استخدام الوامئات (ذوات الجناحين) العذراء سلخ بمثابة بروتوكول Bioassessment السريع لالمسطحات المائية العائمة السطحية

الهدف العام من هذا الإجراء هو وصف تقنيات جمع ومعالجة عينات التلميذ العائمة السطحية لتقييم جودة المياه. يتم تحقيق ذلك عن طريق جمع عينات ميدانية من تلميذ شيرون السابق من البيئات المائية. في الخطوة الثانية ، يتم اختيار عينة فرعية من 300 عينة من كل عينة ميدانية ، ويتم فصل العينات إلى مجموعات مورفولوجية متميزة.

في الخطوة الأخيرة ، يتم تثبيت ممثلين متعددين من كل مجموعة على شرائح مجهر زجاجي. في النهاية ، يتم تحديد العينات حسب الجنس أو الأنواع لتقييم ظروف جودة المياه. الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل أخذ عينات اللافقاريات القاعية التقليدية ، هي أن جمع العينات ومعالجتها فعال واقتصادي وقابل للتطبيق في جميع البيئات المائية تقريبا.

ينتج عن استخدام هذه التقنية معلومات قيمة لدراسات المراقبة البيولوجية ويمكن أن يوفر رؤى حول كيفية تغير المواقع بمرور الوقت بسبب الاضطرابات أو أحداث التلوث أو التغير المناخي. على الرغم من أننا نركز على كيفية استخدام هذه التقنية في موطن التيار ، إلا أنه يمكن تطبيقها بسهولة على الأنظمة المائية الأخرى مثل الأنهار أو البحيرات أو البرك أو هيئات المحلفين أو البرك الصخرية قبل الذهاب إلى الحقل. ضع ملصق تاريخ وموقع واحد بالداخل ، وملصق واحد على السطح الخارجي لجرة عينة واحدة لكل عينة يتم جمعها.

ثم لكل عينة مع صينية يرقات في يد وغربال في اليد الأخرى ، اغمس صينية اليرقات في الماء حيث تتراكم إفرازات التلاميذ عندما يدخل مخرج تلميذ الماء والحطام إلى صينية اليرقات أو العينة من خلال الغربال. بعد 10 دقائق من التجميع ، استخدم زجاجة مملوءة بالماء الذي تم جمعه من وصول العينة لتركيز أي حطام في منطقة واحدة من المنخل. ثم باستخدام ملقط وتيار من الإيثانول ، انقل بعناية الخروج من التلميذ إلى جرة العينة المناسبة المسبقة وملأ البرطمان بالإيثانول.

لبدء انتقاء العينة ، ضع التاريخ المناسب وملصق الموقع في قارورة دكتور واحدة لكل عينة إفرازات تلميذ واملأ القارورة بثلاثة أرباع بالإيثانول. بعد ذلك ، قم بإزالة الغطاء من جرة العينة المقابلة وتحقق من وجود أي تلميذ متصل على الغطاء. باستخدام زجاجة بخاخ من الإيثانول ، اشطف المحتويات برفق من الغطاء في طبق بتري.

ثم قم بإزالة الملصق من داخل جرة العينة. اشطف محتويات الملصق برفق في طبق بتري أيضا ، واترك الملصق جانبا. ثم انقل محتويات جرة العينة إلى صينية يرقات بيضاء واشطف البرطمان بالإيثانول للتأكد من عدم وجود إفرازات حدقة العين في البرطمان.

انقل بليغة من بقايا إفرازات التلميذ والإيثانول من صينية اليرقات إلى طبق بتري. تأكد من تغطية العينة بالإيثانول. ثم ضع طبق بتري تحت مجهر استريو وقم بمسح الطبق بشكل منهجي بحثا عن الكائنات الحية.

بعد ذلك ، استخدم الملقط لنقل إفرازات التلميذ من الطبق إلى القارورة المقابلة المناسبة. حاول تجنب التقاط إفرازات حدقة العين المكسورة أو المجففة لتجنب مشاكل التعرف لاحقا. عندما يتم نقل كل إفرازات حدقة العين المرئية ، قم بتدوير الطبق ومسحه ضوئيا ثلاث مرات أخرى بحثا عن أي عينات إضافية ، بما في ذلك أي عينات يمكن أن تكون عالقة على جوانب الطبق.

عندما يتم اختيار 300 تلميذ exe ، أعد البقايا من طبق بتري إلى صينية اليرقات واشطف طبق بتري بالإيثانول. ثم انقل البقايا من صينية اليرقات إلى جرة العينة الفارغة. أضف ملصق التاريخ والموقع إلى البرطمان وضع الغطاء فوق البرطمان لفرز العينات.

