Name: بروتوكول الحليمات دنفر للتحليل الموضوعي لكمئي الحليمات (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 50 s
Description: تعلم بروتوكول دنفر لقياس كثافة الحليمات الفطرية على اللسان باستخدام صور رقمية ومفتاح ثنائي. يوفر هذا الأسلوب موضوعية عالية للبحث في علوم التذوق والأعصاب.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

وقد تم تمويل هذا العمل في جزء من جائزة تعليم العلوم الشراكة (المصلحة) R25 RR025066 بين 2008-2012 من المعاهد الوطنية للصحة والمركز الوطني للبحوث الموارد. شكرا للزملاء في مجال طعم للنقاش العميق للأدب، نتائجنا وردود الفعل على استخدام النيابة العامة في مختلف السيناريوهات المختبر: جون هايز، سو كولدويل، بول بريسلين، كارلا شوبرت. شكرا لك أيضا على القيادة في متحف دنفر للطبيعة والعلوم والموظفين في دعم العلم مواطن في علم الوراثة من طعم مختبر في القطب الصحة. أخيرا، شكرا لكم جميعا لدينا المتطوعين العلماء المواطن على وقتهم والتفاني في تطوير واستخدام هذا البروتوكول، بما في ذلك: الدب أراغون، مايك آرتشر، سو أتامان، مايكل باجلي، A&#39;nette برتراند، ديانا بويلز، ويندي السرية، ساشا دولي ، باتي Drever، جيسيكا ERN، لورا Harmacek، شون هيبارد، جويس Hutchens، مات جو، ليتا كين، ويليم Leenhouts، Stephania لوkjan، أشلي ماثيوز، مايك ماوزر، ستيفاني ميلر، هالى مورغان رودريجيز، غريفين Scherma، أليسا Schickedanz، تيري سيمون، ديلان توماس، رودي توريس، تايلر ويلسون، ديان Woltkamp.

<ol><li>Miller, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+taste+bud+density+across+adult+age+groups%5BTitle%5D)+AND+%22J+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Human taste bud density across adult age groups.</a> J Gerontol. 43 (1), B26-B30 (1988).</li>
<li>Miller, I. J. Jr, Reedy, F. E. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+fungiform+papillae+and+taste+pores+in+living+human+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">Quantification of fungiform papillae and taste pores in living human subjects.</a> Chem Senses. 15 (3), 281-294 (1990).</li>
<li>Miller, I. J. Jr, Reedy, F. E. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variations+in+Human+Taste+Bud+Density+and+Taste+Intensity+Perception%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Variations in Human Taste Bud Density and Taste Intensity Perception.</a> Physiol Behav. 47 (6), 1213-1219 (1990).</li>
<li>Shahbake, M., Hutchinson, I., Laing, D. G., Jinks, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+quantitative+assessment+of+fungiform+papillae+density+in+the+human+tongue%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Rapid quantitative assessment of fungiform papillae density in the human tongue.</a> Brain Res. 1052 (2), 196-201 (2005).</li>
<li>Bartoshuk, L. M., Duffy, V. B., Miller, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PTC%2FPROP+tasting%3A+anatomy%2C+psychophysics%2C+and+sex+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">PTC/PROP tasting: anatomy, psychophysics, and sex effects.</a> Physiol Behav. 56 (6), 1165-1171 (1994).</li>
<li>Essick, G. K., Chopra, A., Guest, S., McGlone, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lingual+tactile+acuity%2C+taste+perception%2C+and+the+density+and+diameter+of+fungiform+papillae+in+female+subjects%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Lingual tactile acuity, taste perception, and the density and diameter of fungiform papillae in female subjects.</a> Physiol Behav. 80 (2-3), 289-302 (2003).</li>
<li>Delwiche, J. F., Buletic, Z., Breslin, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+of+papillae+number+to+bitter+intensity+of+quinine+and+PROP+within+and+between+individuals%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Relationship of papillae number to bitter intensity of quinine and PROP within and between individuals.</a> Physiol Behav. 74 (3), 329-337 (2001).</li>
<li>Kim, U. K., Jorgenson, E., Coon, H., Leppert, M., Risch, N., Drayna, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positional+cloning+of+the+human+quantitative+trait+locus+underlying+taste+sensitivity+to+phenylthiocarbamide%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Positional cloning of the human quantitative trait locus underlying taste sensitivity to phenylthiocarbamide.</a> Science. 299 (5610), 1221-1225 (2003).</li>
<li>Hayes, J. E., Bartoshuk, L. M., Kidd, J. R., Duffy, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Supertasting+and+PROP+bitterness+depends+on+more+than+the+TAS2R38+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">Supertasting and PROP bitterness depends on more than the TAS2R38 gene.</a> Chem Senses. 33 (3), 255-265 (2008).</li>
