Name: قسطرة القلب في الفئران لقياس العلاقة حجم الضغط: دراسة تأثير بوديتش (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-14T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 38 s
Description: تعلم قياس انقباضية القلب في الجسم الحي عند معدلات نبض مختلفة باستخدام قسطرة البطين الأيسر في الفئران. تحليل حلقات الضغط والحجم يكشف تأثير معدل النبض على وظيفة القلب.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

تم دعم هذه الدراسة من قبل منح المعاهد الوطنية للصحة HL091986 (JPD) و HL094692 (MTZ).

ملاحظة: تمت الموافقة على هذا البروتوكول الحيوان من قبل اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) في جامعة ولاية أوهايو. ويمكن استخدام هذا الإجراء على أي فأر فيها القطر الداخلي للشريان السباتي كبيرة بما فيه الكفاية لادخال القسطرة. استخدام الفئران التي هي فوق 16 غرام (أقدم من ~ 2 أشهر). 1. إعداد ماوس لقسطرة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اغلاق جميع الأدوات الجراحية في الحقيبة التعقيم. تعقيم الحقيبة في جهاز التعقيم. الحفاظ على مجال معقم طوال الإجراء وارتداء القفازات المعقمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران مع الكيتامين (55 ملغ / كلغ) زائد زيلازين (15 ملغ / كلغ) عن طريق الحقن داخل الصفاق. ملاحظة: الإجراء بأكمله قياس كل من ضغط / الحجم في معدل ضربات القلب المختلفة وESPRV يستغرق أقل من 20 دقيقة. إذا لزم وقت إضافي (أي أكثر من 30 دقيقة)، وإعطاء إضافية ¼ جرعة التخدير كل 30 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الشعر في ص الأماميegion من الرقبة ومنطقة الصدر باستخدام إزالة الشعر محلول (على سبيل المثال، ناير) والشريط أطرافه من الفأرة على منصة رغوة. تأكيد حالة التخدير العميق باستخدام قرصة أخمص قدميه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج التحقيق المستقيم لمراقبة درجة حرارة الجسم (37 ± 1 ° C)، والحفاظ على استخدام وسادة التدفئة التنظيم الحراري (الموجود بين ثنى الجراحية ومنصة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد طول خياطة 4-0 (~ 10 سم). حلقة خياطة في جميع أنحاء القواطع العلوية والشريط إلى المنصة. هذا وسوف تبقي على التوالي الرقبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعقيم المنطقة الجراحية عن طريق المسح المنطقة مع Betadine و 75٪ كحول ثلاث مرات. </li></ol> 2. قسطرة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد القسطرة التي كتبها PRESOAKING طرف في المياه المالحة أو الماء المقطر (37 درجة مئوية) لمدة 30 دقيقة على الأقل قبل استخدامها (وفقا لتعليمات الشركة الصانعة) حتى يتأقلم الحجاب الحاجز استشعار الضغط من أجل البيئة البيولوجية رطبة ومنع الضغط الانجراف إشارة والسلبية التسجيلات الضغط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل طولي 0.8 سم شق بين الفك السفلي والقص في المنطقة الأمامية من الرقبة. مع مقص غرامة، فصل النسيج الضام الجلد العضلات لفضح القصبة الهوائية يقع تحت العضلات stemohyoideus. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فصل الدهون والأنسجة العضلية في الجانب الأيمن من القصبة الهوائية مع ملقط المنحنية لفضح الشريان السباتي الأيمن. ملاحظة: الشريان السباتي هو أكبر شريان في المنطقة الأمامية من الرقبة، ويحتوي دم أحمر، وغير نابض. لا تخلط مع حبل الوريد الذي يعمل بالتوازي مع الشريان السباتي. الوريد الوداجي هو الأحمر الداكن وغير نابض. بالإضافة إلى ذلك، خلال عزل الشريان السباتي، يجب أن يكون المستخدم على علم لا يضر العصب الرئوي المعدي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة الدهون من الحق في الشريان السباتي مع ملقط منحنية. في حال وجود المتفرعة من السفينة التي سوف تعيق هذه التقنية التشغيلية، وقطع لهم الكي Bovie لفصل الشريان السباتي.فصل أكبر قدر من الأنسجة ممكن تحت الشريان السباتي باستخدام ملقط منحنية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع اثنين 5 سم 6-0 خيوط الحرير. تمرير كل خيط الحرير تحت الشريان السباتي الأيمن. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> موقف موضوع واحد بالقرب من الجزء القريب والآخر بالقرب من الجزء الأعلى من الشريان. جعل عقدة ضيقة على موضوع في الجزء القاصي، وجعل عقدة فضفاضة على موضوع في الجزء القريب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> منع تدفق الدم عن طريق تضييق الجزء القريب من الشريان باستخدام مرقئ صغير المشبك الأوعية الدموية (وضع المشبك تحت موضوع الداني). وسيتم ملء المنطقة مختومة من الشريان مع جعل الدم من السهل تنفيذ الخطوة 2.8. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ثقب ثقب صغير في الشريان السباتي الأيمن بين المواضيع اثنين (ولكن أقرب إلى موضوع البعيد) مع إبرة 26 G. إدراج قسطرة في الشريان السباتي. تشديد قليلا من عقدة فضفاضة في الجزء القريب من الشريان السباتي على القسطرة أن نضع في المكان. ملاحظة: استخدام ثقب إبرة يفضل مقارنةلمقص شق. بجعل عقدة ضيقة في الجزء الأعلى من الشريان أولا، ثم تحامل على الجزء القريب، سوف تملأ الشريان تماما مع الدم. هذا يجعل من السهل جدا لكزة من خلال الأوعية الدموية. وعلاوة على ذلك، فإن حجم الإبرة (26 G) يثقب الشريان مع وجود ثقب الذي يناسب بشكل رائع حجم القسطرة. عند استخدام الأسلوب مقص شق، كان من الصعب التحكم في حجم الشق. ومع ذلك، ينبغي أن تكون الطريقة المختارة تعتمد على على أي واحد الجراح يشعر أكثر ارتياحا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء تسجيل إشارات الضغط كما في الخطوة 3. