Name: عزل فأري موديل قلب عضلة القلب مذهل المصاحبة اعتقال شلل القلب (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-08-06T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 30 s
Description: تعلم تقييم الذهول عضلة القلب بعد الاعتقال القلبي الإقفاري في الفئران باستخدام الترويض الرجعي. تُساعد هذه الطريقة الباحثين على دراسة استعادة وظيفة القلب بعد الإصابة الإقفارية.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Kloner, R. a, Jennings, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Consequences+of+Brief+Ischemia%3A+Stunning%2C+Preconditioning%2C+and+Their+Clinical+Implications%3A+Part+1%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Consequences of Brief Ischemia: Stunning, Preconditioning, and Their Clinical Implications: Part 1.</a> Circulation. 104 (24), 2981-2989 (2001).</li>
<li>Mentzer, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+protection+in+heart+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cardiovasc+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Myocardial protection in heart surgery.</a> J Cardiovasc Pharmacol Ther. 16 (3-4), 290-297 (2011).</li>
<li>Chambers, D. J., Fallouh, H. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardioplegia+and+cardiac+surgery%3A+pharmacological+arrest+and+cardioprotection+during+global+ischemia+and+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Cardioplegia and cardiac surgery: pharmacological arrest and cardioprotection during global ischemia and reperfusion.</a> Pharmacol Ther. 127 (1), 41-52 (2010).</li>
<li>Bolli, R., Marbán, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+cellular+mechanisms+of+myocardial+stunning%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Molecular and cellular mechanisms of myocardial stunning.</a> Physiol Rev. 79 (2), 609-634 (1999).</li>
<li>Kloner, R. a, Bolli, R., Marban, E., Reinlib, L., Braunwald, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medical+and+Cellular+Implications+of+Stunning%2C+Hibernation%2C+and+Preconditioning+An+NHLBI+Workshop%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Medical and Cellular Implications of Stunning, Hibernation, and Preconditioning An NHLBI Workshop.</a> Circulation. 97 (18), 1848-1867 (1998).</li>
<li>Mersmann, J., Latsch, K., Habeck, K., Zacharowski, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measure+for+measure-determination+of+infarct+size+in+murine+models+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Shock+%28Augusta%2C+Ga%29%22%5BJournal%5D)">Measure for measure-determination of infarct size in murine models of myocardial ischemia and reperfusion: a systematic review.</a> Shock (Augusta, Ga). 35 (5), 449-455 (2011).</li>
<li>Bell, R. M., Mocanu, M. M., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retrograde+heart+perfusion%3A+the+Langendorff+technique+of+isolated+heart+perfusion%29%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Retrograde heart perfusion: the Langendorff technique of isolated heart perfusion).</a> J Mol Cell Cardiol. 50 (6), 940-950 (2011).</li>
<li>Skrzypiec-Spring, M., Grotthus, B., Szelag, A., Schulz, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolated+heart+perfusion+according+to+Langendorff---still+viable+in+the+new+millennium%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">Isolated heart perfusion according to Langendorff---still viable in the new millennium.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 55 (2), 113-126 (2007).</li>
<li>Sutherland, F. J., Shattock, M. J., Baker, K. E., Hearse, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+isolated+perfused+heart+characteristics+and+cautions%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Pharmacol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Mouse isolated perfused heart characteristics and cautions.</a> Clin Exp Pharmacol Physiol. 30 (11), 867-878 (2003).</li>
<li>Guide for the Care and Use of Laboratory AnimalsSource. , National Research Council. Available from:
 