<li>Garneau, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Crowdsourcing+taste+research%3A+genetic+and+phenotypic+predictors+of+bitter+taste+perception+as+a+model%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Integr+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Crowdsourcing taste research: genetic and phenotypic predictors of bitter taste perception as a model.</a> Front Integr Neurosci. 8 (33), (2014).</li>
<li>Fox, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+relationship+between+chemical+constitution+and+taste%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">The relationship between chemical constitution and taste.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 18 (1), 115-120 (1932).</li>
<li>Tepper, B. J., Nurse, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fat+Perception+is+related+to+PROP+taster+status%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Fat Perception is related to PROP taster status.</a> Physiol Behav. 61 (6), 949-954 (1997).</li>
<li>Duffy, V. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bitter+receptor+gene+%28TAS2R38.%29%2C+6-n.-Propylthiouracil+%28PROP%29+bitterness+and+alcohol+intake%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Bitter receptor gene (TAS2R38.), 6-n.-Propylthiouracil (PROP) bitterness and alcohol intake.</a> Alcohol Clin Exp Res. 28 (11), 1629-1637 (2004).</li>
<li>Yackinous, C., Guinard, J. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relation+between+PROP+taster+status+and+fat+perception%2C+touch%2C+and+olfaction%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Relation between PROP taster status and fat perception, touch, and olfaction.</a> Physiol Behav. 72 (3), 427-437 (2001).</li>
<li>Fischer, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+related+to+fungiform+papillae+density%3A+The+Beaver+Dam+Offspring+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Chem+Senses%22%5BJournal%5D)">Factors related to fungiform papillae density: The Beaver Dam Offspring Study.</a> Chem Senses. 38 (8), 669-677 (2013).</li>
<li>Feeney, E. L., Hayes, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regional+differences+in+suprathreshold+intensity+for+bitter+and+umami+stimuli%5BTitle%5D)+AND+%22Chemosens+Percept%22%5BJournal%5D)">Regional differences in suprathreshold intensity for bitter and umami stimuli.</a> Chemosens Percept. 7 (3-4), 147-157 (2014).</li>
<li>Saito, T., Narita, N., Yamada, T., Manabe, Y., Ito, T. Morphology of human fungiform papillae after severing chorda tympani nerve. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSaito%2C+T+%22Ann+Otol+Rhinol+Laryngol%22">Ann Otol Rhinol Laryngol</a>. 120 (5), 300-306 (2011).</li>
<li>Miller, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy+of+the+peripheral+taste+system%5BTitle%5D)+AND+%22Handbook+of+Olfaction+and+Gustation%22%5BJournal%5D)">Anatomy of the peripheral taste system.</a> Handbook of Olfaction and Gustation. Doty, R. L. , Marcel Dekker. New York. 521-547 (1995).</li>
<li>Cheng, L. H. H., Robinson, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+distribution+of+fungiform+papillae+and+taste+buds+on+the+human+tongue%29%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Oral+Biol%22%5BJournal%5D)">The distribution of fungiform papillae and taste buds on the human tongue).</a> Arch Oral Biol. 36 (8), 583-539 (1991).</li>
<li>Cruickshanks, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+taste+impairment+in+epidemiologic+studies-The+Beaver+Dam+Offspring+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+N+Y+Acad+Sci%22%5BJournal%5D)">Measuring taste impairment in epidemiologic studies-The Beaver Dam Offspring Study.</a> Ann N Y Acad Sci. 1170, 543-552 (2009).</li>
<li>McNamara, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetics+of+Taste+summative+evaluation+report+prepared+for+Denver+Museum+of+Nature+%26+Science%5BTitle%5D)+AND+%22Independent+Evaluator%22%5BJournal%5D)">Genetics of Taste summative evaluation report prepared for Denver Museum of Nature & Science.</a> Independent Evaluator. , Chicago IL. (2012).</li>
<li>Arvidson, K., Friberg, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+taste%3A+Response+and+taste+bud+number+in+fungiform+papillae%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Human taste: Response and taste bud number in fungiform papillae.</a> Science. 209 (4458), 807-808 (1980).</li>
</ol>

تعلن الكتاب أنه ليس لديهم المصالح المالية المتنافسة.

