Name: الصباغة الحشرات لفحوصات السلوكية: في سلوك التزاوج من تخدير ذبابة الفاكهة (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-22T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: تعلم طريقة تلوين الحشرات بالأصباغ الغذائية لتحديدها في تجارب السلوك دون إيذائها، باستخدام ذباب الفاكهة Drosophila. هذه التقنية البسيطة تتيح متابعة الفردان بسهولة أثناء دراسات التزاوج والسلوك.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

ونود أن نشكر أليكس هيتشن وميج بوث لمساعدتهم في محاكمات التزاوج. وأيد هذا العمل من قبل NE منحة NERC / H015604 / 1 إلى TP.

1. إعداد يطير الغذاء مع تلوين الطعام <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتخاذ ذبابة الفاكهة قارورة القياسية مع ما يقرب من 20 مل من الطعام في القاع (الشكل 1). استخدام الوصفة التالية لمزيج الطعام باستخدام 1 L من الماء المغلي: 10 غرام من أجار، 85 غرام من سكر العنب، و 60 غراما من دقيق الذرة و 40 غرام من الخميرة، ويقلب لمدة 5 دقائق من يجيش. إضافة 25 مل من 10٪ nipagen بمجرد أن يبرد الخليط إلى 75 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد الطعام قد بردت وطدت إضافة قطرتين (حوالي 0،5-1 مل) من الأزرق تلوين الطعام إلى الجزء العلوي من المواد الغذائية وتنتشر فوق سطح الأرض كله من القارورة (الشكل 1). استخدام صبغة لون مختلف إذا المفضل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ترك الطعام لمدة يومين في الثلاجة بحيث يتم امتصاص الصبغة من قبل الطبقة العليا من الغذاء؛ هذا يتجنب الرطوبة الزائدة الإضرار الذباب خلال فترة النضج. إضافة قطعة صغيرة من المناديل الورقية إذا الرطوبة الزائدة لا يزال يمثل مشكلة لطخة تصل الرطوبة الزائدة وثم في وقت لاحقأزلها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الذباب على الطعام إما بشكل فردي أو في مجموعات. ملاحظة: سوف الذباب كسب تلطيخ الأمعاء في حدود 1 يوم التي توضع على الطعام. بدلا من ذلك، تنضج تماما الذباب على الطعام مصبوغ قبل التجربة (ارتفاع معدلات الوفيات خلال فترة النضج لم يكن لوحظ من التعرض للصبغة الطعام). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأكد من أن الذباب مصبوغ يمكن تمييزها بسهولة من الذباب غير مصبوغ. إذا كانوا لا يمكن تمييزها، كرر الخطوات من 1،1-1،4 باستخدام إما على تركيز أعلى من الصبغة، أو صبغة مختلفة. </li></ol> 2. اثنان المحاكمات التزاوج ذكر عن طريق الغذاء تلوين <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لإنتاج ذرية، وإعداد قارورة تحتوي على عدة أزواج من الذباب الإناث والذكور (مجموعات صغيرة من الذكور والإناث هي أيضا مناسبة، على الرغم من أن تحرص على تجنب الازدحام اليرقات). السماح للإناث لوضع البيض ونقل الذباب إلى قارورة جديدة كل 5-7 أيام. متجر قارورة في درجة حرارة مناسبة لنوع من الفائدة (22 ° C وأو D. pseudoobscura وD. subobscura و 25 درجة مئوية لمدة D. البطن). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل جمع الذباب التجريبية إزالة كافة الذباب من قارورة جمع في الوقت المحدد قبل جمع الذكور والإناث لضمان أنها ستكون العذارى (D. البطن - 6 ساعة عند 25 ° C، D. pseudoobscura - 18 ساعة عند 22 ° C، و D. subobscura - 24 ساعة عند 22 ° C). ملاحظة: إذا كان الذباب ليست عذراء هذه الإرادة التحيز سلوكهم في محاكمات التزاوج 15. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخزين والذكور ناضجة بشكل فردي في القياسية 75 × 20 مم قوارير البلاستيك (التي تحتوي على ~ 20 مل من المواد الغذائية). هذا يتجنب الآثار السلبية على سلوك التزاوج من الذكور واللياقة البدنية ينظر في بعض الأنواع عندما يتم الاحتفاظ الذكور في مجموعات 16. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فضح نصف الذكور للعلاج المطلوب (CO 2 التخدير في هذه الحالة). استخدام CO 2 حصيرة أو الاستفادة لفضح الذباب للفترة الزمنية المطلوبة. مخزن نصف سوءوفاق في كل معاملة على المواد الغذائية الملونة حتى التزاوج يحدث. وهذا سيجعل لهم تمييزها بصريا خلال المحاكمات التزاوج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لنقل الذباب استخدام الشافطة 17. تسمية كل قارورة لتحديد كل من العلاج ووضع اللون من الذكور. هنا، استخدم أربعة معالجات (التخدير، وغير الملونة = G-NC، التخدير، ملونة = GC، لا التخدير، وغير الملونة، NG-NC، وليس التخدير، واللون، NG-C). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الإناث ظهرت حديثا في قوارير المواد الغذائية الطازجة حتى تنضج كمجموعات من 10. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> السماح الذباب إلى أن تنضج لسن التزاوج (D. البطن - 3 أيام، D. pseudoobscura - 5 أيام، D. subobscura - 7 أيام 18 الذباب يخزن في درجة حرارة مناسبة للأنواع التي تجري دراستها (على سبيل المثال، 22 ° C D ل. . pseudoobscura وD. subobscura و 25 درجة مئوية لمدة D. البطن). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الانتقال الإناث إلى قارورة الفردية (تابعaining ~ 20 مل من الطعام) قبل المحاكمة التزاوج للتأقلم على القارورة التزاوج 1 يوم. تسمية هذه قارورة بحيث قارورة يمكن التفريق. كن حذرا للتشويش على التجربة باستخدام وسم محايد (أي 1-150) لذلك ليس من الممكن لتخمين هوية الذباب في أي قنينة. ملاحظة: إن الشخص الذي يضع الذباب في كل قارورة أن تعرف هوية الذباب وضعت في كل قارورة لأنها سوف نلاحظ التي كانت ملطخة العلاج. ومع ذلك، ينبغي المراقب الذي يشاهد التزاوج لا يعرف هويتهم. للقيام سوف تكون هناك حاجة إلى هذا اثنين على الأقل المجربون، واحدة لإنشاء واحد لمراقبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء المحاكمات التزاوج بين 10-12 صباحا، أو في الوقت الذي يتزامن مع الضوء القادم على في ضوء دورة / المظلمة يتعرض الذباب إلى (&quot;الفجر&quot; للذباب). إضافة اثنين من الذباب الذكور إلى كل قارورة التزاوج (التي تحتوي على ذبابة أنثى واحدة) باستخدام الشافطة. تأكد من أن الذكور هما من العلاجات المختلفة (التخدير أوالسيطرة) وأن على المرء أن تلطيخ الأمعاء لتجعل من الممكن لتمييزها عن بعضها البعض، والانتباه إلى الذكور اتسخت. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا حدث الجماع، تسجيل حالة من الذكور أن الاصحاب (سواء الملونة أو غير - الملونة). إذا التجارب الماضية لمدة 2 ساعة، يفترض أن الأنثى لا تتزاوج. ملاحظة: 2 ساعة مناسبة لهذه الأنواع، ولكن غيرها من ذبابة الفاكهة قد تحتاج أكثر أو أقل وقت. </li></ol> 3. عزباء ذكر المحاكمات التزاوج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> للمحاكمات الذكور واحدة، كرر بروتوكول 2 مع اثنين من التغييرات: <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الخطوة 2.3 لا تبقي الذكور على المواد الغذائية الملونة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الخطوة 2.7، فقط إضافة ذكرا واحد لكل قارورة. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الخطوة 2.8، تسجيل مرة يضاف الطاير إلى القارورة، والوقت يجب أن تسجل يبدأ التزاوج والوقت الانتهاء من التزاوج. من هذه القيم، وحساب التزاوج النجاح، الكمون، ومدتها. </li></ol> 4. تحليل البيانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام حزمة إحصاءات مناسبة لآناتحلل. إذا كانت البيانات طبيعية وليس لها سوى اثنين من العلاجات، واستخدام تي الاختبارات أو ما يعادلها المعمم النموذج الخطي (GLM). لتجربتين الذكور، استخدام اختبارات ذات الحدين أو GLM ذي الحدين المتوفرة في أي حزمة الإحصاءات الأساسية. ملاحظة: للحصول على البيانات سبيل المثال، تم تنفيذ جميع التحليلات في R نسخة 3.0.3 19. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحقق من البيانات الكمون التزاوج ومدة التزاوج لطبيعتها، من خلال التآمر رسوم بيانية تردد من الكمون ومدة كل معاملة 20، وباستخدام اختبار لطبيعتها مثل شابيرو-ويلك. إذا كان غير طبيعي، وتحويلها، أو استخدام إحصاءات يعادل غير المعلمية 20. ملاحظة: لتسجيل بيانات سبيل المثال من خلال تجارب ذكر أعزب التقى التحول متطلبات الحياة الطبيعية والفروق متساوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إذا كانت البيانات يمكن أن يكون طبيعيا، واستخدام تي اختبارات لفحص الفروق بين الكمون التزاوج ومدة واحدة في محاكمات التزاوج الذكور عند استخدام اثنين من العلاجات 21. إذا تم استخدام علاجات متعددة،محاولة لتحليل التباين (ANOVA) 20. إذا لا يمكن تطبيع البيانات، حاول الاختبارات غير المعلمية أي ما يعادل 21. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام اختبارات ذات الحدين لاختبار تأثير إما تلوين الطعام أو CO 2 التخدير على نجاح التزاوج من الذكور المتنافسة 20. إذا تم استخدام علاجات متعددة، كما هو الحال مع البيانات سبيل المثال، استخدام GLM مع هيكل خطأ ذي الحدين 21. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لمدة المحاكمات الذكور في البيانات سبيل المثال، استخدم GLMs مع الهياكل الخطأ ذات الحدين. فحص واحد GLM لون متغير استجابة (ملون = 0 وغير الملون = 1) مع الأنواع، والوضع الغاز ومعالجة الغاز كتجهيز توضيحي variables.One GLM فحص CO 2 كمتغير استجابة (بالغاز = 0 وليس بالغاز- = 1) مع الأنواع، ووضع اللون، ومعالجة الغاز تركيبها. في كل حالة، وإنتاج نموذج القصوى، وتنفيذ نموذج التبسيط على أساس AIC 20. </li></ol>