 <a target="_blank" href="http://grants.nih.gov/grants/olaw/Guide-for-the-care-and-use-of-laboratory-animals.pdf">http://grants.nih.gov/grants/olaw/Guide-for-the-care-and-use-of-laboratory-animals.pdf</a> (2011).</li>
<li>Miller, A., Wright, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fabrication+of+Murine+Ventricular+Balloons+for+the+Langendorff+Heart+Preparation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biotecnol+Biomater%22%5BJournal%5D)">Fabrication of Murine Ventricular Balloons for the Langendorff Heart Preparation.</a> J Biotecnol Biomater. 1 (101), 1-4 (2011).</li>
<li>Curtis, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterisation%2C+utilisation+and+clinical+relevance+of+isolated+perfused+heart+models+of+ischaemia-induced+ventricular+fibrillation%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Characterisation, utilisation and clinical relevance of isolated perfused heart models of ischaemia-induced ventricular fibrillation.</a> Cardiovasc Res. 39 (1), 194-215 (1998).</li>
<li>Clements, R. T., Feng, J., Cordeiro, B., Bianchi, C., Sellke, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((p38+MAPK-dependent+small+HSP27+and+%CE%B1B-crystallin+phosphorylation+in+regulation+of+myocardial+function+following+cardioplegic+arrest%5BTitle%5D)+AND+%22American+journal+of+physiology.+Heart+and+circulatory+physiology%22%5BJournal%5D)">p38 MAPK-dependent small HSP27 and αB-crystallin phosphorylation in regulation of myocardial function following cardioplegic arrest.</a> American journal of physiology. Heart and circulatory physiology. 300 (5), H1669-H1677 (2011).</li>
<li>Clements, R. T., Cordeiro, B., Feng, J., Bianchi, C., Sellke, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rottlerin+increases+cardiac+contractile+performance+and+coronary+perfusion+through+BKCa%2B%2B+channel+activation+after+cold+cardioplegic+arrest+in+isolated+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Rottlerin increases cardiac contractile performance and coronary perfusion through BKCa++ channel activation after cold cardioplegic arrest in isolated hearts.</a> Circulation. 124 (11 Suppl), S55-S61 (2011).</li>
</ol>

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

تفاصيل بروتوكول السابقة أساليب لتقييم عضلة القلب مذهلة الثانوية لنقص التروية العالمية المرتبطة اعتقال شلل القلب. في أيدينا ينتج هذا البروتوكول تقريبي ~ تخفيض 40٪ في وظيفة القلب (LVDP، +/- موانئ دبي / دينارا) مع تغيرات طفيفة في معدل ضربات القلب في 30 دقيقة بعد ضخه نقطة في الوقت. كما يتم إشباعها القلب وrewarmed يتم تخفيض جميع المعلمات من وظيفة القلب في نقاط زمنية أولية مع معدل ضربات القلب تقلص إلى حد كبير قبل أن يستقر بين 20 و 30 دقيقة. عموما يتم زيادة تدفق التاجية بشكل كبير خلال ضخ...