عن طريق النيابة العامة، والتباين داخل صورة التهم عبر الهدافين مستقل وانخفاض في عدد ضمن هداف بشكل ملحوظ. في حين أن هذا الأسلوب يجعل تحليل كثافة FP البصرية دون videomicroscopy أقل شخصي، تجدر الإشارة إلى أن هذا الأسلوب فقط عشرات FP. DPP لا يمكن أن تضمن أن الهياكل تصنف على أنها FP لها طعم المسام وبالتالي فهي الحليمات الذوقية ولا أن التهم هي تعكس الذوق الحقيقي كثافة برعم 20،23. وطبيعة هذا الأسلوب هو أنه يضع الموثوقية من خلال الاتساق والدقة؛ ومع ذلك، فإنه يمكن أن يتحامل النتائج في اتجاه ثابت. لاختبار دقة بالنسبة لأساليب أخرى باستخدام المقياس الحقيقي للطعم كثافة برعم (على سبيل المثال، videomicroscopy) أن تتجاوز نطاق هذه study.However، من خلال تحديد خصائص مورفولوجية FP أكثر صرامة وإنشاء مفتاح بين شيئين، ويتناول هذا الأسلوب ميلر &amp; تهمة الريدي إلى الحقل الذي أكثر توصيف FPيجب القيام به من أجل الحصول على توافق في الآراء بشأن التشكل والكمي 2. بالإضافة إلى ذلك، فإنها أشارت إلى أن هذا التوصيف قد &quot;يوضح بعض الاختلافات بين الموضوعات وشرح بعض النتائج المتباينة بين المحققين 2.&quot; من خلال توفير طريقة موحدة لالكمي، فإن العديد من التناقضات حول دور FP في الذوق وبالتغذية يمكن تصحيح البحوث ذات الصلة. ويمكن تعديل المفتاح بين شيئين لمختلف تقنيات التقاط الصور. يمكن بسهولة أن يتم تعيين مسافة معروفة لالمقياس إلى القطر المستخدمة في كل مختبر والركود يمكن أن تكون مخفضة إذا وضعت التفاف ساران أو الزجاج على اللسان لالتقاط الصور. في مختبر حصلت، تبين أن اللسان محايد قدمت أفضل تعريف للالحليمات. قد يكون هذا بسبب كمية الضوء في المختبر مما تسبب التفاف ساران أو الزجاج لعكس الضوء مرة أخرى في الكاميرا خلق الوهج الذي جعل الحميرsment الصعب. وقال بعض المعامل وجدوا الصبغة أكثر تحديا لالعد، ولكن العثور على مختبر حصلت على المخفف صبغة الطعام الزرقاء بتركيز 01:36 قدمت النقيض المثالي بين كمئي الحليمات خيطية الشكل وعلى معظم الألسنة. سوف إنشاء مفتاح بين شيئين لFP توصيف تسمح للباحثين في مختبرات مختلفة، وذلك باستخدام مجموعة متنوعة من أساليب التقاط الصور، لتحليل باستمرار الهياكل على لسان ولدي ثقة في الإبلاغ عن نتائجها. وأخيرا، استخدام مفتاح شيئين أن تكون لها أغراض في مناطق أخرى من منهجية علمية حيث الصفات الهياكل أو الأجسام توفر أرقام متناسقة من دراسة إلى أخرى.