<ol><li>Parker, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sperm+competition+and+its+consequences+in+insects%5BTitle%5D)+AND+%22Biological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Sperm competition and its consequences in insects.</a> Biological Reviews. 45, 525-567 (1970).</li>
<li>Hosken, D. J., Stockley, P., Tregenza, T., Wedell, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monogamy+and+the+battle+of+the+sexes%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Entomology%22%5BJournal%5D)">Monogamy and the battle of the sexes.</a> Annual Review of Entomology. 54, 361-378 (2009).</li>
<li>Chapman, T., Liddle, L., John, K., Wolfner, M., Partridge, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Female+cost+of+mating+caused+by+males+accessory+gland+fluids%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Female cost of mating caused by males accessory gland fluids.</a> Nature. 373, 241-244 (1995).</li>
<li>Avent, T. D., Price, T. A. R., Wedell, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-based+female+preference+in+the+fruit+fly+Drosophila+pseudoobscura%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour%22%5BJournal%5D)">Age-based female preference in the fruit fly Drosophila pseudoobscura.</a> Animal Behaviour. 75, 1413-1421 (2008).</li>
<li>Barron, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anaesthetising+Drosophila.+for+behavioural+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Anaesthetising Drosophila. for behavioural studies.</a> Journal of Insect Physiology. 46, 439-442 (2000).</li>
<li>Moeers, A. O., Rundle, H. D., Whitlock, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+selection+and+bottlenecks+on+male+mating+success+in+peripheral+isolates%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Naturalist%22%5BJournal%5D)">The effects of selection and bottlenecks on male mating success in peripheral isolates.</a> The American Naturalist. 153, 437-444 (1999).</li>
<li>Ashburner, M., Thompson, J. N. The laboratory culture of Drosophila. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAshburner%2C+M+%22The+Genetics+and+Biology+of+Drosophila%22">The Genetics and Biology of Drosophila</a>. Ashburner, M., Wright, T. R. F. 2a, Academic Press. London. 1-109 (1978).</li>
<li>Powell, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPowell%2C+J+%22Progress+and+Prospects+in+Evolutionary+Biology%3A+The+Drosophila+Model%22">Progress and Prospects in Evolutionary Biology: The Drosophila Model</a>. , Oxford University Press. Oxford. (1997).</li>
<li>Moore, A. J., Moore, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Balancing+sexual+selection+through+opposing+mate+choice+and+male+competition%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+of+London%2C+series+B-Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Balancing sexual selection through opposing mate choice and male competition.</a> Proceedings of the Royal Society of London, series B-Biological Sciences. 266, 711-716 (1999).</li>
<li>Hollocher, H., Ting, C., Pollack, F., Wu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incipient+speciation+by+sexual+isolation+in+Drosophila+melanogaster.%3A+Variation+in+Mating+preference+and+Correlation+between+sexes%5BTitle%5D)+AND+%22Evolution%22%5BJournal%5D)">Incipient speciation by sexual isolation in Drosophila melanogaster.: Variation in Mating preference and Correlation between sexes.</a> Evolution. 51, 1175-1181 (1997).</li>
<li>Perron, J. M., Huot, L., Corrivault, G. W., Chawla, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+carbon+dioxide+anaesthesia+on+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Effects of carbon dioxide anaesthesia on Drosophila melanogaster.</a> Journal of Insect Physiology. 18, 1869-1874 (1972).</li>
<li>Wu, C. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+isolation+in+Drosophila+melanogaster+%3A+A+possible+case+of+incipient+speciation%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+academy+of+sciences%22%5BJournal%5D)">Sexual isolation in Drosophila melanogaster : A possible case of incipient speciation.</a> Proceedings of the National academy of sciences. 92, 2519-2523 (1995).</li>
<li>Melcher, C., Pankratz, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Candidate+gustatory+interneurons+modulating+feeding+behaviour+in+the+Drosophila+brain%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biology%22%5BJournal%5D)">Candidate gustatory interneurons modulating feeding behaviour in the Drosophila brain.</a> PLoS Biology. 3, e305(2005).</li>
<li>Kalaw, V., Drapeau, M. D., Long, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+food+coloring+on+longevity+and+viability+of+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Dros.+Inf.+Serv%22%5BJournal%5D)">Effects of food coloring on longevity and viability of Drosophila melanogaster.</a> Dros. Inf. Serv. 85, 128-129 (2002).</li>
<li>Friberg, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+perception+of+female+mating+status%3A+its+effect+on+copulation+duration%2C+sperm+defence+and+female+fitness%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Behaviour%22%5BJournal%5D)">Male perception of female mating status: its effect on copulation duration, sperm defence and female fitness.</a> Animal Behaviour. 72, 1259-1268 (2006).</li>
<li>Lizé, A., Price, T. A. R., Heys, C., Lewis, Z., Hurst, G. D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extreme+cost+of+rivalry+in+a+monandrous+species+male+%E2%88%92+male+interactions+result+in+failure+to+acquire+mates+and+reduced+longevity%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Royal+Society+of+London%2C+series+B-Biological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Extreme cost of rivalry in a monandrous species male − male interactions result in failure to acquire mates and reduced longevity.</a> Proceedings of the Royal Society of London, series B-Biological Sciences. 281, 20140631(2014).</li>
<li>Yeh, S. -D., Chan, C., Ranz, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+differences+in+sperm+competitive+ability+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessing differences in sperm competitive ability in Drosophila.</a> Journal of Visualized Experiments. (78), e50547(2013).</li>
<li>Holman, L., Freckleton, R. P., Snook, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+use+is+an+infertile+sperm%3F+A+comparative+study+of+sperm-heteromorphic+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Evolution%22%5BJournal%5D)">What use is an infertile sperm? A comparative study of sperm-heteromorphic Drosophila.</a> Evolution. 62, 374-385 (2008).</li>
<li>R: A Language and Environment for Statistical Computing. , R Foundation for Statistical Computing. (2011).</li>
<li>Crawley, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCrawley%2C+MJ+%22Statistics%3A+An+introduction+using+R%22">Statistics: An introduction using R</a>. , Wiley-Blackwell. Oxford, UK. (2005).</li>
<li>Dytham, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDytham%2C+C+%22Choosing+and+Using+Statistics%3A+A+Biologist%27s+Guide%22">Choosing and Using Statistics: A Biologist's Guide</a>. , Wiley-Blackwell, Oxford, UK. (2010).</li>
<li>Kaiser, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+anaesthesia+by+carbon+dioxide+on+hatching+time+and+weight+at+eclosion+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Drosophila+Information+Service%22%5BJournal%5D)">Influence of anaesthesia by carbon dioxide on hatching time and weight at eclosion in Drosophila melanogaster.</a> Drosophila Information Service. 76, 92-93 (1995).</li>
<li>Rera, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+longevity+and+tissue+homeostasis+by+the+Drosophila.+PGC-1+homolog%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Modulation of longevity and tissue homeostasis by the Drosophila. PGC-1 homolog.</a> Cell Metabolism. 14, 623-634 (2011).</li>
<li>Crumpacker, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+micronized+fluorescent+dusts+to+mark+adult+Drosophila+pseudoobscura%5BTitle%5D)+AND+%22American+Midland+Naturalist%22%5BJournal%5D)">The use of micronized fluorescent dusts to mark adult Drosophila pseudoobscura.</a> American Midland Naturalist. 91, 118-129 (1974).</li>
<li>Jallon, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+few+chemical+words+exchanged+by+Drosophila+during+courtship+and+mating%5BTitle%5D)+AND+%22Behaviour+genetics%22%5BJournal%5D)">A few chemical words exchanged by Drosophila during courtship and mating.</a> Behaviour genetics. 14, 441-478 (1984).</li>
<li>Liimatainen, J. O., Jallon, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+analysis+of+cuticular+hydrocarbons+and+their+effect+on+courtship+in+Drosophila+virilis+and+D.+lummei%5BTitle%5D)+AND+%22Behaviour+Genetics%22%5BJournal%5D)">Genetic analysis of cuticular hydrocarbons and their effect on courtship in Drosophila virilis and D. lummei.</a> Behaviour Genetics. 37, 713-725 (2007).</li>
</ol>