عضلة القلب مذهلة يعرف بأنه انعكاس انخفاض النشاط مقلص على الرغم من استعادة تدفق الدم الكافي بعد فترة وجيزة من نقص التروية أو فترات طويلة من الشتائم الدماغية مع كارديوبروتيكتيون 1،2،3،4،5. يتم استخدام الطريقة المعروضة خصيصا لنموذج الشتائم الدماغية ذات الصلة سريريا والتي يمكن أن تؤدي إلى عاهات عكسها في وظيفة مقلص (أي إهانات الدماغية المرتبطة جراحة القلب باستخدام اعتقال شلل القلب، فترات قصيرة من نقص التروية، والذبحة الصدرية، وما إلى ذلك). وعلى النقيض من الدراسات نقص التروية الحاد (احتشاء عضلة القلب، نخر) تم تطوير هذا البروتوكول لتقييم الانتعاش وظيفية عضلة القلب وكارديوبروتيكتيون دون وقوع إصابات الأنسجة، وإعادة عرض، وموت الخلايا. الغالبية العظمى من ورقة تتناول معيار شلل القلب بروتوكول القبض مع عناصر مشابهة لجراحة القلب باستخدام حرارة الجسم ومتقطعة تسليم شلل القلب. بروت عضلة القلبection خلال معظم جراحات القلب يعتمد على شلل القلب وشرايين القلب. على الرغم من شلل القلب (CP) الحلول والاستراتيجيات تختلف على نطاق واسع (الدم، بلوراني والبرد، الخ دافئ) العناصر الأكثر شيوعا هي 1) فرط بوتاسيوم الدم و / أو غيرها من الاستراتيجيات للقبض على القلب في انبساط، مما يحد من استخدام الطاقة الناتجة من تقلص عضلة القلب، و2) انخفاض حرارة الجسم لإبطاء عملية التمثيل الغذائي وتساعد على الحفاظ على ATP واحتياطيات الطاقة الأخرى أثناء القبض عليه. حلول شلل القلب الحالية توفر الحماية للقلب ضد الشتائم الدماغية التي من شأنها أن يثبت خلاف ذلك قاتلة. ومع ذلك، استراتيجيات الوقاية من أمراض القلب خلال الشتائم الدماغية الجراحية ليست مثالية، وإصابة الدماغية الخفيفة الناتجة يمكن أن يؤدي إلى عكسها القلب ضعف مقلص على الرغم من تدفق الدم الكافي (عضلة القلب مذهلة)، الحماض، والضرر cardiomyocyte، وآثار الأوعية الدموية بما في ذلك انخفاض التروية التاجية وبالتشنج. هذا يختلف البروتوكولمن النماذج القياسية نقص تروية القلب معزولة تقييم احتشاء عضلة القلب ونقص التروية الحاد في أنه يقيم الشتائم الدماغية أكثر اعتدالا مما يمكن أن يؤدي إلى اختلال وظائف القلب بعد نقص التروية وجيزة أو الشتائم الدماغية المرتبطة اعتقال شلل القلب. (للمراجعة على تقنيات نضح Langendorff وI / دراسات R ترى 6-8). لمبادئ توجيهية عامة وتحليلا شاملا لالمعلمات التجريبية المرتبطة الماوس معزولة قلوب perfused لرؤية ساذرلاند ه ر ال. 2003 9 التقنية المقدمة هنا تفاصيل ما يلزم من معدات والكواشف، خطوات واستراتيجيات ونصائح للحث موثوق مذهلة في قلوب الماوس. تعديلات طفيفة ضرورية لتطبيق هذه التقنية على الفئران. لفترة وجيزة قلوب الماوس معزولة وLangendorff perfused للحوالي 30 دقيقة مع فيزيولوجي كريبس-هنسلايت العازلة (جسر الملك حسين)، تليها البارد السكتة القلبية محمية عن طريق تسليم hypotherm فرط بوتاسيوم الدمجيم حل شلل القلب. بعد الاعتقال، ويتم رصد الانتعاش وظيفية قلبية خلال إعادة التدفئة وضخه من القلب مع جسر الملك حسين. يمكن تقييم التغيرات في درجة استعادة وظيفة القلب مقلص لتقييم وكلاء الواقية للقلب واستراتيجيات كارديوبروتيكتيون مختلفة.