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخفيف المشبك مرقئ ومواصلة إدخال قسطرة إلى الأمام إلى البطين الأيسر. إذا شهدت بعض المقاومة عندما دفع القسطرة، وسحب بلطف الى الوراء ومحاولة النهوض مرة أخرى. للماوس وزنها ~ 18-25 غرام، وطول المقدرة القسطرة التي يتم إدراجها هو 18 ملم. ملاحظة: سوف إشارة ضغط الدم تتقلب 70-120 ملم زئبق. مرة واحدة رانه القسطرة في البطين الأيسر على شكل تغيرات إشارة الضغط والضغط تتقلب 0-120 ملم زئبق (كما هو موضح في الشكل رقم 1). وظيفة القلب تستقر داخل 2-3 دقيقة بعد إدخال القسطرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> رصد مستمر درجة حرارة الجسم، ومستوى التخدير، ومعدل التنفس. </li></ol> 3. الحصول على البيانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام LabChartPro 7 برامج (أو برامج مماثلة). استخدام خيار العمل من LabChart وحدة PV حلقة. باستخدام هذه الوحدة، حدد الإعداد الافتراضي الضغط والحلقات وحدة التخزين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انشاء ثلاث قنوات: قناة واحدة للضغط، قناة واحدة للحجم، وقناة واحدة لمعدل ضربات القلب. تعيين نطاقات نطاق المعلمات أعلاه كما 0-150 ملم زئبق، 0-100 ميكرولتر و0-800 فوز / دقيقة، على التوالي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اضغط على مفتاح البدء في تسجيل. </li></ol> 4. تأثير بوديتش <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل شق 1 سم في منطقة البرك بالتوازي مع المقبض. قطع طبقة من العضلات وإكسببيئة نظام التشغيل الفضاء وربي باستخدام المقص. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> باستخدام نبض مشجعا مربع، تعيين المعلمات التالية: الجهد من 2 V، ومدة 2 مللي ثانية، وتمكين وضع التكرار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عقد القطب السالب مع ملقط وأدخله من خلال الفضاء وربي الرابع إلى المنطقة القمية للقلب. عقد القطب الموجب مع ملقط وأدخله من خلال الفضاء وربي الثاني للمنطقة الأذين الأيمن من القلب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدوره على التحفيز والتشجيع وتغيير وتيرة وتيرة القلب من 4 هرتز (240 نبضة / دقيقة) تصل إلى 10 هرتز (600 نبضة / دقيقة). في كل دقات القلب الجديد، وتحفيز القلب لمدة 1 دقيقة قبل جمع البيانات. </li></ol> 5. توليد ESPVR وPRSW <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع أنسجة الجلد والعضلات عمودي على المقبض في منطقة البطن مع مقص. فتح enterocoelia وفضح الكبد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اسحب أضلاع القوس نحو الرأس باستخدام الجر المعدني. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> دفع بلطف الكبد أسفل معمسحة القطن. يجب الحرص على عدم دفع أكثر من اللازم لتؤثر على تجويف الصدر. سيؤدي ذلك إلى تغيير وظيفة القلب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع في الرباط المنجلي للكبد مع مقص لفضح فوق الكبد الوريد الأجوف السفلي (IVC). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام ملقط منحنية للضغط بسرعة IVC لمدة 5 ثانية لمنع عودة الدم إلى الأذين الأيمن. وضغط البطين الأيسر وحجم تنخفض بسبب انخفاض تدفق إلى القلب. في توليد هذه القيم، لا تستخدم الحلقات أقل من 60 ملم زئبق. 60 ملم زئبق في إشارة إلى الضغط الانقباضي. ملاحظة: يتم تعيين هذه القيمة عند 60 ملم زئبق لأن هذا سوف يؤدي إلى انخفاض كبير في ضغط التروية للتقليل إلى حد كبير التروية التاجية وتؤثر على انقباض. </li></ol> معايرة 6. حجم <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يعالج بالهيبارين الفأر مع 0.1 مل من 1: 5000 حل الهيبارين (مخفف بمحلول ملحي عادي) عن طريق الحقن داخل الصفاق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة القسطرة من الشريان السباتي. عندما يتم سحب القسطرة من الابام الشريان السباتي، والدم heparinized تتسرب من الحفرة حيث تم إدراج القسطرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جمع هذا الدم لمعايرة الصوت باستخدام حقنة 1 مل. ملء كل بئر في معايرة كفيت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة القلب إلى الموت ببطء الماوس عن طريق استنزاف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع القسطرة في كل بئر والحصول على وحدة الحجم النسبي (RVU) قيمة ثابتة. إنشاء منحنى قياسي باستخدام مختلف وحدات التخزين القياسية والقيم RVU من كل بئر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحويل RVU المسجلة ميكرولتر. </li></ol> 7. معالجة البيانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لدراسة تأثير بوديتش، حدد الحالة المستقرة آثار الضغط / حجم من كل معدل ضربات القلب. انقر التحليل الأساسي للحصول على البيانات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للبيانات ESPVR وPRSW، حدد أول ~ آثار الضغط 15 / وحدة التخزين، انقر فوق تحليل انسداد في برنامج لتوليد ESPVR (المنحدر من الضغوط التي وضعتها LV في نهاية الانبساط الحجم) وPRSW (الانحدار الخطي للعمل السكتة الدماغية مع نهاية الانبساطيالحجم) المنحدرات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إيلاء الاهتمام لشكل حلقات. تأكد من إغلاق حلقة مع أي نقطة الزاوي أو التقلبات. هذا هو علامة من غير اللائق وضع القسطرة أو الضوضاء الزائدة. فحص دوري الحلقات خلال التجربة لضمان تتولد ضغط البيانات وحجم المناسبة. </li></ol>