تعلن المؤلفين أنه ليس لديهم المصالح المالية المتنافسة.

هذه البيانات تظهر أن تأثير التخدير CO 2 غير متناسقة بين الأنواع، مع اثنين من ثلاثة أنواع تبين تأثير يذكر. وتشير نتائجنا زيارتها وضع العلامات مع صبغة الطعام له تأثير أقل على نجاح التزاوج من الذكور من CO 2 التخدير لD. البطن. وتبين هذه التجارب أن الأصباغ الغذائية يمكن بسهولة وبتكلفة منخفضة استخدامها لالذباب التسمية لفحوصات التزاوج التي تنطوي على الذكور متعددة. من ثلاثة أنواع ذبابة الفاكهة نموذج فحص، إلا D. أظهر البطن تأثير من CO 2 التخدير على أداء التزاوج في وضع تنافسي. في المقابل، فإن أيا من الأنواع أظهر تأثير جمع على الغاز في تجارب التزاوج واحدة من حيث الكمون التزاوج، على عكس النتائج السابقة للD. البطن 5. يمكن بالتالي فإن تأثير المنافسة يتم تسليط الضوء على آثار اللياقة البدنية أكثر دهاء من التخدير CO 2، والتي هي كشف فقطتحت الحالات التي يكون فيها هناك منافسة بين الذكور والذكور. التعرض في جمع المبكر وقبل يوم واحد إلى المحاكمة يكون لها تأثير سلبي على قدرة الذكور من D. البطن للحصول على التزاوج. تعرض قبل يومين من المحاكمة ولكن لم تظهر أي تأثير. كلا D. pseudoobscura وD. لم subobscura لا تظهر أي تأثير التعرض للغاز في أي من التجارب. تفسير واحد هو أن D. كان البطن عرضة للالتعرض المبكر للCO 2 لأنه يجب جمع في الحياة في وقت سابق (0 - 6 ساعة قديمة) من الأنواع الأخرى لضمان الذكور هم البكر. وبالتالي الذكور D. البطن في هذه السن قد تكون أكثر حساسية مثل بشرة من ذبابة لا يزال تصلب، مقارنة مع الأنواع الأخرى التي كان يعد لبشرة لتتصلب. بشكل عام، وهذا يدعم فكرة أن آثار CO 2 التخدير هي أنواع محددة والمحققين يجب اختبار مناسب تأثير في الأنواع المستهدفة. Currentlوقد تم تنفيذ ذ، الجزء الأكبر من عمل على تأثير CO 2 التخدير خارجا على ذبابة الفاكهة البطن 5،11،22، وبالتالي قد لا يكون مناسبا لتطبيقه على الأنواع الأخرى ذات الصلة. طريقة غير الغازية بديل قدمت للتمييز ذباب، هو صبغة الطعام. وتشير النتائج كان هذا العلاج أي تأثير في في جميع الأنواع التي تم فحصها. ومع ذلك، في حين كان الاستخدام الناجح في توفير علامة الرخيصة ومرئية بسهولة للتمييز بين الأفراد تجدر الإشارة إلى أن الصبغة كان أسهل للتمييز في D. pseudoobscura وD. subobscura مما كان عليه في D. وقد استخدمت البطن. السابق مؤلفين عدة ألوان (الأحمر والأخضر والأزرق) 4،6. وجدنا التلوين الأزرق ليكون أسهل للتمييز في جميع الأنواع، وخاصة D. pseudoobscura وD. subobscura. باستخدام عدة ألوان من المحتمل أن تسمح تجارب أكثر تعقيدا مع العديد من flie ملحوظ بشكل فرديالصورة. ومع ذلك، الاختبارات الأولية من الأصباغ المختلفة ضرورية، كما تفشل بعض الأصباغ الغذائية لتلوين الذباب، ربما يتم هضمها عندما تستهلك. يمكن الأصباغ الأخرى لها آثار سامة والحد من البقاء على قيد الحياة من الذباب، وينبغي تجنبها 14). كما تم استخدام طرق تلوين الطعام بديلة باستخدام البقع أكثر تكلفة لفحص سلامة الأمعاء لD. البطن 23. قد توفر هذه كبديل لذلك، على الرغم من أن أكثر تكلفة، وأسلوب الصباغة 23. طريقة صبغ سريع مثل CO 2 الجناح لقطة كما الذباب يمكن تخزينها على الغذاء مصبوغ من المجموعة. كان الإقبال على الطعام السريع (~ 3 ساعة)، لذلك تخزين O / N على المواد الغذائية الملونة أيضا يكون كافيا للاحتفال الذباب، كما تستخدم في دراسات أخرى 6. ومع ذلك، فإن مدة التلوين قصيرة نسبيا (~ 4-5 ساعة) مقارنة لقطة الجناح (دائمة) أو الغبار الفلورسنت بمناسبة (10 - 12 أيام) 24. كما الأنواع ذبابة الفاكهةتختلف في المظهر، والأصباغ المختلفة تكون أكثر أو أقل فعالية بالنسبة للأنواع المختلفة، وحيث أن بعض سلالات (على سبيل المثال، المسوخ خروج المغلوب) يمكن أن يكون عرضة للتغييرات في النظام الغذائي، أي استخدام صبغة يتطلب اختبارا أوليا لفعاليتها لا سيما إذا كانت أطول التعرض الطويل لالأصباغ يمكن أن تكون سامة 14. وعلى النقيض من الدراسة من قبل كالاو وآخرون 14، لم نعثر على أي وفيات كبيرة بعد التخزين لأيام متعددة على الأطعمة الملونة لD. البطن (3 أيام)، D. pseudoobscura (5 أيام)، أو D. subobscura (7 أيام)، وربما يرجع ذلك إلى اختلاف صبغة المستخدمة. في خطوة حاسمة لنجاح استخدام تقنية الصبغة هي خطوة 1.5، وهو ما يؤكد وصبغ المختار يعمل بشكل جيد مع الأنواع والسلالة المستخدمة. وتتضمن تقنية بديلة تطبيق الغبار الملون إلى خارج الطاير قبل استخدامها في التجارب الميدانية 24. وقد استخدمت هذه الطريقة لتتبع الأفراد في ر يرجع الحقلس مدة وضع العلامات وسهولة كتلة بمناسبة الذباب 24. على الرغم من أننا لم تختبر صراحة هذه الطريقة في التجارب التزاوج، سيكون من المهم دراسة أي آثار الغبار التي يمكن أن يكون لها على الحواس الهامة في التزاوج، ولا سيما في ذبابة الفاكهة 25 و 26. وفي الأنواع، ومع ذلك، حيث الصباغة المعوية غير ممكن، هذه الأساليب يمكن أن تكون مناسبة. وفي الختام وجدنا أن في اثنين من الأنواع الثلاثة اختبار (D. pseudoobscura وD. subobscura) لم يكن هناك تأثير وجدت أي من CO 2 التخدير أو تلوين الطعام على قدرة التزاوج من الذكور. لD. البطن تأثير سلبي من CO 2 التخدير تم الكشف، ولكن لم تلوين الطعام لا يؤثر على التزاوج النجاح في هذا النوع. وبشكل عام، يوفر طريقة صبغ طريقة بسيطة ورخيصة غير الغازية لتحديد فردية ذبابة الفاكهة التي تعادل أو أفضل من الأساليب التي تتطلب CO 2 التخدير. هذاومن المرجح أن هذه الطريقة تعمل عبر مجموعة من الأنواع.

