أبريل 8, 2015
يصف هذا البروتوكول لوحة الثقب المعدلة ، وهي عبارة عن إعداد اختبار سلوكي يشتمل على خصائص الحقل المفتوح ولوحة الثقب التقليدية. يتيح هذا الإعداد التحليل التفاضلي للسلوك غير المشروط لثدييات المختبر الصغيرة بالإضافة إلى تحليل القدرات المعرفية.
يتمثل الهدف العام من التجارب التالية في قياس السلوك غير الشرطي للثدييات المختبرية الصغيرة وتحليل قدراتها المعرفية. ويتحقق ذلك عن طريق وضع الحيوانات في لوحة ثقوب معدلة لمراقبة سلوكها غير الشرطي وتقييمه، سواء بوجود رفقائها في القفص أو بدونهم. بالإضافة إلى ذلك، يمكن وضع جسم جديد أو مألوف أو حبيبة طعام في الجهاز قبل الاختبار، وهو ما يمكن استخدامه لقياس التعرف على الأشياء أو تثبيط تناول الطعام.
يتمثل التطبيق الثالث لهذه الطريقة في وضع الحيوان في النسخة المعرفية من اللوحة الكاملة المعدلة حيث يتم ربط المكافأة بمعرّف ذي لون متباين. ولقياس القدرات المعرفية لموضوع الاختبار، تُظهر النتائج طيفاً من السلوك غير الشرطي. وبما أن هذه الطريقة تدمج أبعاداً سلوكية متعددة في نموذج واحد، والذي يحتوي على سمات من اختبار لوحة الثقوب التقليدية واختبار الحقل المفتوح، فإن الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تتغلب على عيوب مجموعة الاختبارات من خلال تقليل عدد الحيوانات المستخدمة، وتجنب التأثيرات المحتملة لترتيب الاختبارات، وتقليل تأثير الوقت والتكاليف. يجب إجراء الاختبار في غرفة الإيواء العادية خلال المرحلة المظلمة، وهي المرحلة الأكثر نشاطاً للحيوان، ولأغراض هذا الفيديو، يتم إجراء الاختبار في ظروف إضاءة ساطعة.
يجب إجراء الاختبارات السلوكية على الحيوانات التي اعتادت على بيئتها وعلى التعامل معها من قبل الباحث. ضع اللوحة التي تحتوي على الأسطوانات في منتصف صندوق التجارب. ثم ضع ضوء مسرح فوق اللوحة لإحداث تباين في شدة الضوء بين اللوحة والصندوق، ولزيادة الصفة المنفرة للوحة.
للبدء، ضع الجسم المألوف في الجهاز على بعد سنتيمترين من جسم جديد في الزاوية المقابلة لنقطة البداية. ثم أخرج الحيوان المراد اختباره من القفص المنزلي وضعه في مواجهة الجدار في زاوية محددة من الجهاز. اسمح للحيوان بالاستكشاف بحرية لمدة خمس دقائق تقريبًا.
يجب أن يقوم مراقب خبير بتقييم المعاملات السلوكية باستخدام برنامج تسجيل السلوك. استخدم المعاملات المدرجة في هذا الجدول، وقم أيضاً بقياس الوقت الذي يستغرقه الحيوان للاقتراب من الجسم الجديد والمألوف أو مادة غذائية جديدة ومألوفة. نظف الجهاز باستخدام ماء الصنبور ومناديل ورقية بعد كل تجربة.
لتجنب حدوث انحياز بناءً على الإشارات الشمية، ضع الرفقاء في حجرة المجموعة لمدة تتراوح من 10 إلى 30 دقيقة قبل اختبار الحيوان التجريبي للسماح له بالتأقلم. بعد ذلك، ضع الحيوان التجريبي في حجرة الاختبار واتركه يستكشف اللوحة الكاملة المعدلة بحرية لمدة خمس دقائق أو للمدة التي يتطلبها البروتوكول الخاص بك. ومرة أخرى، اجعل مراقباً خبيراً يقوم بتقييم المعايير السلوكية مباشرة باستخدام برنامج تسجيل السلوك، وذلك وفقاً للمعايير المدرجة في الجدول 1 كما سبق.
قبل البدء في هذه التجربة، قم بتعويد الحيوانات على مكافأة عالية الاستساغة. تم استخدام قطعة من اللوز هنا. قدم المكافأة باستخدام ملقط في القفص المنزلي مرة واحدة يومياً لمدة يومين متتاليين قبل التجربة، ثم أدخل حاجزاً لتقليل حجم الصندوق إلى 50 by 50 سنتيمتر.
لاختبار الفئران، ضع لوحاً أصغر في منتصف الصندوق. يوضح هذا المخطط إعداد لوح الثقوب المعدل. بعد ذلك، قم بتعطير جميع الأسطوانات العشر بنكهة تجذب الحيوانات، مثل الفانيليا، وضع الطعوم في جميع الأسطوانات مع وضع المكافأة أسفل شبكة بحيث لا يمكن إزالتها.