<ol><li>Janssen, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+contraction-relaxation+coupling%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Myocardial contraction-relaxation coupling.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 299, H1741-H1749 (2010).</li>
<li>Roman, M. J., Devereux, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+noninvasive+measures+of+contractility+in+dilated+cardiomyopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Echocardiography%22%5BJournal%5D)">Comparison of noninvasive measures of contractility in dilated cardiomyopathy.</a> Echocardiography. 8, 139-150 (1991).</li>
<li>Hamlin, R. L., del Rio, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((dP%2Fdt%28max%29--a+measure+of+%27baroinometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Toxicol+Methods%22%5BJournal%5D)">dP/dt(max)--a measure of 'baroinometry.</a> J Pharmacol Toxicol Methods. 66, 63-65 (2012).</li>
<li>Feneley, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+preload+recruitable+stroke+work%2C+end-systolic+pressure-volume+and+dP%2Fdtmax-end-diastolic+volume+relations+as+indexes+of+left+ventricular+contractile+performance+in+patients+undergoing+routine+cardiac+catheterization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of preload recruitable stroke work, end-systolic pressure-volume and dP/dtmax-end-diastolic volume relations as indexes of left ventricular contractile performance in patients undergoing routine cardiac catheterization.</a> J Am Coll Cardiol. 19, 1522-1530 (1992).</li>
<li>Kass, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+influence+of+load+versus+inotropic+states+on+indexes+of+ventricular+contractility%3A+experimental+and+theoretical+analysis+based+on+pressure-volume+relationships%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Comparative influence of load versus inotropic states on indexes of ventricular contractility: experimental and theoretical analysis based on pressure-volume relationships.</a> Circulation. 76, 1422-1436 (1987).</li>
<li>Nemoto, S., DeFreitas, G., Mann, D. L., Carabello, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+changes+in+left+ventricular+contractility+on+indexes+of+contractility+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Effects of changes in left ventricular contractility on indexes of contractility in mice.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 283, H2504-H2510 (2002).</li>
<li>Ziolo, M. T., Kohr, M. J., Wang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+signaling+and+the+regulation+of+myocardial+function%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide signaling and the regulation of myocardial function.</a> J Mol Cell Cardiol. 45, 625-632 (2008).</li>
<li>Barouch, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nitric+oxide+regulates+the+heart+by+spatial+confinement+of+nitric+oxide+synthase+isoforms%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Nitric oxide regulates the heart by spatial confinement of nitric oxide synthase isoforms.</a> Nature. 416, 337-339 (2002).</li>
<li>Wang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+nitric+oxide+synthase+signaling+within+cardiac+myocytes+targets+phospholamban%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Neuronal nitric oxide synthase signaling within cardiac myocytes targets phospholamban.</a> Am J Physiol Cell Physiol. 294, C1566-C1575 (2008).</li>
<li>Georgakopoulos, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+murine+left+ventricular+pressure-volume+relations+by+miniaturized+conductance+micromanometry%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">In vivo murine left ventricular pressure-volume relations by miniaturized conductance micromanometry.</a> Am J Physiol. 274, H1416-H1422 (1998).</li>
</ol>

لا توجد مصالح مالية متنافسة.