على مدى العقود القليلة الماضية كان هناك اهتمام متزايد في كيفية الاختيار والمنافسة الجنسي بين الذكور تأثير على تطور 1،2. وقد لعبت تجارب على سلوك التزاوج دورا هاما في تطوير واختبار نظريات الانتقاء الجنسي 3،4. وبصفة خاصة الأنواع الابحاث التي تستخدم، من جنس ذبابة الفاكهة، ساهمت إلى حد كبير في فهم الانتقاء الجنسي والسلوك. ومع ذلك، فمن المهم للتحقيق في ما إذا كانت التقنيات المستخدمة عادة قد تحيز بشكل مصطنع نتائج التجارب التزاوج القياسية 5،6. وكثيرا ما يستخدم التخدير لمعالجة وتحديد الهوية في تجارب 7. على سبيل المثال، يتم جمع الذباب عادة قبل التزاوج، أو تخزن في المورثات أو علاجات تجريبية باستخدام ثاني أكسيد الكربون (CO 2) مخدر. في التجارب التي يحتاج فيها شخصان أو أكثر لتمييزها، هو ممارسة شائعة لخدر في فلوريداالمنشأ وكليب جزء من الجناح قبالة لتحديد كل مجموعة فردية أو المعاملة 5،8. ومن الأهمية بمكان، ولكن، لفهم كيفية CO 2 العلاج سوف تؤثر على السلوك. وقد تم فحص تأثير CO 2 التخدير في ذبابة الفاكهة السوداء التي تكون فيها الذكور يتعرضون لثاني 2 استغرق فترة أطول كثيرا للتزاوج وعموما كان أقل نجاحا التزاوج من الذكور غير مخدرة أو الذكور مخدرة باستخدام التعرض للبرد 5. وقد لوحظ هذا التأثير على حد سواء عندما تم تطبيق التخدير في يوم التجربة وعندما تم احتساب الذباب يوم واحد لاسترداد. ومع ذلك، كان هذه الدراسة محدودة في دراسة تجارب فقط حيث تم تقديم الذكور واحد إلى كل أنثى 5. سيناريو أكثر واقعية هو لالإناث إلى الذكور تواجه متعددة 9،10، مما يتيح التنافس بين الذكور، والتي قد تسمح للكشف عن المزيد من الخسائر خفية من اللياقة البدنية الذكور بسبب التخدير. استخدام التخدير CO 2 قد يكون أيضاوجدت أون للحد من الخصوبة وطول العمر من البالغين D. البطن عندما يتعرضون بعد وقت قصير من eclosion، كما هو شائع عند جمع عذراء الذباب (11). بديلا لثاني 2 التخدير هو للاحتفال الذباب عن طريق تغذية لهم الطعام الملونة مع صبغ 4،6،10،12،13. هذه الصبغة يدخل أمعاء الطاير ومرئيا من خلال البطن، مما يسمح الذباب الملونة لتمييزها عن الذباب بغير لون، أو من الذباب المسمى مع لون مختلف. طرق تختلف في كيفية هذا يمكن تطبيقها: إضافتها مباشرة إلى الغذاء 12، عن طريق مصبوغ عجينة الخميرة التكميلية 6، أو عن طريق التعرض لرواية مصبوغة الغذاء الركيزة 13. ويبدو أن هذه التقنيات بمناسبة لإظهار أي تأثير على أداء 4،6 التزاوج. ومع ذلك، ورقة فحص مباشرة آثار نفس تلوين الطعام على الكبار D. وجد البطن انخفاض قوي في عمر 14. وقد ركز العمل السابق أيضا ALMمعاهدة الفضاء الخارجي كليا على D. البطن، سواء فيما يتعلق آثار CO 2 التخدير 5،11 وتلوين الطعام 14 الأساليب. حاليا، هناك القليل من المعلومات حول كيفية CO 2 التخدير أو استخدام التلوين الأمعاء يؤثر على سلوك التزاوج من غيرها من ذبابة الفاكهة. الدراسة التالية بتقييم تأثير CO 2 التخدير على سلوك التزاوج من ثلاثة أنواع من ذبابة الفاكهة (D. البطن، D. pseudoobscura، وD. subobscura). تم فحص تأثير جمع الذباب على CO 2 في تجربتين التزاوج الذكور على حد سواء واحد. كما تم العثور على تأثير CO 2 إلى تختلف في D. تم اختبار البطن 5 وفترات كمون مختلفة حتى بين التعرض لثاني 2 والتزاوج. بديل بمناسبة طريقة لقطة التخدير والجناح: يتم تقييم أيضا استخدام الأصباغ الغذائية وصمة عار على الذباب.

<table><tbody><tr><td>أنابيب بلاستيكية</td><td>فيشر Scientific</td><td>TWT-200-061G</td><td>قد تكون الأنابيب الأخرى مناسبة ولكن يجب أن تتناسب مع طرف ماصة 1 مل.</td></tr><tr><td>شبكة دقيقة</td> أي شبكة <td></td><td>ستارة</td>دقيقة من <td>الخردوات</td></tr> مناسبة 1 <tr><td>مل أطراف ماصة</td><td>VWR</td><td>83007-376</td><td>ستكون العلامات التجارية المختلفة لأطراف الماصة مناسبة</td></tr><tr><td>قوارير بلاستيكية</td><td>Sarstedt</td><td>58.49</td><td>يمكن أيضا استخدام قوارير أو زجاجات أكبر.</td></tr><tr><td>كرات قطنية لويس</td><td>للحلول الطبية</td><td>28170</td><td>يختلف حجم القطن اعتمادا على حجم القوارير المستخدمة</td></tr><tr><td>تلوين الطعام الأزرق</td><td>Thesugarcraftcompany-يمكن</td><td></td> أن <td>يكون لألوان الصبغة والعلامات التجارية الأخرى نتائج متغيرة.</td></tr><tr><td>CO2 Tank</td><td>BOC</td><td>BOC 40VK</td><td></td></tr><tr><td>Sharpie Markers</td><td>Steadtler</td><td>Lumocolor 313 S</td><td>يمكن استخدام ألوان مختلفة ، لكن Lumocolor S توفر مزيجا ممتازا من المتانة والنعومة</td></tr><tr><td>ساعة توقيت</td><td>Salter</td><td>SL3920</td><td>أي ساعة توقيت بشاشة رقمية جيدة ستكون جيدة</td></tr></tbody></table>

الصباغة الحشرات لفحوصات السلوكية: في سلوك التزاوج من تخدير<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

Dyeing Insects for Behavioral Assays: the Mating Behavior of Anesthetized Drosophila

وقد ساهمت تجارب التزاوج باستخدام ذبابة الفاكهة إلى حد كبير في فهم الانتقاء الجنسي والسلوك. وغالبا ما تتطلب التجارب أساليب بسيطة وسهلة ورخيصة للتمييز بين الأفراد في المحاكمة. وهناك تقنية القياسية لهذا هي CO 2 التخدير ثم وصفها أو الجناح لقطة كل الطاير. ومع ذلك، وهذا هو الغازية ولقد ثبت أن تؤثر على السلوك. وقد استخدمت تقنيات أخرى تلوين للتعرف على الذباب. تقدم هذه المقالة طريقة بسيطة وغير الغازية لوضع العلامات ذبابة الفاكهة التي تسمح لهم أن تحدد بشكل فردي ضمن التجارب، وذلك باستخدام تلوين الطعام. وتستخدم هذه الطريقة في التجارب حيث تتنافس اثنين من الذكور لتتزاوج مع الإناث. الصباغة سمحت تحديد سريعة وسهلة. كان هناك، ومع ذلك، هناك بعض الاختلاف في قوة تلوين عبر الأنواع الثلاثة التي تم اختبارها. يتم تقديم بيانات تظهر الصبغة لها تأثير أقل على سلوك التزاوج من CO 2 في ذبابة الفاكهة بميلانوجاستر. ويظهر تأثير التخدير CO 2 تعتمد على نوع من ذبابة الفاكهة، مع د. pseudoobscura وD. subobscura يظهر أي أثر، في حين D. وكان الذكور البطن خفضت نجاح التزاوج. طريقة صبغ قدمت ينطبق على مجموعة واسعة من التصاميم التجريبية.