<table><tbody><tr><td>محلول شلل القلب (سانت توماس الثاني)</td><td></td><td></td><td>رمز / تركيزات (ملليمتر)</td></tr> <tr><td>كلوريد</td><td></td><td></td> الصوديوم <td>كلوريد الصوديوم ؛ 110</td></tr><tr><td>كلوريد</td><td></td><td></td><td>البوتاسيوم KCl ؛ 16</td></tr><tr><td>كلوريد</td><td></td><td></td> الكالسيوم <td>CaCL2 ؛ 1.5</td></tr><tr><td>كلوريد</td><td></td><td></td> المغنيسيوم <td>MgCL2 ؛ 16</td></tr><tr><td>بيكربونات</td><td></td><td></td> الصوديوم <td>NaHCO3 ؛ 10</td></tr><tr><td>كربس هاينسلت عازلة</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>كلوريد</td><td></td><td></td> الصوديوم <td>كلوريد الصوديوم ؛ 118</td></tr><tr><td>كلوريد</td><td></td><td></td><td>البوتاسيوم KCl ؛ 4.8</td></tr><tr><td>كبريتات</td><td></td><td></td> المغنيسيوم <td>MgSO4 ؛ 1.7</td></tr><tr><td>بيكربونات</td><td></td><td></td> الصوديوم <td>NaHCO3 ؛ 24.9</td></tr><tr><td>فوسفات البوتاسيوم (أحادي القاعدة)</td><td></td><td></td> <td>KH2PO4 ؛ 1.2</td></tr><tr><td>كلوريد</td><td></td><td></td> الكالسيوم <td>CaCL2 ؛ 1.4</td></tr><tr><td>بيروفات</td><td></td><td></td> الصوديوم <td>Na pyruvate ؛ 2</td></tr><tr>C6H12O6<td>الجلوكوز</td><td></td><td></td><td>؛ 6</td></tr><tr><td>كواشف</td><td></td><td></td><td></td>بالون</tr><tr><td>شراب الذرة</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>السباغيتي</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>السيليكون تشتت هلام كتلة</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>الستايروفوم</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>فرن مختبر / حاضنة (50 درجة مئوية)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>معدات</td><td></td><td></td><td></td>نضح لانجندورف</tr><tr><td>نظام القلب المنفوخ المعزول (IH-SR (Hugo-Sachs) أو ما يعادله)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>نظام الحصول على البيانات (DSI أو ADinstruments أو ما يعادله)</td><td></td><td></td><td></td></tr>جهاز <tr><td>تدوير</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr>الماء الساخنمضخة <td>نضح دائري</td><td></td><td></td><td></td>مياه</tr><tr><td>التبريد قادرة على 2-30 مل / دقيقة</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>مرشحات التروية المضمنة - 1 um الألياف</td><td></td><td></td><td></td>الزجاجية</tr><tr><td>مستشعرات الضغط ومكبرات الصوت ل LVP وضغط</td><td></td><td></td><td></td>التروية</tr><tr><td>أسطوانة صغيرة متدرجة (~ 10 مل)</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>مسبار درجة حرارة صغير ومقياس حرارة (Werner أو ما يعادل)</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>التروية resevoir (1 لتر)</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>شلل القلب (~ 200 مل) فقاعة</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td></td><td></td><td></td><td></td>الغاز</tr><tr><td>95/5 O2 / CO2 مزيج</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>الأدوات والكواشف</td><td></td><td></td><td></td>الجراحية</tr><tr><td>Metzenbaum و Potz مقص</td><td></td><td></td><td></td> جراحي</tr><tr><td>اثنان من ملقط</td><td></td><td></td><td></td>دومون مقاس 5</tr><tr><td>كيتامين</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>زيلازين</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>هيبارين</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>مشبك صغير مع جوانب ناعمة لتثبيت الشريان الأورطي (أي المشبك الطرفي بنهايات مسجلة)</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>خيوط</td><td></td><td></td><td></td> الحرير 2-0 و 4-0</tr></tbody></table>

عزل فأري موديل قلب عضلة القلب مذهل المصاحبة اعتقال شلل القلب

Murine Isolated Heart Model of Myocardial Stunning Associated with Cardioplegic Arrest