A خطوة حاسمة لهذه التقنية للحصول على قياس موثوق للانقباض هو وضع القسطرة السليم في LV. إذا لم يتم وضع القسطرة بشكل صحيح، عندما عقود LV الجدران قد اتصل القسطرة مما أدى إلى ارتفاع قيم جدا، وليس الفسيولوجية، مما تسبب في ضغط الحلقات PV شكل غير منتظم. إذا لزم الأمر، القسطرة يمكن أن تكون استدارة لتحقيق موضع الصحيح. خطوة رئيسية أخرى لهذا الأسلوب هو للتأكد من استلام الماوس التخدير المناسب. إذا كان الماوس فوق تخدير، وهذا سيقلل إلى حد كبير وظيفة القلب. فأر مع معدل ضربات القلب أقل من ~ 250 نب...

الغرض من القلب على ضخ الدم في جميع أنحاء الجسم لتلبية مطالب الأيضية للكائن الحي. منذ هذه المطالب تتقلب باستمرار (على سبيل المثال، أثناء ممارسة الرياضة)، يجب قلب التكيف (أي زيادة النتاج القلبي). وقد ابتكر قلب العديد من مسارات لتحقيق هذا الانجاز. الطريقة الرئيسية قلب يحقق ذلك هو عن طريق زيادة في معدل ضربات القلب (أي تأثير بوديتش) 1. وهذا هو، كما يزيد من معدل ضربات القلب واحد، وهذا يؤدي إلى زيادة في انقباض وزيادة النتاج القلبي. وهكذا، وظيفة القلب تعتمد جدا على معدل ضربات القلب. للأسف، وأمراض القلب (على سبيل المثال، واحتشاء عضلة القلب، وتضخم، الخ) النتائج الفقيرة في وظيفة القلب الذي قلب بالتالي لن تكون قادرة على تلبية متطلبات التمثيل الغذائي في الجسم. أمراض القلب هي السبب الرئيسي للمراضة والوفيات في المجتمع الغربي. نماذج حيوانية أن ألخص العديد من cardiomy البشريوتستخدم opathies للتحقيق في الآليات الجزيئية واختبار العلاجات المحتملة. لتمييز هذه الآليات وتحديد ما إذا كان العلاج قد تكون قابلة للحياة، يجب أن المحققين تقييم وظيفة القلب في الجسم الحي. هناك عدة طرق لتقييم وظيفة القلب في الجسم الحي (على سبيل المثال، تخطيط صدى القلب، التصوير بالرنين المغناطيسي، وما إلى ذلك)، التي تقيس بشكل روتيني الكسر القذفي، تقصير كسور، النتاج القلبي، وما إلى ذلك، هذه المعايير تعتمد اعتمادا كبيرا على بعد التحميل، التحميل المسبق، ومعدل ضربات القلب بالإضافة إلى انقباض 2. قياس انقباض أمر لا غنى عنه لفهم الخصائص الجوهرية للقلب في بيئتها الأصلية. الحد الأقصى (DP / دينارا كحد أقصى) معدل التنمية الضغط ينقلنا خطوة أقرب لفهم انقباض. للأسف، DP / دينارا هو أيضا يعتمد على معدل ضربات القلب وتحميل ظروف +3. لذا فقد تم تطوير تقنيات لقياس حمولة (ومعدل ضربات القلب، انظر بيلآه) مؤشرات مستقلة من انقباض عضلة القلب (أي نهاية الانقباضي العلاقة حجم الضغط (ESPVR) والتحميل المسبق recruitable عمل السكتة الدماغية (PRSW)) 4-6. يصف ESPVR الضغط القصوى التي يمكن تطويرها من قبل البطين في أي حجم LV معينة. المنحدر من ESPVR يمثل مرانية نهاية الانقباضي (إي إي إس). PRSW هو الانحدار الخطي للعمل السكتة الدماغية (منطقة محاطة حلقة PV) مع حجم نهاية الانبساط. هذه الإجراءات هي قياس أكثر دقة ودقيق لانقباض مقارنة المعلمات الدورة الدموية مثل جزء طرد، خرج القلب، وحجم المخ. ESPVR وPRSW يمكن الحصول عليها عن طريق حجب مؤقت من الوريد الأجوف السفلي (IVC). منع IVC لا يمكن أن يؤديها مع الصدر مغلقة لتجنب تأثير تغيير الضغط داخل الجنبة على وظيفة القلب. يعزز زيادة معدل ضربات القلب أيضا التقلص والاسترخاء 1. وهكذا، عند المقارنة بين وظائف القلب بين experimentaمجموعة ل (على سبيل المثال، ± موانئ دبي / دينارا)، تحتاج معدل ضربات القلب لتكون مشابهة. ومع ذلك، وعادة لا يحدث معدل ضربات القلب مماثلة في كل حيوان بسبب ظروف مختلفة (المرض، والتدخل البحوث، وغيرها). تجدر الإشارة إلى أن التخدير (حقن واستنشاق) يخفض معدل ضربات القلب. كما معدل ضربات القلب هو المحدد الرئيسي للانقباض، والتخدير يؤثر بشكل كبير انقباض. لهذا السبب، نحن تصف الإجراء لدينا. بالإضافة إلى ذلك، وهي السمة المميزة للعديد من اعتلال عضلة القلب هو الاحتياطي انخفض مقلص (أي تأثير بوديتش انخفضت). ولذلك، ينبغي قياس وظيفة القلب خلال مجموعة من معدل ضربات القلب. نحن هنا تصف كيفية استخدام مشجعا (مع الصدر مغلقة) لتحقيق هذه الآثار. بالإضافة إلى معدل ضربات القلب، وأكسيد النيتريك (NO) هو أيضا المغير هاما من انقباض 7. ويتم إنتاج NO NO عبر الانزيمات تسمى سينسيز (NOS). نحن وغيرنا قد أظهرت أن الفئران مع خروج المغلوب من الخلايا العصبية NOS (NOS1 <sتصل&gt; - / -) قد قلل الانكماش العضلية في الجسم الحي وديناميكا الدم القلب 8،9. وسيتم استخدام هذه الفأرة للتدليل على قياس الأيسر انقباض البطين عن طريق إجراء تحليل الضغط LV / حجم أجريت في معدل ضربات القلب المختلفة.