استخدم أسطوانات Q3 ذات حلقة ملونة تتباين مع مادة الـ PVC، وقم باستدراج الحيوان لهذه الأسطوانات باستخدام مكافأة قابلة للإزالة. مرة أخرى، ضع الحيوان في نفس زاوية الجهاز، وقم بتكليف مراقب خبير بالتسجيل المباشر. يتم تحديد المعايير السلوكية باستخدام برنامج تسجيل السلوك.
قم بقياس المعلمات المدرجة في الجدول الثاني بالإضافة إلى تلك الموضحة مسبقاً في الجدول الأول، باستثناء المعلمات المتعلقة بالتعرف على الأشياء أو تثبيط تناول الطعام. أجرِ أربع تجارب تدريبية يومياً مع فاصل زمني ثابت بين التجارب حتى يتم تحديد وقت ثابت لجمع قطع اللوز الثلاث جميعها. نظف الجهاز بماء الصنبور ومنشفة ورقية بعد كل تجربة لتجنب أي انحياز قائم على الإشارات الشمية عند اختبار تعلم العكس.
بمجرد تدريب الحيوان بشكل كامل، قم بتقديم الإشارة والطعم في ثلاث أسطوانات مختلفة أو في عدد الأسطوانات التي يتطلبها البروتوكول الخاص بك، ثم اختبر الحيوان وفقاً لعدد التجارب المطلوبة. تُظهر الصور الأربع الأولى نتائج نموذج الاختبار المعرفي الذي يقيس الأداء المعرفي لفئران C 57 black six J التي تعاني من نقص تأكسج ونقص تروية دماغي خفيف، والمشار إليها بالرمز HI 45، ونقص تأكسج ونقص تروية شديد، والمشار إليه بالرمز HI 75، وفئران مجموعة التحكم الوهمية. يوضح هذا الرسم البياني متوسط زمن الاستجابة لإكمال التجارب الأربع في يوم الاختبار.
يوضح هذا الرسم البياني عدد مرات إعادة الزيارة لثقب يحتوي على طُعم في كل يوم من أيام الاختبار، وهو مقياس لأخطاء الذاكرة قصيرة المدى. تظهر هنا الزيارات للثقوب التي لا تحتوي على طُعم.
يعد هذا مقياساً لأخطاء الذاكرة طويلة المدى. تظهر هنا البيانات الخاصة بعدد أخطاء الإغفال. ويُعرّف خطأ الإغفال بأنه عدد الأسطوانات التي تحتوي على طُعم ولم يتم زيارتها.
للتأكد من أن مجموعة I 45 لم تعانِ من أي ضعف إدراكي، تم اختبار هذه المجموعة مقابل ضوابط الشام. في مهمة العكس، تم تخصيص الثقوب الثلاثة التي تحتوي على الطعم لثلاث أسطوانات مختلفة، واختُبرت الحيوانات على مدار أربع محاولات. يظهر تأثير العكس عند مقارنة المحاولة الأخيرة من المرحلة الأولى بالمحاولة الأولى من مرحلة العكس.
توضح هذه الصورة فترة الكمون اللازمة لإكمال التجربة لكلا المجموعتين، حيث يظهر بوضوح تأثير علاجي عام. وهذا يعني وجود ضعف في المرونة المعرفية لدى مجموعة HI 45، وهو ما أمكن اكتشافه باستخدام اللوحة الكاملة المعدلة مع مهمة العكس. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية استخدام اللوحة الكاملة المعدلة في كل من الإصدار العام والإصدار المعرفي.
يصف هذا البروتوكول لوحة الثقوب المعدلة، وهو اختبار سلوكي يجمع بين خصائص الساحة المفتوحة ولوحة الثقوب التقليدية. ويتيح هذا الاختبار التحليل التفاضلي للسلوك غير الشرطي والقدرات المعرفية في الثدييات المختبرية الصغيرة.
يتيح نموذج لوحة الثقوب المعدلة (mHB) إجراء توصيف سلوكي ومعرفي شامل في الثدييات المختبرية الصغيرة، مما يدعم التحقق من الأهداف في المراحل المبكرة وتقليل المخاطر الميكانيكية في اكتشاف أدوية الجهاز العصبي المركزي والاضطرابات النفسية. ومن خلال دمج أبعاد سلوكية متعددة في مقايسة واحدة، تعمل لوحة mHB على تقليل عدد الحيوانات المستخدمة، والحد من تأثيرات ترتيب الاختبارات المتداخلة، وتسهيل عملية فرز المحافظ العلاجية للأهداف ذات الصلة بالجهاز العصبي المركزي.
يُدمج نموذج mHB ضمن تسلسل عملية الاكتشاف، بدءاً من التحقق الأولي من الهدف وصولاً إلى تحديد المركبات الرائدة والتقييم السلوكي قبل السريري، لا سيما في المجموعات البحثية التي تركز على الجهاز العصبي المركزي (CNS).