تجربتان التزاوج من الذكور - تأثير CO 2 التخدير على سلوك التزاوج أفضل نموذج جدت لشرح الاختلاف في تأثير CO 2 التخدير يتضمن الأنواع كعامل (مع D. pseudoobscura وD. subobscura تنصهر فيها لأنها أظهرت عدم وجود فروق بين بعضها البعض). في D. pseudoobscura وD. subobscura لم يكن هناك تأثير كبير من CO 2 التخدير على نجاح التزاوج في تجربتين الذكور (Z 1،589 = 0.087، P = 0.931). لD. البطن، كان الذكور يتعرضون لثاني 2 التخدير أقل بكثير نجاح التزاوج (Z1،589 = 2.467، P = 0.014). وكان هناك أيضا تفاعلا كبيرا بين الأنواع والعلاج (χ 2 = 1،589 6.83، P = 0.009) مع وجود تأثير أكبر عندما ينظر D. تعرض البطن إلى الغاز في جمع أو قبل المحاكمات (الجدول 1) 1 يوم. Howevإيه، D. الذكور البطن تتعرض لثاني قبل 2 يومين من المحاكمة التجريبية لم تظهر تأثير CO 2. تجربتان التزاوج من الذكور - تأثير التلوين الأمعاء على سلوك التزاوج أظهر نموذج تبسيط أي تأثير كبير من تلوين الطعام يتم العثور على أي من الأنواع الثلاثة (P&gt; 0.1). عندما أدرجت العلاج أو وضع الغاز في تحليل هذه كانت أيضا ليس كبيرا (P&gt; 0.1). وتظهر نسب التزاوج ناجحة لالذباب الملون عبر العلاجات في الجدول 2. والفرق في تلوين بين الذباب أبقى على الملونة ويمكن رؤية الطعام بغير لون في الشكل 1. وكانت شدة تلوين الطعام في الأمعاء أكبر في D. pseudoobscura وD. subobscura مما كان عليه في D. البطن. تجارب التزاوج واحدة - أثر استخدام CO 2 التخدير على مالسلوك أثناء التشغيل لم يكن هناك فرق في الكمون التزاوج لأي من الأنواع الثلاثة عندما تم استخدام CO 2 التخدير لجمع مؤخرا ظهرت البالغين. تم العثور على أثر لمدة التزاوج في D. subobscura عندما تعرضت لثاني قبل 2 يومين تجارب التزاوج (أرقام 2 و 3؛ الجدول 2). <img alt="الشكل (1)" src="/files/ftp_upload/52645/52645fig1.jpg" /> الشكل 1. صورة تظهر قوارير من الملونة وغير الملونة تحلق الأغذية (A) وقوة المعوية تلوين في ذكر D. Subobscura (B). <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/52645/52645fig2.jpg" /> الشكل 2. متوسط ​​و 95٪ فترات الثقة عن الجماع الكمون لهذه الانواع الثلاثة التحقيق معهم في المحاكمات ذكر أعزب، عندما كان الذكور تخديرد (الحانات ضوء) أو لا مخدرة (القضبان السوداء) عندما يتم جمعها كما العذارى قبل النضج الجنسي. <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/52645/52645fig3.jpg" /> الشكل 3. متوسط ​​و 95٪ فترات ثقة لمدة الجماع لهذه الانواع الثلاثة التحقيق معهم في المحاكمات ذكر أعزب، عندما كانت مخدرة الذكور (الحانات ضوء) أو لا مخدرة (القضبان السوداء) عندما يتم جمعها كما العذارى قبل النضج الجنسي. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> علاج </td><td> نوع </td><td> رقم محاكمات </td><td> رقم الذباب الملونة التي تزاوج </td><td> ف القيمة </td><td> رقم الذباب بالغاز التي تزاوج </td><td> ف القيمة </td></tr><tr><td rowspan="3"> جمع على CO 2 </td><td> D. ميل </td><td> 73 </td><td> 36 </td><td> 1 </td><td> 27 </td><td> 0.0344 </td></tr><tr><td> D. سوق فلسطين </td><td>79 </td><td> 41 </td><td> 0.8221 </td><td> 44 </td><td> 0.3682 </td></tr><tr><td> D. الفرعية </td><td> 71 </td><td> 40 </td><td> 0.3425 </td><td> 33 </td><td> 0.6353 </td></tr><tr><td rowspan="3"> تتعرض لثاني 2 18 ساعة قبل </td><td> D. ميل </td><td> 57 </td><td> 28 </td><td> 1 </td><td> 19 </td><td> 0.0163 </td></tr><tr><td> D. سوق فلسطين </td><td> 65 </td><td> 32 </td><td> 1 </td><td> 31 </td><td> 0.8043 </td></tr><tr><td> D. الفرعية </td><td> 68 </td><td> 38 </td><td> 0.3961 </td><td> 35 </td><td> 0.9036 </td></tr><tr><td rowspan="3"> تتعرض لثاني 2 2DAYS. </td><td> D. ميل </td><td> 56 </td><td> 19 </td><td> 0.0222 </td><td> 32 </td><td> 0.3497 </td></tr><tr><td> D. سوق فلسطين </td><td> 70 </td><td> 32 </td><td> 0.5504 </td><td> 33 </td><td> 0.7202 </td></tr><tr><td> D. الفرعية </td><td> 56 </td><td> 29 </td><td> 0.8939 </td><td> 26 </td><td> 0.6889 &lt;/ td&gt; </tr></tbody></table> الجدول 1. نتائج تجربتين ذكر الاختيار عبر جميع أنواع العلاجات وفحصها. <table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> نوع </td><td> سمة </td><td> DF </td><td> تي القيمة </td><td> ف القيمة </td></tr><tr><td rowspan="2"> D. البطن </td><td> كمون </td><td> 58 </td><td> 1.379 </td><td> 0،174 </td></tr><tr><td> مدة </td><td> 58 </td><td> 1.243 </td><td> 0.221 </td></tr><tr><td rowspan="2"> D. pseudoobscura </td><td> كمون </td><td> 109 </td><td> 0.419 </td><td> 0،676 </td></tr><tr><td> مدة </td><td> 109 </td><td> 0.436 </td><td> 0.664 </td></tr><tr><td rowspan="2"> D. subobscura </td><td> كمون </td><td> 83 </td><td> 0.098 </td><td> 0.922 </td></tr><tr><td> مدة </td><td> 83 </td><td> 1،767 </td><td> 0.081 </td></tr></tbody></table> . تم تنفيذ الجدول 2. النتائج من تجارب التزاوج واحدة فحص تأثير تجميع على CO 2 التخدير على التزاوج الكمون ومدة الاختبارات خارجا على ثلاثة أنواع من ذبابة الفاكهة (D. البطن، D. pseudoobscura وD. subobscura).