بروتوكول التالي من استخدام لتقييم وظيفة القلب ضعف أو مذهل يلي الشتائم الدماغية المعتدلة عضلة القلب. هذه التقنية مفيدة للنمذجة الإصابة الدماغية المرتبطة مع العديد من ظاهرة ذات الصلة سريريا بما في ذلك جراحة القلب بالاعتقال شلل القلب وشرايين القلب، بعيدا عن مضخة تحويل مسار الشريان التاجي، زرع، والذبحة الصدرية، نقص التروية وجيزة، وما إلى ذلك. يعرض بروتوكول طريقة عامة لنموذج تبريدي اعتقال شلل القلب فرط بوتاسيوم الدم وضخه في قلوب القوارض التركيز على قياس وظيفة مقلص عضلة القلب. باختصار، هو perfused لقلب الفأر في وضع langendorff، المجهزة مع بالون داخل البطينات، ويتم تسجيل المعلمات الأساسية وظيفية القلب. في أعقاب الاستقرار، والقلب هو بعد ذلك يخضع لاطلاع التسريب من الواقية للقلب حل شلل القلب تبريدي لبدء اعتقال الانبساطي. يتم تسليم شلل القلب بشكل متقطع أكثر من 2 ساعة. ثم يتم إشباعها القلب وWARMEويتم رصد د لدرجات حرارة سوي الحرارة واستعادة وظيفة عضلة القلب. استخدام هذه النتائج في بروتوكول موثوقة الاكتئاب وظيفة مقلص القلب خالية من الإجمالي تلف الأنسجة عضلة القلب في القوارض.

الشكل 1 يعرض نتائج نموذجية من التجربة الماوس واحد. LVP (خط أحمر)، DP / دينارا (الخط الأخضر)، ودرجة الحرارة (الخط البنفسجي) سجلت continusouly على ~ 3 ساعة. رسائل تشير إلى وجود - قياس خط الأساس، ب، ج، د، ه - تقديم حل شلل القلب، و - بدء ضخه، ز، ح، ط، ي - قياس تدفق cornary خلال ضخه. ملاحظة، LVDP الاكتئاب و DP / دينارا على ضخه بالمقارنة مع خط الأساس. ويتضمن الشكل 1B البيانات من A سجلت أكثر من ~ 2 ثانية. نلاحظ، فإن الانخفاض في LVP و DP / DT مماثلة لA، ت...

الهدف من هذا البروتوكول هو تقييم صدمة عضلة القلب بعد السكتة القلبية الإقفارية في القوارض.