الحليمات هي المطبات مرئية على سطح اللسان. هناك أربعة أنواع من الحليمات: كمئي (FP)، تورق، محوط، وخيطية الشكل. بينما تنتشر الحليمات خيطية الشكل على سطح اللسان، ويتم ترجمة محوط فقط على الجزء الخلفي من اللسان، وتوجد تورق على الجانبين. في المقابل، FP تقع نحو الجزء الأمامي من اللسان. تعتبر FP، تورق، والحليمات الكأسية الذوقية لأن لديهم القدرة على احتواء براعم الذوق في حين خيطية الشكل لا. براعم الذوق هي مجموعات من الخلايا المسؤولة عن كشف tastants الكيميائية وtransducing المحفزات إلى إشارة الذوقية في الدماغ. اللعاب والطعام جزيئات تدخل في براعم الذوق من خلال فتحات تسمى المسامات طعم حيث ثم يكون جزيئات طعم إمكانات تفعيل الخلايا الذوقية. ومن المثير للاهتمام، وهناك فروق فردية كبيرة في كثافة براعم التذوق، كما لوحظ لأول مرة في دراسة النسيجية الألسنمن 18 جثة (ميلر، 1988) 1. براعم الذوق نفسها لم تكن مرئية على سطح اللسان، ومع ذلك، المسام طعم مرئية عند استخدام تقنيات التكبير، والإضاءة، وتلطيخ المناسبة مما أدى ميلر وريدي (1990) لتطوير وسيلة لتحديد المسام الذوق وكمئي الحليمات باستخدام videomicroscopy في المعيشة البشر 2. هناك عدد من المعامل قد عدلت تقنية videomicroscopy الأصلية، وذلك باستخدام التصوير الثابتة وضئيلة أو معدومة التكبير. ومع ذلك، منذ كمئي الحليمات هي أسهل بكثير لتصور من هم المسام باستخدام هذه التقنيات الأخيرة، تحولت مختبرات لعد كمئي الحليمات في مكان المسام الذوق. في القيام بذلك، فمن المفترض أن كثافة كمئي حليمة هي مقياس الوكيل معقول لكثافة طعم المسام، على الرغم من العديد من كمئي الحليمات لا تحتوي على مسام طعم أو براعم الذوق 3؛ ليس فقط هي FP أكثر وضوحا ويمكن الوصول إليها من محوط وتورق الحليمات، ولكن التقاط الصور الخاصة بهم هو أقل منظمة الشفافية الدوليةلي المستهلكة من تحليل طعم المسام من خلال طريقة بديلة لvideomicroscopy 2،4. في عام 1990، ميلر وريدي تستخدم هذه التقنية لتجد أن طعم وترتبط كثافة المسام ذات الكثافة FP 3 وهو الأمر الذي أكدته أيضا في بارتوشوكا وآخرون. 5 وبالإضافة إلى هذه العلاقة التشريحية، كما وجدت ميلر والريدي أن 8 أشخاص في الجزء العلوي نصف طعم توزيع كثافة المسام أيضا تصنيف السكروز، كلوريد الصوديوم، وبروبيل ثيوراسيل (دعامة) كما ملحوظ أكثر كثافة من فعل 8 أشخاص آخرين 3. لاحظ عمل لاحق من بارتوشوكا وآخرون (1994) وجود علاقة بين suprathreshold كثافة طعم PROP وكثافة كمئي حليمة، فضلا عن كثافة طعم المسام، في 42 موضوعات 5. أدت هذه الطريقة مريحة للدراسات مؤثرة التقارير أن الأشخاص الذين لديهم العديد من الحليمات ألسنة تثير رد فعل أقوى للعديد من tastants، بما في ذلك tastants فينيل ثيوكرباميد المر (PTC) ودعامة 6،7. المؤسسة العامة للاتصالات وPROP هي tastants مدروسة جيدا تستخدم كثيرا نظرا لارتباط واضح بين حساسية الذوق النمط الظاهري الشخص وراثى الخاصة بهم. وقد أظهرت الدراسات السكانية أن الناس الذين لديهم diplotype المتنحية متماثل من الجين، TAS2R38، لديها حساسية أقل بكثير لدعم من حاملي البديل مهيمن أو متخالف