يصف هذا البروتوكول طريقة بسيطة وفعالة من حيث التكلفة للتعرف على ذبابة الفاكهة أو الحشرات الأخرى بشكل فردي. تظهر البيانات التوضيحية التي تحقق في نجاح التزاوج عبر ثلاثة أنواع من ذبابة الفاكهة أن هذه الطريقة قابلة للمقارنة أو أفضل من استخدام تخدير ثاني أكسيد الكربون 2.

Mating experiments using Drosophila have contributed greatly to the understanding of sexual selection and behavior. Experiments often require simple, easy ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو جعل الحشرات متميزة بصرياً عن بعضها البعض بطريقة غير جراحية من أجل تحديد هويتها في التجارب السلوكية. يتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق تلوين سطح غذاء ذبابة الدروسوفيلا العادي في أنبوب ذباب قياسي ببضع قطرات من ملون الطعام. بعد ذلك، تُضاف الذبابات إلى الأنبوب لمدة ثلاث ساعات، وعند هذه النقطة، يجب أن يظهر على بطن ذبابة الدروسوفيلا تلوين قوي.يمكن إجراء تجارب التزاوج، على سبيل المثال، لملاحظة ما إذا كانت الإناث تجد الذكور المصبوغة بلون معين أكثر جاذبية. وفي نهاية المطاف، تُعد تقنية الصبغ هذه طريقة سريعة وبسيطة وغير جراحية لتمييز الحشرات من أجل سهولة التعرف عليها تجريبياً. وتكمن الميزة الرئيسية لاستخدام هذه التقنية مقارنة بالطرق الحالية، مثل إزالة جزء من جناح الذبابة، في أنها أسرع، وأقل تداخلاً، وأقل احتمالاً للتأثير على السلوك اللاحق.يمكن أن تكون هذه الطريقة مفيدة في مجموعة واسعة من التجارب التي يتطلب فيها تحديد الأفراد أو فئات الذباب. كما أنها سهلة بما يكفي لاستخدامها في تجارب بسيطة في المدارس أو الكليات. سيقوم بشرح هذه التقنية كل من Rudy Verse Bo وChloe Hayes، وكلاهما طالبان في مرحلة الدكتوراه هنا في University of Liverpool. بعد أن يبرد الغذاء ويتصلب، ابدأ بإضافة 0.5 إلى 1 mL من ملون طعام أزرق فوق الغذاء، ثم وزع الصبغة على كامل سطح القارورة.بعد ذلك، يتم تخزين الغذاء في درجة حرارة 4 °C لمدة يومين للسماح بامتصاص الصبغة في الطبقة العلوية من الغذاء. بعد ذلك، يتم نقل الذباب إلى الغذاء وفقاً لمتطلبات التجربة. وفي غضون يوم واحد، يمكن تمييز الذباب المصبوغ بسهولة عن الذباب غير المصبوغ لإجراء تجربة تزاوج باستخدام الذباب المصبوغ.استخدم جهاز شفط لنقل الذكور العذارى فرادى إلى أنابيب بلاستيكية قياسية مقاس 75 في 20 مليمتر تحتوي على 20 مليلتر من الغذاء. في حال إجراء تجربة تزاوج تعتمد على ذكرين، ضع نصف الذكور في كل مجموعة علاجية في أنابيب تحتوي على غذاء ملون. بعد ذلك، انقل الإناث التي برزت حديثاً إلى أنابيب غذاء جديدة في مجموعات مكونة من 10 إناث.الآن، اترك كلا الجنسين لينضجا حتى سن التزاوج في درجة الحرارة المناسبة لهذا النوع. وعندما تصبح ذباب الدروزوفيلا (drosophila) جاهزة، عرض الذكور التجريبية للمعالجة المطلوبة. على سبيل المثال، يتم تخدير الذباب الآخر باستخدام ثاني أكسيد الكربون، وقم بتمييز القوارير لتحديد نوع المعالجة وحالة اللون للذباب في اليوم السابق للتجربة.انقل الإناث إلى أنابيب اختبار فردية تحتوي على 20 milliliters من الغذاء لتعويد الذباب على أنبوب التزاوج، وضع ملصقات محايدة على الأنابيب لضمان تعمية التجربة. بعد ذلك، أضف ذبابة ذكر واحدة أو ذبابتين إلى كل أنبوب تزاوج يحتوي على أنثى واحدة، حسبما يقتضيه الأمر.ابدأ تجربة التزاوج بالتزامن مع إضاءة المصابيح في الحاضنة لإجراء تجربتي تزاوج لذكرين. تأكد من أن كل ذكر ينتمي إلى مجموعة علاجية مختلفة، وأن ذبابة واحدة تظهر تلوينًا بطنيًا. سجل المجموعة العلاجية ولون كل ذبابة ذكر.إذا حدث الجماع خلال ساعتين، يتم تسجيل حالة النرد للذكر الذي يتزاوج في تجارب تزاوج الذكر المنفرد. كما يتم تسجيل وقت بدء التزاوج ووقت انتهائه. ثم تُحسب بيانات فترة زمن الوصول إلى نجاح التزاوج ومدته لهذه التجربة.أفضل نموذج تم إيجاده لتفسير التباين في تأثير التخدير بثاني أكسيد الكربون، والذي يتضمن الأنواع كعامل. فعلى سبيل المثال، في هذه التجارب التمثيلية، لم يظهر التخدير بثاني أكسيد الكربون أي تأثير معنوي على نجاح تزاوج drosophila.تم استخدام ذباب Pseudo obscure و drosophila sub obscure في تجربتين للذكور من نوع drosophila melanogaster، ومع ذلك، لوحظ انخفاض ملحوظ في نجاح التزاوج لدى الذكور الذين تعرضوا للتخدير بثاني أكسيد الكربون، وكان التأثير أكبر عندما تعرضت drosophila melanogaster للغاز عند الجمع أو قبل يوم واحد من التجارب. لم تُلاحظ فروق ذات دلالة إحصائية في التزاوج لدى الذباب الملون بالغذاء لأي من الأنواع الثلاثة، كما لم يؤدِ إدراج المعالجة في التحليل أو حالة التزاوج للحشرات في تجارب التزاوج الفردية إلى وجود فروق. لا يوجد فرق في التزاوج.لوحظ وجود فترة كمون لدى أي من الأنواع الثلاثة عند استخدام التخدير بثاني أكسيد الكربون لجمع البالغين الذين ظهروا حديثاً. وقد ظهر تأثير على مدة التزاوج فقط في ذباب drosophila sub obscure عند تعريضه لثاني أكسيد الكربون قبل يومين من تجارب التزاوج. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن تتكون لديك فكرة جيدة عن كيفية استخدام صبغ الأمعاء كتقنية غير باضعة لتمييز الذباب خلال تجاربك.عند محاولة تنفيذ هذا الإجراء، من المهم اختبار أي تأثير للصبغة المستخدمة على الأنواع المستهدفة؛ فقد تكون بعض الصبغات سامة، كما يمكن لبعض الألوان أن تؤثر بشكل مباشر على نجاح عملية التزاوج. على سبيل المثال، قد يكون ملون الطعام الأحمر مفضلاً لدى بعض الأنواع.لقد استخدمنا تقنية الصبغ هذه للتمييز بين الذباب في تجارب التزاوج التنافسي. ومع ذلك، يمكن استخدامها أيضاً في مجموعة متنوعة من التجارب الأخرى التي تتطلب تحديد هوية الذباب بشكل فردي، مثل المقايسات لتقييم العدوانية، أو الدفاع عن المنطقة، أو نشاط تفضيل الغذاء، أو السلوكيات الاجتماعية.