The following protocol is of use to evaluate impaired cardiac function or myocardial stunning following moderate ischemic insults. The technique is useful ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو تقييم الصدمة العضلية القلبية (myocardial stunning) التي تحدث بعد التوقف القلبي الناتج عن نقص التروية الناجم عن سائل شلل القلب في القوارض. ويتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق التروية الرجعية لقلب تم استئصاله من فأر بالغ. وفي الخطوة الثانية، يتم إدخال بالون في البطين الأيسر للقلب وتسجيل قياسات التحكم الأساسية.يتم بعد ذلك بدء التوقف القلبي بالتبريد لمدة تجريبية مناسبة، تليها فترة من إعادة التروية. وفي نهاية المطاف، يمكن استخدام هذه التقنية لمراقبة التغيرات التي تحدث أثناء استعادة وظيفة عضلة القلب بعد الإصابة بنقص التروية. ورغم أن هذه الطريقة يمكن أن توفر رؤية حول صدمة عضلة القلب المرتبطة بإصابات نقص التروية الخفيفة في الفئران، إلا أنه يمكن تطبيقها أيضاً على ثدييات أخرى، مثل الجرذان ونموذجين من إصابات إعادة التروية الشديدة الناتجة عن نقص التروية.بشكل عام، يواجه الأشخاص المبتدئون في هذه الطريقة صعوبة لأن عملية قسطرة القلب بسرعة قد تكون شاقة، وهي متطلب أساسي للحصول على تحضير مستقر وقابل للتكرار. لإزالة القلب، يتم إجراء عملية بضع الصدر. تتمثل الخطوة الأولى في إحداث فتحة صغيرة أسفل عظمة القص مباشرةً، مع تمديد الشق إلى جانبي الفأر.بعد ذلك، قم بقص الحجاب الحاجز بسرعة، ثم قص جوانب القفص الصدري بسرعة. اقلب القفص الصدري للخلف مثل الصدفة لكشف التجويف الصدري. ثم أمسك القلب برفق، وضع المقص تحته وقم بإزالة العضو.ضع القلب في طبق يحتوي على محلول "كريبس هينزل لايت" المنظم (Crebs Henzel Light buffer)، أو KHB، المبرد بالثلج، وقم بإزالة أي قطع كبيرة من أنسجة الرئة. بعد ذلك، اضغط على القلب برفق؛ حيث يشير ظهور أي دم إلى الطرف المفتوح من الشريان الأورطي.قبل تثبيت القلب، قم بتشغيل المضخة وتأكد من أن ضغط التروية يبلغ حوالي 20 millimeters of mercury. ثم استخدم ملقطاً دقيقاً لالتقاط القلب من الطرف المفتوح للشريان الأورطي، واستخدم مجموعة أخرى من الملاقط الدقيقة لدفع القلب للأعلى فوق كانيولا نظام التروية، مع تثبيت القلب في مكانه. استخدم مشبكاً ذا حافة ناعمة لتثبيت الشريان الأورطي مؤقتاً بالكانيولا.بعد ذلك، استخدم خيط جراحة حريري بمقاس 4-0 لتثبيت الأبهر في الكانيولا مباشرة أسفل المشبك. مع الحرص على وضع الربطة حول الكانيولا أيضاً لضمان عدم انغلاق الأبهر عند شد العقدة. وبمجرد تثبيت الربطة بإحكام، قم بإزالة المشبك واستخدم خيوط حريرية إضافية لتثبيت الأبهر بإحكام في الكانيولا.يتم ربط الغرز أسفل أي تفرعات وعائية خارجة من الأبهر والتي تعاني من تسريب أو تتدفق منها سوائل التروية. خلال المراحل الأولية من التروية، يجب أن يتم غسل الدم من القلب ويتحول العضو بأكمله إلى اللون الوردي الفاتح. بمجرد تثبيت القنية، يتم زيادة ضغط التروية وسرعة المضخة ببطء حتى يصل ضغط التروية إلى 70 millimeters of mercury. ثم يتم إزالة أي أنسجة متبقية لا تزال ملتصقة بالقلب.بعد ذلك، قم بقطع الأذينين اليساريين لإنشاء فتحة في البطين الأيسر. الآن، ضع بالوناً على الحامل وقم بتفريغه من الهواء. ثم ضع كانيولا البالون بالقرب من كانيولا الأبهر مباشرة فوق الفتحة المؤدية إلى البطين الأيسر، وأدخل البالون بعناية إلى الأسفل داخل البطين الأيسر مع تثبيت القلب في مكانه لتجنب تمزق الأبهر.