة في موقعين بحيث لا يتمكن السلك أو مسبار التدفق من وضع أي ضغط على الوعاء. ثم قم بخياطة الأسلاك البلورية وخط القسطرة الشريانية إلى العضلات الجانبية ، مما يسمح بحوالي 1.5 سم من الركود على غرار الخطوات السابقة لتأمين مسبار التدفق ، وتجميع جميع الأسلاك والخطوط معا وتثبيتها في العضلات قبل الخروج من خلال النفق تحت الجلد. على غرار S السابقة ، أغلق موقع الجراحة بخيطة فيكريل 2.0 في طبقات باستخدام نمط خياطة جارية على اللفافة وتحت الجلد وغرزة مرتبة جارية على الجلد.

أغلق الشق الذي يبلغ طوله 1.5 سم عند الرقبة الظهرية حول الأسلاك والخطوط الخارجية باستخدام 2.0 Vicryl وإبرة قطع. أخيرا ، ضع أسلاك مسبار التدفق وخطوط القسطرة والأسلاك البلورية بالموجات فوق الصوتية في كيس يتم خياطته بإحكام على جلد الأغنام. انظر البروتوكول النصي لرعاية ما بعد الجراحة للأغنام ضع الأغنام في عربة متنقلة لضمان ضبط النفس المناسب.

هذا يسمح للأغنام بالبقاء هادئة وواعية دون المساس بالأجهزة. قم بإزالة جميع الأسلاك والخطوط من الحقيبة وتوصيلها بأجهزة المراقبة. قم بتوصيل التدفق.

التحقيق في مقياس التدفق ، البلورات بالموجات فوق الصوتية المليمتر الواحد إلى صندوق A-T-R-B-U-S-B وخطوط القسطرة لمحولات الضغط. معايرة مجسات التدفق ومحولات الضغط. قبل الحصول على البيانات.

استخدم راسم الذبذبات لضبط قياس البلورة المملوكة للدولة. وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة ، قم بتسجيل البيانات باستخدام برامج الكمبيوتر هنا. يتوافق النصف العلوي باللون الأبيض مع TEV المزروع بينما يتوافق النصف السفلي باللون الأحمر مع الشريان الوهمي أو الأصلي لكل من TEV والوهم.

يتم تسجيل معدل تدفق القطر وضغط الدم الشرياني. مباشر بعد التسجيل لمدة دقيقة واحدة على الأقل دون أي إزعاج. تصدير هذه البيانات لتحليل أكثر تفصيلا.

ثم افصل جميع الأسلاك وضعها مرة أخرى في الحقيبة المخيطة على عنق الأغنام. تفعيلك. فيما يلي التسجيل المباشر في الجسم الحي لمعدل تدفق القطر وضغط الدم الشرياني ل TEV ، والذي يمكن تسجيله طوال مدة التجربة. تحسين زرع الطعوم الوعائية.

يسمح استخدام هذه التقنية الجراحية للباحثين باستبعاد الخطأ الجراحي كسبب لفشل الكسب غير المشروع بمجرد إتقانها ، يمكن إجراء هذه التقنية في أقل من ساعتين ونصف إلى ثلاث ساعات. إذا تم زرع TEV واحد أو ما يصل إلى ست ساعات ونصف. إذا كان سيتم أيضا زرع زيف وأجهزة TEV الذاتية أثناء محاولة هذا الإجراء ، فمن المهم أن تتذكر الحفاظ على مستوى مناسب من مضادات التخثر.

استخدام العوامل الموسعة للأوعية الدموية بدقة محسنة في وضع خياطة مفاغرة بعد هذا الإجراء. يمكن إجراء طرق أخرى مثل التلوين المناعي من أجل الإجابة على أسئلة إضافية مثل هجرة الخلايا وتمايز الخلايا. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية زرع الأوعية الدموية المصنوعة من الأنسجة في الشريان السباتي للأغنام ، وكذلك كيفية مراقبة تدفق الدم الشرياني وضغط الدم والتغيرات في ترقيع الأوعية الدموية ، القطر في الجسم الحي.

لا تنس أن العمل مع الأغنام الكبيرة الأخرى للاستخدام في بيئة تجريبية يحتاج إلى اتباع الاحتياطات الخاصة بالأنواع. إذا كنت تخطط للعمل مع هذه الكبيرة لدراساتك الخاصة ، فتأكد من أنك مدرب بشكل صحيح على التعامل مع هذه بطريقة آمنة وأخلاقية. شكرا لمشاهدة الفيديو الخاص بنا.