من الجين 10/08. وذكرت هذه الظاهرة وراثية لأول مرة في 1932 عندما أعلن آرثر L. فوكس اكتشافه من &quot;العمى طعم&quot; لPTC 11. بين الناس قادرة على تذوق هذه المركبات المريرة، ذكرت وشدة الطعم يمكن أن تختلف في أي مكان من غير سارة قليلا إلى المرير لايطاق 6. لحساب التباين التي لا يمكن تفسيرها من خلال TAS2R38، وضعت نظرية عليها أنه يمكن أن يعزى إلى كثافة FP على اللسان 4. ومع تقدم الأبحاث الذوق، وFIELتم تقسيم د في مدرستين في التفكير حول هذه النظرية فيما يتعلق بدور FP وحساسية الطعم المر. على الرغم من أن العديد من الدراسات هذا الزعم الأصلية التي الكثافة FP عاملا في PROP الحساسيات 4،6،12،13، كان هناك طوارئ صغير، ولكن المهم أن لديها ادلة لدحضها، وتقديم التقارير عدم القدرة على تكرار الدور 10، 14،15،16. Delwiche وآخرون. (2001) حذر من أن الاتجاه هو متغير بدرجة كبيرة. كثافة FP يفعل الاعتبار ليس موحد للاختلافات في الحساسية المرارة عبر الموضوعات، وكان يمكن إثباتها فقط بالنسبة للاشخاص الذين لا يقل حساسية معتدلة لدعم 7. بالإضافة إلى استخدام تعريف أقل صرامة ميلر وريدي طريقة حول كيفية تحديد FP، فمن المهم أن نلاحظ أنه مع استثناء من نسل سد قندس الدراسات 15 أجرته فيشر وآخرون، فإن معظم الدراسات السابقة كان عينة صغيرة الأحجام التي قد تسهم أيضا في النتائج غير متناسقة علىدور FP في الذوق. لفترة وجيزة، في ميلر وريدي في ورقة منهجية المنوية (1990)، والكتاب الملون ألسنة الزرقاء لتحديد FP بسبب FP تبقى الوردي أثناء الحليمات خيطية الشكل تمتص الصبغة وبدوره الزرقاء. أنها تصنف FP بأنها &quot;هياكل الوردي مدورة حوالي 0.5 ملم في القطر&quot; 2. في حين نصحت الكتاب أنه قبل استخدام هذا الأسلوب لمزيد من العمل التحليلي، وخصائص FP يجب أن تكون محددة بشكل صارم وخلصت إلى أن الاختلاف أشار بالفعل في الأدب &quot;قد تنسب إلى مجموعات سكانية مختلفة الموضوع، وأساليب مختلفة، والمحققين مختلفة&quot; 2، على وقد أدى البحث إلى خصائص المقبولة عموما أن FP هي الجولة 17،18، كبير 2، الوردي أو ملطخة أخف وزنا 2، و ارتق 4. تؤخذ على علاتها، ويبدو أن هذه الخصائص مباشرة جدا الى الامام. في علم الوراثة من طعم مختبر (معمل أو مختبر حصلت)، واستخدام والتقىتم هود تعقيدا بسبب المحاولات الفردية الهدافين &#39;في التصفيات وإعطاء الأولوية لأهمية الخصائص المذكورة أعلاه عند بعض، ولكن ليس كل شيء، من خصائص كانت موجودة. وتشمل هذه المضاعفات الحليمات الصغيرة التي ظهرت الوردي في خضم الحليمات أكبر من ذلك بكثير. اللسان كامل امتصاص الصبغة الزرقاء وبالتالي القضاء على التصنيف على أساس اختلاف اللون. الحليمات مستطيل بدلا من الجولة. والألسنة عدم وجود اختلاف في الارتفاع، ساهمت جميعها لالهدافين الإبلاغ عن التهم FP على نطاق واسع متنوعة من نفس الصورة. وأدت هذه الاختلافات في التحليل أن يراجعوا الأدب من أجل تحديد ذاتية، وتحديد أي استثناءات لخصائص FP المقبولة عموما، وفي نهاية المطاف وضع بروتوكول لبدقة وموضوعية تحديد وتسجيل FP. أولا، يتم وصف شكل FP في الأدب باعتباره مدورة، مثل الفطر هيكل 17،18. ومع