<table><tbody><tr><td>Xlyzine 100&nbsp; ملغ/مل</td><td>آنا سيد</td><td>4821</td><td></td></tr><tr><td>كاتامين 50&nbsp; ملغ / مل</td><td>Ketalar</td><td>310006</td><td></td></tr><tr><td>الهيبارين</td><td>APP المستحضرات الصيدلانية</td><td>6003922</td><td></td></tr><tr><td>4-0 خيوط الحرير</td><td>التخصصات الجراحية</td><td>SP102</td><td></td></tr><tr><td>6-0 خيط الحرير</td><td>التخصصات الجراحية</td><td>MBKF270</td><td></td></tr><tr><td>ملقط</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>11251-10</td><td></td></tr><tr><td>ملقط منحنى</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>11274-20</td><td></td></tr><tr><td>أدوات العلوم الدقيقة المقص</td><td></td><td>14090-09</td><td></td></tr><tr><td>المشبك الوعائي</td><td>أدوات العلوم الدقيقة</td><td>18555-03</td><td></td></tr><tr><td>المجهر</td><td>أدوات الدقة العالمية</td><td>PZM-3</td><td></td></tr><tr><td>قسطرة الضغط</td><td>أدوات ميلار</td><td>SPR-839</td><td></td></tr><tr><td>نظام الضغط</td><td>والحجم أدوات ميلار</td><td>MPVS-300</td><td></td></tr><tr><td>PowerLab4 / 35</td><td>AD instruments</td><td>N12128</td><td></td></tr><tr><td>LabchartPro 7</td><td>AD الأدوات</td><td></td><td></td></tr><tr><td>التحكم في درجة الحرارة</td><td>CWE</td><td>TC-1000</td><td></td></tr><tr><td>محفز</td><td>العشب</td><td>SD-5</td><td></td></tr><tr><td>قفاز معقم</td><td>مايكرو تاتش</td><td>1305018821</td><td></td></tr><tr><td>مزيل الشعر غسول</td><td>ناير</td><td></td><td></td></tr><tr><td>بيتادين الجراحية</td><td></td> مختبرات <td>NDC البيطرية 6761815401</td><td></td></tr><tr><td>الكحول</td><td>Decon</td><td>2801</td><td></td></tr><tr><td>Bovie cautery</td><td>Bovie</td><td>AA29</td><td></td></tr><tr><td>1&nbsp; مل حقنة (26&nbsp; إبرة G)</td> <td>دينار</td><td>بحريني 8017299</td><td></td></tr></tbody></table>

قسطرة القلب في الفئران لقياس العلاقة حجم الضغط: دراسة تأثير بوديتش

Cardiac Catheterization in Mice to Measure the Pressure Volume Relationship: Investigating the Bowditch Effect