بمجرد وضع البالون في مكانه، ابدأ بنفخه ببطء حتى يصل ضغط نهاية الانبساط في البطين الأيسر إلى 8 mmHg تقريباً. بعد ذلك، ضع مسبار درجة الحرارة مقابل الجزء السفلي من القلب لقياس درجة حرارة السائل المتدفق. ولأخذ القياس الأساسي، يتم إغلاق القلب في غرفة تروية ذات غطاء مائي مضبوطة عند 37 °C مع تروية مستمرة بمحلول KHB.ابدأ بعد ذلك التسجيل المستمر للقياسات الوظيفية المطلوبة باستخدام نظام الحصول على البيانات المناسب. وبمجرد أن يصل السائل الناضح إلى درجة حرارة 37 °C تقريباً لمدة 15 دقيقة على الأقل، وتستقر المعايير الوظيفية القلبية، دوّن وقت قياسات الخط الأساسي. ثم قم بقياس التدفق التاجي من خلال تجميع السائل الناضح التاجي واستخدام أسطوانة مدرجة.بعد مرور دقيقة واحدة، أغلق الغرفة واترك درجة الحرارة والوظيفة تعودان إلى القيم المرجعية. لبدء الإيقاف الآن، أضف 100 milliliters من محلول كardioplegic أو منظم CP البارد إلى خزان ثانٍ، ثم انقل كانيولا خزان KHB إلى خزان CP. باستخدام وصلات الأنابيب سريعة الفصل، انقل الغلاف ذو الغطاء المائي ودائرة تدفئة التروية من حمام الماء الدافئ إلى جهاز التدوير المبرد، مع تتبع فقاعة الهواء التي تدخل إلى أنابيب التروية أثناء عملية النقل.بمجرد دخوله في مصيدة الفقاعات بالقرب من القلب المعزول، ابدأ توقيت عملية شلل عضلة القلب وقم بإيصال المحلول المنظم لمدة دقيقتين. ومع إيصال محلول الـ CP وتبريد القلب، ستنخفض وظيفة القلب وسيتوقف في مرحلة الانبساط بعد الجرعة الأولية. أوقف المضخة واترك القلب في محلول الـ CP المنظم لمدة ساعتين عند درجة حرارة 20 درجة Celsius تقريبًا، مع تشغيل المضخة كل نصف ساعة لمدة دقيقة واحدة. في نهاية فترة الـ CPE، قم بنقل كانيولا الخزان مرة أخرى إلى محلول KHB المؤكسج وقم بتوصيل دوائر التحكم في درجة الحرارة بجهاز التدوير الحراري.بعد ذلك، قم بتشغيل المضخة لبدء عملية إعادة التروية لمدة 30 دقيقة لغسل محلول الـ CP. وبعد مرور دقيقتين إلى أربع دقائق، سترتفع درجة الحرارة ويبدأ القلب في النبض ببطء وبشكل إيقاعي؛ قم بجمع السائل الناضح في أسطوانة مدرجة لمدة تتراوح من 30 إلى 60 ثانية في المرة الواحدة للحصول على قياسات تدفق الشرايين التاجية المناسبة. تظهر هنا النتائج النموذجية لتجربة أجريت على فأر واحد، حيث يتم تسجيل ضغط البطين الأيسر، والمشتق الأول الموجب والسالب لضغط البطين الأيسر (LVP)، ودرجة الحرارة بشكل مستمر على مدار ثلاث ساعات تقريبًا كما تم توضيحه للتو؛ وعند إعادة التروية، لوحظ هنا انخفاض في LVP وانخفاض في المشتق الأول الموجب والسالب لـ LVP مقارنة بالمستوى المرجعي.يظهر ضغط تروية LVP والمشتقة الأولى الموجبة والسالبة لبيانات LVP من الشكل السابق، والتي تم تسجيلها على مدى ثانيتين قبل وبعد توقف CP الإقفاري. يوضح هذا كيف يتم رصد التغيرات في LVP والمشتقة الأولى الموجبة والسالبة لبيانات LVP بعد تحريض شلل عضلة القلب؛ حيث يُلاحظ عادةً انخفاض في وظائف القلب بنسبة تتراوح تقريبًا بين 30 إلى 40% بعد 30 دقيقة من إعادة التروية، كما يتضح من بيانات ضغط البطين الأيسر المتطور التي تم تتبعها في هذا الرسم البياني الأخير. وبمجرد إتقان هذه العملية، يمكن استئصال القلب وتركيبه على جهاز التروية في غضون دقيقة إلى دقيقتين تقريبًا إذا تم تنفيذ ذلك بشكل صحيح.بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إزالة قلب الفأر وترويته، وما يتلو ذلك من توقيف قلبي تبريدي وإعادة التروية.

