الجيل الفعال للhiPSC العصبية النسب مراسلون Knockin معينة باستخدام كريسبر / Cas9 وCas9 مزدوجة نظام Nickase

10.5K مشاهدة

استشهد بها 5

14:46 دقيقة

مايو 28, 2015

10.3791/52539-v

مايو 28, 2015

10.5K مشاهدة

* These authors contributed equally

أدت أدوات تحرير الجينوم مثل نظام CRISPR (Clustered Regular Interspaced Short Palindromic Repeats) / Cas (المرتبطة ب CRISPR) إلى تحسين كفاءة استهداف الجينات بشكل كبير في الخلايا الجذعية متعددة القدرات التي يسببها الإنسان (hiPSCs). تصف هذه المخطوطة بروتوكولا لإنشاء مراسل hiPSC خاص بالنسب باستخدام إعادة التركيب المتماثل بمساعدة نظام CRISPR / Cas.

استكشف المزيد من الفيديوهات

إنشاء مراسل الإدخال

Chapters in this video

0:05

العنوان

1:54

تصميم ناقلات الاستهداف

2:41

تصميم وبناء ناقلات sgRNAs لنظام CRISPR/Cas9

5:20

تصميم وبناء sgRNA لإنزيم Cas9n Double Nickase

8:06

تقييم sgRNAs بواسطة T7 Endonuclease1

11:03

التنبؤ الحاسوبي بمواقع الاستهداف غير المقصودة المحتملة

12:32

النتائج: استخدام مقايسة T7E1 لتقييم sgRNAs قبل ترنسفكشن خلايا hiPSCs

13:56

الخلاصة

Related Videos