وقد تم إنشاء النماذج الحيوانية التي تحاكي اضطرابات القلب الإنسان لاختبار الاستراتيجيات العلاجية المحتملة. ومن المكونات الرئيسية لتقييم هذه الاستراتيجيات هو دراسة آثارها على وظيفة القلب. هناك العديد من التقنيات لقياس في الجسم الحي الميكانيكا القلب (على سبيل المثال، تخطيط صدى القلب، والعلاقات ضغط / الحجم، الخ). مقارنة ضربات القلب، البطين في الوقت الحقيقي الأيسر (LV) الضغط تحليل / الحجم عن طريق القسطرة هو أكثر دقة والثاقبة في تقييم وظيفة LV. بالإضافة إلى ذلك، يقدم تحليلا LV الضغط / حجم القدرة على تسجيل الفور التغييرات خلال التلاعب من انقباض (على سبيل المثال، التحفيز الأدرينالية β) والشتائم المرضية (مثل نقص التروية / إصابة ضخه). بالإضافة إلى الحد الأقصى (+ موانئ دبي / دينارا) والحد الأدنى (-DP / دينارا) معدل التغير في الضغط في LV، إجراء تقييم دقيق وظيفة LV عبر عدة مؤشرات الحمل المستقلة (على سبيل المثال، الضغط الانقباضي نهايةلا يمكن أن يتحقق علاقة حجم والتحميل المسبق عمل السكتة الدماغية recruitable). معدل ضربات القلب لديه تأثير كبير على LV انقباض بحيث زيادة في معدل ضربات القلب هي الآلية الرئيسية لزيادة النتاج القلبي (أي تأثير بوديتش). وهكذا، عند مقارنة ديناميكا الدم بين المجموعات التجريبية، فإنه من الضروري أن يكون معدل ضربات القلب مماثلة. وعلاوة على ذلك، وهي السمة المميزة للعديد من النماذج اعتلال عضلة القلب هو انخفاض في احتياطي مقلص (أي انخفاض بوديتش المفعول). ونتيجة لذلك، يمكن الحصول على معلومات حيوية عن طريق تحديد الآثار المترتبة على زيادة معدل ضربات القلب على انقباض. وقد أظهرت البيانات المتوفرة لدينا وآخرون أن الخلايا العصبية أكسيد النيتريك سينسيز (NOS1) الماوس خروج المغلوب انخفض انقباض. نحن هنا وصف الإجراء لقياس الضغط LV / الحجم مع زيادة معدل ضربات القلب باستخدام NOS1 نموذج الماوس خروج المغلوب.

ادراج السليم للقسطرة في البطين الأيسر هو خطوة هامة لتحقيق الضغط والحجم القيم المناسبة. هو مبين في الشكل 1، وذلك باستخدام LabChart برو 7، هو تغيير الموجي الضغط (شكل والقيم) ما يذهب القسطرة من الشريان إلى البطين. بعد الإدراج الصحيح للقسطرة في البطين الأيسر، والضغط (P) والحجم (V) القيم التي تم الحصول عليها وبعد ذلك يتم استخدامها لتوليد الحلقات PV (كما هو موضح في الشكل رقم 2). <p...

توضح هذه المقالة قياس وظيفة البطين الأيسر في الفئران عن طريق تحليل الضغط / الحجم بمعدلات ضربات قلب مختلفة.