murine-isolated-heart-model-myocardial-stunning-associated-with

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

ويقدم نموذجا قويا للرعاية الحرجة والمتعلقة المحيطة بالجراحة إصابة الكلى الحاد. به الجسم كله نقص انسياب الدم الناجم عن السكتة القلبية من الممكن تكرار ما يقرب من التغيرات النسجية والوظيفي للآكي السريرية.

توقف القلب والإنعاش القلبي Normothermic : نموذج الفأر من نقص التروية ، إعادة إشباع الخلايا الإصابات

صدمة جراحية يدفع استجابة التهابية. ومن المعروف السيتوكينات ويغاندس الذاتية لتعديل حجم عضلة القلب بعد احتشاء الإسكيمية وضخه. نحن تقديم تعديل المغلقة الصدر نموذج من نقص التروية الفئران وضخه باستخدام أوزان شنقا للحد من آثار بضع الصدر.

والفئران مغلقة الصدر نموذج نقص التروية القلبية وإعادة إشباع الخلايا

يمكن استخدام نماذج القلب العامل المعزولة  لقياس تأثير ظروف التحميل ومعدل ضربات القلب والأدوية على أداء عضلة القلب واستهلاك الأكسجين. نصف طرق تحضير نموذج عمل القلب الأيسر للقوارض الذي يسمح بدراسة الأداء الانقباضي والانبساطي واستهلاك الأكسجين في ظل ظروف مختلفة.

القوارض العمل نموذج القلب لدراسة أداء عضلة القلب واستهلاك الأوكسجين

أثناء جراحة نقص تروية عضلة القلب / إعادة التروية في الفئران ، عادة ما يتم تأكيد الوضع الصحيح للرباط المسدود من خلال الملاحظة المرئية لشحوب عضلة القلب. هنا ، يتم عرض طريقة لتأكيد نقص التروية وإعادة التروية ، لتكملة شحوب عضلة القلب المرصودة ، في ذكور الفئران C57Bl / 6.

تأكيدا لعضلة القلب نقص التروية وضخه إصابة في الفئران عن طريق الكهربائي الوسادة السطحية

هنا نقوم بوصف إجراء جراحي يوضح كيفية تحقيق الربط الدائم للشريان التاجي الأمامي الأيسر في الفئران. هذا النموذج ذو أهمية كبيرة للتحقيق في الفيزيولوجيا المرضية لاحتشاء عضلة القلب والعمليات البيولوجية المصاحبة.

نموذج احتشاء عضلة القلب Murine باستخدام الربط الدائم للشريان التاجي الأمامي الأيسر

يوضح هذا المقال نموذجا لدراسة إعادة عرض القلب بعد إصابة التبريد عضلة القلب في الفئران.

نموذج الإصابة بالتبريد لدراسة احتشاء عضلة القلب في الماوس

يحدد هذا البروتوكول خطوات إحداث احتشاء عضلة القلب في الفئران مع الحفاظ على التامور ومحتوياته.

نموذج القوارض الإقفارية التامور سليمة

يظهر هنا إجراء جراحي للربط الدائم للشريان التاجي الأيسر في الفئران. يمكن استخدام هذا النموذج للتحقيق في الفيزيولوجيا المرضية والاستجابة الالتهابية المرتبطة بها بعد احتشاء عضلة القلب.

ربط الشريان التاجي الأيسر: نموذج الفئران الجراحي لاحتشاء عضلة القلب

يوضح هذا البروتوكول نموذجا فريدا للفأر للسكتة القلبية الخانقة التي لا تتطلب ضغطا على الصدر للإنعاش. هذا النموذج مفيد لمراقبة وتصوير ديناميكيات فسيولوجيا الدماغ أثناء السكتة القلبية والإنعاش.

نموذج السكتة القلبية للفأر لتصوير الدماغ ومراقبة فسيولوجيا الدماغ أثناء نقص التروية والإنعاش

طريقة دقيقة وعملية لقياس المعلمات مثل سلالة في أنسجة عضلة القلب هي ذات قيمة كبيرة السريرية ، حيث ثبت أن السلالة هي العلامة الأكثر حساسية وضعف في وقت سابق عن مقلص من EF المعلمة المستخدمة بشكل متكرر.

الرنين المغناطيسي المشتقة عضلة القلب عن طريق تقييم سلالة ميزة تتبع

تعلم تقييم الذهول عضلة القلب بعد الاعتقال القلبي الإقفاري في الفئران باستخدام الترويض الرجعي. تُساعد هذه الطريقة الباحثين على دراسة استعادة وظيفة القلب بعد الإصابة الإقفارية.

عزل فأري موديل قلب عضلة القلب مذهل المصاحبة اعتقال شلل القلب

استكشف المزيد من الفيديوهات