dyeing-insects-for-behavioral-assays-mating-behavior-anesthetized

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

ذبابة الفاكهة السوداء البطن هو وراثيا وسلوكيا نظام نموذج قابل للطرق التي استخدمت لفهم الأساس الجزيئي والخلوي من العديد من العمليات البيولوجية الهامة لأكثر من قرن 1. ذبابة الفاكهة قد تم استغلالها بشكل جيد للحصول على نظرة ثاقبة الأساس الجيني للسلوك الذباب.

طرق الفحص ذبابة الفاكهة سلوك

في هذه المقالة الفيديو، ونحن تصف مقايسة الآلي لقياس تأثير الجوع أو الشبع على حاسة الشم التي تعتمد سلوك البحث الغذائية في الفاكهة الكبار يطير ذبابة الفاكهة السوداء البطن.

واحدة ذبابة الفحص لسلوك البحث عن الطعام في ذبابة الفاكهة

هنا ، نقدم بروتوكولا لتحديد تجنب الأفراد المجهدين. هذا النموذج قوي ولكنه سهل الاستخدام ويمكن استخدامه لتقييم تأثير الجينات والبيئة على نوع واحد من التفاعل الاجتماعي في ذبابة الفاكهة السوداء.

الفحص مباشرة للالكمي لتجنب الاجتماعي في ذبابة الفاكهة السوداء

يصف هذا البروتوكول تقنية التحجيم الفردي الاستجالة قابلة للتحلل في ذبابة الفاكهة التي تعطي بيانات قوية، كمية لقياس السلوك الاستمالة. ويستند هذا الأسلوب على مقارنة الفرق في تراكم الصبغة على جثث الحيوانات غير مستعد مقابل الحيوانات على مدى فترة محددة من الزمن.

الكمي للسلوك الاستمالة ذبابة الفاكهة

توضح هذه المقالة الفحص السلوكي يستخدم محرك التزاوج من الذكور في ذبابة الفاكهة melanogaste ص لدراسة الدوافع. باستخدام هذه الطريقة، يمكن للباحثين الاستفادة الطيران المتقدمة تقنيات العصبية الوراثية للكشف عن الآليات الوراثية والجزيئية والخلوية التي تكمن وراء هذا الدافع.

قياس وتغيير التزاوج محرك في ذكر<em&gt; ذبابة الفاكهة</em

علينا أن نظهر فحص لتحليل الإشارات البيئية والجينية التي تؤثر على سلوك التزاوج في ذبابة الفاكهة ذبابة الفاكهة ميلانوغاستر .

وهناك طريقة لاختبار تأثير الإشارات البيئية على سلوك التزاوج في<em&gt; ذبابة الفاكهة ميلانوغاستر</em

يصف هذا البروتوكول التعلم ذبابة الفاكهة والذاكرة فحص يسمى تكييف التوافه. ويستند هذا الفحص الكلاسيكي على الحد من سلوك المغازلة الذكور بعد الرفض الجنسي من قبل الإناث غير تقبل فرضية. هذا الشكل الطبيعي من اللدونة السلوكية يمكن استخدامها لاختبار التعلم، والذاكرة على المدى القصير، والذاكرة على المدى الطويل.

تكييف قنبلة ذبابة الفاكهة كتدبير للتعلم والذاكرة

يصف هذا البروتوكول كيفية جعل غرفة مراقبة سلوك Drosophila بالغة بسيطة ، وكيفية التقاط صور / مقاطع فيديو عالية الوضوح للمورفولوجيا أو سلوك أنواع مختلفة من ذباب الفاكهة في غرفة المراقبة من خلال طرق بسيطة نسبيا وبأسعار معقولة.

نظام تصوير عالي الوضوح قابل للتعديل للدراسات السلوكية للبالغين Drosophila

يرتبط اضطراب طيف التوحد (ASD) بضعف السلوك الاجتماعي والتواصلي وظهور السلوك المتكرر. لدراسة العلاقة المتبادلة بين جينات ASD والعجز السلوكي في نموذج ذبابة الفاكهة ، تم وصف خمسة نماذج سلوكية في هذه الورقة لفحص التباعد الاجتماعي ، والعدوان ، والمغازلة ، والاستمالة ، وسلوك التعود.

نماذج للتقييم السلوكي في نموذج ذبابة الفاكهة لاضطراب طيف التوحد

تقدم هذه الورقة طرقا للتلاعب البصري الوراثي في ذبابة الفاكهة السوداء ، باستخدام CsChrimson و GtACR2 لتنشيط وإسكات الخلايا العصبية المحددة. تم وصف أربع تجارب لاستخدام علم البصريات الوراثي لاستكشاف السلوكيات الحرارية والذوقية ، مما يوفر نظرة ثاقبة للآليات العصبية الأساسية التي تحكم هذه العمليات.

المقايسات السلوكية للتلاعب البصري الوراثي للدوائر العصبية في ذبابة الفاكهة السوداء

يقدم البروتوكول طريقة عالية الإنتاجية وفعالة من حيث التكلفة لتقييم السمية العصبية في ذبابة الفاكهة من خلال القياس الكمي للخلل الحركي كبديل لنماذج الثدييات التقليدية. يهدف إلى تقييم التأثيرات السامة للأعصاب للمركبات الصيدلانية أو العوامل البيئية أو التعديلات الجينية باستخدام نموذج حساس وقابل للتكرار ومفضل أخلاقيا.

التحليل السلوكي للخلل الحركي في ذبابة الفاكهة السوداء كقراءة للسمية العصبية

تعلم طريقة تلوين الحشرات بالأصباغ الغذائية لتحديدها في تجارب السلوك دون إيذائها، باستخدام ذباب الفاكهة Drosophila. هذه التقنية البسيطة تتيح متابعة الفردان بسهولة أثناء دراسات التزاوج والسلوك.

الصباغة الحشرات لفحوصات السلوكية: في سلوك التزاوج من تخدير

استكشف المزيد من الفيديوهات