Animal models that mimic human cardiac disorders have been created to test potential therapeutic strategies. A key component to evaluating these ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو قياس القلوصية القلبية في الجسم الحي عند معدلات ضربات قلب مختلفة. ويتم تحقيق ذلك أولاً من خلال تحضير الفأر للقسطرة، ثم إدخال قسطرة في البطين الأيسر عبر الشريان السباتي.بعد ذلك، يتم توصيل جهاز تحفيز بقلب الفأر ويتم ضبط معدل ضربات القلب عند سرعات مختلفة مع تسجيل البيانات. وأخيراً، يتم جمع الدم من موقع إدخال القسطرة ومعايرة الحجم. وفي النهاية، يُستخدم تحليل حلقة الضغط والحجم لاستقصاء تأثير BO.تتمثل الميزة الرئيسية لهذه التقنية مقارنة بالطرق الحالية مثل تخطيط صدى القلب في أن قياس الضغط والحجم وحجم البطين الأيسر توفر قياسات أكثر دقة وعملية للانقباض، مما يجعلها تقنية أكثر عمقاً في قياس وظائف القلب. بعد تحضير الفأر للقسطرة وفقاً للبروتوكول النصي، يتم إجراء شق طولي بطول 0.8 centimeter في المنطقة الأمامية من الرقبة بين الفك السفلي وعظم القص باستخدام مقص دقيق. ثم يتم فصل الجلد والأنسجة الضامة العضلية للكشف عن الرغامي الموجودة تحت العضلة القصية الترقوية.استخدم بعد ذلك ملاقط منحنية على الجانب الأيمن من الرغامي لفصل الأنسجة الدهنية والعضلية للكشف عن الشريان السباتي الأيمن. تلي ذلك إزالة الدهون من الشريان السباتي. وفي حال وجود تفرعات في الوعاء الدموي، استخدم جهاز كي Bovie لقطع هذه التفرعات وعزل الشريان السباتي.استخدم الملاقط المنحنية لفصل أكبر قدر ممكن من الأنسجة الموجودة أسفل الشريان السباتي. الآن، قم بقص خيطين من الحرير بمقاس 6-0 وطول 5 cm، ومرر كل منهما أسفل موقع الشريان السباتي؛ خيط واحد بالقرب من الجزء القريب والآخر بالقرب من الجزء القاصي من الشريان.اصنع عقدة محكمة في الخيط عند الجزء القاصي وعقدة رخوة في الخيط عند الجزء الداني. وباستخدام ملقط شرياني صغير، قم بإيقاف تدفق الدم عن طريق غلق الجزء الداني من الشريان. سوف تمتلئ المنطقة المسدودة من الشريان بالدم.بعد ذلك، وبواسطة إبرة مقاس 26 gauge، قم بعمل ثقب صغير في الشريان السباتي الأيمن بين الخيطين، ثم أدخل القسطرة في الشريان السباتي. أحكم ربط العقدة الرخوة عند الجزء الداني من الشريان السباتي حول القسطرة برفق لتثبيتها في مكانها. وبناءً على الإرشادات الواردة في البروتوكول النصي، ابدأ بتسجيل إشارات الضغط.بعد ذلك، قم بفك مشبك المرقئ وواصل إدخال القسطرة للأمام باتجاه البطين الأيسر. في حال الشعور بمقاومة، اسحب القسطرة للخلف برفق وحاول دفعها للأمام مرة أخرى. يتم إدخال القسطرة لمسافة 18 مليمتر تقريبًا في فأر يزن ما بين 18 إلى 25 جرام.راقب باستمرار درجة حرارة الجسم، ومستوى التخدير، ومعدل التنفس. لقياس التأثير القلبي، قم بإجراء شق بطول one centimeter في منطقة ما قبل القلب موازياً للمقبض باستخدام المقص. اقطع طبقة العضلات وكشف المسافة الوربية.باستخدام جهاز محاكاة النبضات المربعة، اضبط المعلمات التالية: جهد كهربائي قدره 2 V، ومدة قدرها 2 ms، وفعّل وضع التكرار باستخدام الملاقط. أمسك القطب السالب وأدخله عبر المساحة الوربية الرابعة وصولاً إلى المنطقة القمية من القلب. وباستخدام الملاقط للإمساك بالقطب الموجب، أدخله عبر المساحة الوربية الثانية وصولاً إلى منطقة الأذين الأيمن من القلب.قم بتشغيل المحفز وقم بتغيير التردد لتنظيم ضربات القلب من 4 hertz وصولاً إلى 10 hertz. عند كل معدل ضربات قلب جديد، قم بتحفيز القلب قبل جمع البيانات، وباستخدام المقص، اقطع الجلد وأنسجة العضلات بشكل عمودي على قبضة القص في منطقة البطن. افتح الـ entero CLIA وكشف الكبد باستخدام الشد المعدني.اسحب ملقط التثبيت (acus caster) باتجاه الرأس. الآن، وباستخدام مسحة قطنية، ادفع الكبد برفق نحو الأسفل، مع الحرص على عدم التأثير على التجويف الصدري، لأن ذلك من شأنه أن يغير من وظيفة القلب. استخدم المقص لقطع الرباط المنجلي للكبد للكشف عن الوريد الأجوف السفلي فوق الكبدي (supra hepatic inferior vena cava) أو IVC باستخدام ملقط منحني.اضغط بسرعة على الوريد الأجوف السفلي (IVC) لمدة خمس ثوانٍ لمنع عودة الدم إلى الأذين الأيمن، مما سيؤدي إلى انخفاض ضغط وحجم البطين الأيسر بسبب نقص تدفق الدم إلى القلب. ولمعايرة الحجم عن طريق الحقن داخل الصفاق، يتم إعطاء الفأر 0.1 milliliters من محلول هيبارين بتركيز 1 إلى 5,000. ثم قم بإزالة القسطرة من الشريان السباتي.سيبدأ الدم المعالج بالهيبارين في التسرب من الفتحة التي أُدخل منها القسطرة. وباستخدام محقنة سعة 1 mL، قم بجمع هذا الدم لمعايرة الحجم. املأ كل بئر في وعاء المعايرة.بعد القتل الرحيم للفأر وفقاً للبروتوكول النصي، قم بوضع القسطرة والحصول على وحدة حجم نسبية ثابتة أو قيمة RVU. استخدم الأحجام القياسية المختلفة وقيم RVU من كل بئر لإنشاء منحنى قياسي. وكما هو موضح في هذا الشكل، يتغير شكل وقيمة موجة الضغط أثناء انتقال القسطرة المُدخلة من الشريان إلى البطين.بعد إدخال القسطرة بشكل صحيح في البطين الأيسر، تُستخدم الضغوط p والأحجام V التي يتم الحصول عليها لتوليد حلقات PV كما هو موضح هنا؛ وباستخدام قيم الضغط، يمكن استقصاء الآليات التي تغير من القدرة التقلصية. في هذا المثال، أدى زيادة معدل ضربات القلب من 300 إلى 600 نبضة في الدقيقة إلى زيادة ضغط LV من 80 إلى 100 millimeters of mercury، بينما انخفضت أحجام LV الانبساطية والانقباضية. يوضح هذا الشكل اعتماد المعدلات القصوى والدنيا لتغير الضغط DPDT على معدل ضربات القلب في الفئران WT والفئران OS one knockout؛ حيث تُظهر فئران OS one انخفاضاً في المعدلات القصوى والدنيا لتغير الضغط مقارنة بالفئران من النوع البري.وبناءً على ذلك، يؤدي تعطيل جين NOS one إلى انخفاض في تأثير boat. وأخيرًا، كما هو موضح هنا، يتم تحليل القدرة التقلصية المستقلة عن الحمل باستخدام القيم المحسوبة لـ N systolic ELASTINS و PRSW في الفئران من نوع WT والفئران التي تعاني من تعطيل جين OS one. وتشير هذه البيانات إلى أن الفئران التي تعاني من تعطيل جين NOS one لديها قدرة تقلصية منخفضة مقارنة بفئران WT.بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك الآن فهم جيد لكيفية إجراء قياسات دقيقة لانقباضية القلب في الجسم الحي (in vivo)، وبالتالي تقييم وظيفة القلب عند معدلات ضربات قلب مختلفة.

cardiac-catheterization-mice-to-measure-pressure-volume-relationship

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

8 القناة CODA السامية المناولة ضغط الدم غير الغازية نظام يقيس ضغط الدم في ما يصل إلى 8 الفئران او الجرذان في وقت واحد. هذا النظام يستخدم الذيل الكفة تسجيل حجم الضغط (VPR) لقياس ضغط الدم عن طريق تحديد حجم الدم الذيل.