صب مخرج التلميذ من القارورة المسمى في طبق بتري مليء بما يكفي من الإيثانول لتغطية العينات فقط. بعد ذلك ، تحت مجهر ستيريو ، استخدم الخصائص المورفولوجية الخارجية ل Chiron Pub ex لفصل العينات إلى محور الشكل ، ونقل الشكل المختلف Axa إلى قوارير مصنفة بشكل منفصل. تستخدم الأرباع الثلاثة الممتلئة بالإيثانول أو مثال عند التصنيف بواسطة Celi thax الاختلافات في وجود القرن الصدري وحجمه وشكله وتلوينه لتمييز العينات.

في حالة التصنيف حسب البطن ، استخدم العمود الفقري والشعر والنتوءات في أجزاء البطن والفص الشرجي لفصل المورفيس. بعد الفرز ، املأ بئرا واحدا من صفيحة متعددة الآبار لكل محور عصبي بإيثانول بنسبة 95٪ وضع تمثيلات متعددة لكل تصنيف مورفو في آبار فردية من اللوحة لمدة 10 دقائق على الأقل للسماح بالجفاف الكافي. ثم أثناء جفاف العينات ، قم بتسمية الشرائح بجمع الموقع المناسب ومعلومات التعريف لتركيب مخرج الأشخاص.

قم بلصق قالب من الشريحة على مسرح المجهر وضع شريحة أعلى هذا القالب. ثم انشر قطرة من عنوان URL على الشريحة بحيث تقترب من حجم زلة الغطاء واستخدم الملقط للنقر برفق على ممثل من المحور العصبي الأول على منديل مختبر لإزالة أي إيثانول زائد. الآن قم بتضمين العينة في عنوان URL واستخدم ملقطا مائلا للعمود الفقري ومسبار تشريح لفصل sepha thax عن البطن.

الجانب الوحيد الأكثر صعوبة في هذا الإجراء هو تطوير البراعة اليدوية اللازمة لتشريح ثيكس سيفالون من البطن أثناء تركيب الشريحة. لضمان نجاح التشريح ، استخدم ملقطا رفيعا أو مجسات تشريح لفصل exe بين الثاكس الرأسي والجزء الأول من البطن. كما هو موضح ، قم بتقسيم الثاكس الرأسي على طول خياطة esal.

ثم افتح الثاكس الرأسي بحيث تكون حواف الخيط على جانبين متقابلين ، وقم بتوجيهه بحيث يكون الجانب البطني متباعا. ضع الجانب الظهري للبطن لأعلى وضعه مباشرة أسفل سيفا ثاكس. ثم أمسك زلة غطاء بزاوية ببوصة واحدة تلامس الشريحة ببطء لأسفل وإسقط الغطاء لتقليل تكوين فقاعة الهواء.

أخيرا ، اضغط برفق على زلة الغطاء لتسطيح العينة واستخدم مجهرا مركبا لتحديد جنس العينة المثبتة على الشريحة في هذه الرسوم البيانية ، يتم عرض منحنيات التراكم التصنيفي لعينات التلميذ السابقة التي تم جمعها من 16 بحيرة حضرية في مينيسوتا لتحديد عدد الأنواع بشكل عام داخل كل بحيرة. يمثل كل خط بيانات إحدى البحيرات ، وتمثل كل نقطة بيانات عينة شهرية تم جمعها من أبريل إلى أكتوبر 2005 ، مما يدل على أن الحصول على أربع عينات لكل بحيرة استعاد غالبية مجتمع Chiron واكتشف أي اختلافات موسمية مهمة داخل البحيرات. يمكن استخدام دراسات المراقبة طويلة المدى للكيرون لتقييم تغير المناخ في البحيرات في جميع أنحاء مينيسوتا حيث يمكن أن تؤثر التغيرات في المتغيرات البيئية مثل عمق البحيرة وتركيز الفوسفور على الأنواع التراكمية المكتشفة عبر تدرج كيمياء البحيرة.

في الواقع ، كما يوضح هذا الرسم البياني ، يزداد العدد التراكمي للأنواع التي تمت مواجهتها مع زيادة نسبة متوسط تركيز الفوسفور إلى العمق المتوسط. تتمثل الخطوة الأكثر أهمية لنجاح جمع إفرازات التلاميذ في تحديد المناطق ذات التراكم العالي للإفرازات داخل منطقة الدراسة. أثناء بدء العينات في المختبر ، من المهم مسح محتويات طبق بتري ببطء حيث يمكن أن تكون بعض العينات مصطبغة قليلا وتلتصق بحجم الطبق.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية جمع ومعالجة عينات التلميذ العائمة السطحية للمشاريع التي تهدف إلى مراقبة جودة المياه وتقييمها.