قياس ضغط الدم في الفئران باستخدام تسجيل حجم الضغط ، وهو أسلوب الذيل الكفة

توفر هذه المقالة بروتوكول لتقييم تخطيط صدى القلب من البطين الأيمن حجم وارتفاع ضغط الدم الرئوي في الفئران. وتشمل التطبيقات تحديد النمط الظاهري وتقييم المسلسل في المعدلة وراثيا ونماذج الماوس التي يسببها السم من اعتلال عضلة القلب وأمراض الأوعية الدموية الرئوية.

تقييم تخطيط صدى القلب من القلب الحق في الفئران

قصور القلب هو السبب الرئيسي للدخول إلى المستشفى وسبب رئيسي للوفاة. يتم تطبيق نموذج للربط الدائم للشريان التاجي الأمامي الأيسر الهابط في الفئران للتحقيق في إعادة تشكيل البطين والخلل الوظيفي في القلب بعد احتشاء عضلة القلب. يتم تقديم تقنية قياسات ديناميكا الدم الغازية في الفئران.

ربط دائم في الشريان التاجي الأيسر الأمامي تنازلي في الفئران: نموذج ما بعد إعادة تشكيل عضلة القلب احتشاء وقصور القلب

تحليل حلقة ضغط القلب وحجمه هو الطريقة الأكثر شمولا لقياس وظائف القلب في القلب السليم. نصف تقنية لأداء وتحليل حلقات حجم ضغط القلب ، باستخدام قسطرة التوصيل.

القلب حجم الضغط تحليل حلقة عن طريق القسطرة المواصلة في الفئران

توضح هذه المخطوطة بروتوكول مفصلة لجمع البيانات حجم الضغط من الماوس.

قياس حجم حلقات الضغط في الماوس

هنا ، نقدم بروتوكولا لاجراء تقييم الدموية الغازية من البطين الأيمن والشريان الرئوي في الفئران باستخدام نهج جراحه الصدر المفتوح.

تقييم الأورام الدموية الغازية لنظام البطين الأيمن وفرط ضغط الدم الرئوي الناجم عن نقص الأكسجين في الفئران

يظهر هنا بروتوكول لتقييم وظيفة القلب ثنائي البطينين في الفئران عن طريق توليد حلقات حجم الضغط (PV) من البطين الأيمن والأيسر في نفس الحيوان باستخدام قسطرة الصدر المغلقة. ينصب التركيز على الجانب التقني للجراحة والحصول على البيانات.

تقييم البطينين لوظيفة القلب وحلقات حجم الضغط عن طريق قسطرة الصدر المغلقة في الفئران

هنا نصف تحليل حلقة ضغط القلب الحجم تحت جرعات متزايدة من الايسوبروترينول غرست عن طريق الوريد لتحديد وظيفة القلب الجوهرية واحتياطيات β الأدرينالية في الفئران. نحن نستخدم نهج تعديل الصدر المفتوح لقياسات حلقة حجم الضغط ، والتي تشمل التهوية مع ضغط نهاية منتهية الصلاحية الإيجابية.

استجابة القلب لتحفيز β الأدرينالية التي يحددها تحليل حلقة حجم الضغط

يصف البروتوكول الحالي الحصول على علاقة الضغط والحجم من خلال تنظيم السرعة عبر المريء ، والذي يعمل كأداة قيمة في تقييم الوظيفة الانبساطية في نماذج الفئران لفشل القلب.

إجراء يتم التحكم فيه بالسرعة لتقييم الوظائف الانبساطية المعتمدة على معدل ضربات القلب في نماذج قصور القلب في الفئران

يصف هذا البروتوكول طريقة لقياس ضغط البطين الأيسر وحجمه باستخدام تقنية توصيل حجم الضغط. تتيح هذه الطريقة المراقبة المستمرة في الوقت الفعلي لآثار الأدوية على القلب.

الكشف في الوقت الحقيقي عن تأثيرات حمض الفيروليك على البطين الأيسر للفئران باستخدام قسطرة توصيل حجم الضغط

تعلم قياس انقباضية القلب في الجسم الحي عند معدلات نبض مختلفة باستخدام قسطرة البطين الأيسر في الفئران. تحليل حلقات الضغط والحجم يكشف تأثير معدل النبض على وظيفة القلب.

قسطرة القلب في الفئران لقياس العلاقة حجم الضغط: دراسة تأثير بوديتش

استكشف المزيد من الفيديوهات