ذلك، أبرز ما عداوأشير أيضا إلى أيونات. وأكد ميلر أن مصطلح &quot;كمئي&quot; هي تسمية خاطئة وأن العديد من FP لا تتشكل فطر، ولكن يمكن أن تختلف على نطاق واسع في حجم ومورفولوجية 18. ميليس وآخرون. (2013) كما وصفت العديد من الحليمات التي كانت تعتبر &quot;مشوهة&quot;، حيث كان قطر FP في اتجاه واحد اثنين على الأقل من الانحرافات المعيارية أطول مما كانت عليه في اتجاه آخر 19. وعلاوة على ذلك، تشنغ وروبنسون وجدت أنه عندما تشير FP قبل التلوين، فقد تراوحت من شقة وتصدرت لممدود في المظهر 20. مشيرا إلى الاستثناءات المذكورة أعلاه، وتوصيف وFP يجري جولة ويظهر على شكل فطر أيضا تضييق تعريف. الثانية، وصفت FP لون &quot;الدوائر وردي على خلفية زرقاء&quot; 7 بعد تلطيخ اللسان مع صبغة زرقاء. على الرغم من تلطيخ أخف وزنا وكان المعيار الأكثر ثباتا من FP طوال الأدب انه لم تصفيات موحدة. تشنغ &amp;<html> ؛ لاحظ روبنسون أن FP لم تكن دائما ملطخة طفيفة، مما يجعل من الصعب تحديد وغير مؤكد 20. يبدو إذن أن ألسنة امتصاص الصبغة بشكل مختلف وعلى الرغم من تباين واضح في العديد من اللغات، وأصبحت بعض الأزرق تماما دون أي تمييز حين أن البعض الآخر يفقد فورا عن أي أثر للصبغة زرقاء 21. السمة الثالثة، وحجم FP، يتفق إلى حد ما بين أوراق، تتراوح ما بين 0.5 مم إلى 0.97 مم 6،18. في الأدب وأشار ميلر إلى أن هناك نطاقات حجم اثنين من الحليمات على الأمامي الظهري للسان. كان الحليمات بأقطار أكبر في المقام الأول كمئي والحليمات المخروطية، بينما كان الحليمات التي يبلغ قطرها أصغر معظمهم خيطية الشكل 18. ومع ذلك، مع استثناء من نسل سد قندس دراسة 21، وحجم لم تظهر لتحديد ما إذا كان هيكل هو FP في الأدب، ولكن لم تقدم للالحليمات تصنيفها بالفعل بأنه &quot;كمئي&quot;. _content &quot;&gt; وأخيرا، يتم سرد الارتفاع كما FP الرابع مميزة 4 على الرغم أشار ميلر إلى أن التمييز بين خيطية الشكل وكمئي الحليمات من الصعب عند استخدام هذه المعايير بالقرب من هامش اللسان. وأعطى مثالين من FP التي تختلف كثيرا في الارتفاع، واحد يجري 0.8 مم في الارتفاع في حين كان آخر أقل من 0.1 ملم في الطول، ولكن لا تزال لديها اثنين من المسام الذوق التي لوحظت بشكل واضح (18). وأعقب هذه الملاحظة أيضا، وأكد من قبل Shahbake وآخرون. 4 هذه التعريفات والاستثناءات التي أبلغت عنها تبين أن حقل طعم وقد اعترف منذ وقت طويل التناقض في وصف FP وأوجه القصور في بروتوكول شائعة الاستخدام من ميلر وريدي. في الواقع، ميلر وريدي حض مجال لزيادة تحديد ملامح FP 2. افترضنا أن الهدافين تم إعطاء وزن مختلف لخصائص وإعطاء الأولوية أهميتها بشكل مختلف عند حلمة الثديفشل illae لتلبية كل معيار، كما هو الحال عندما كانت حليمة كبيرة وفطر على شكل، ولكن الملون الأزرق. كان منطقيا أن المحققين من الدراسات التي نشرت سابقا المرجح فعل الشيء نفسه والتي تشكل مجتمعة مع أحجام عينة صغيرة، قد تكون مسؤولة عن نتائج متنوعة قادمة من استخدام هذا الأسلوب. تناول مختبر حصلت هذه الفجوة في منهجية FP من خلال تطوير التوجيهي الذي يعرف كل سمة باستخدام قياسات موضوعية وتعطي الأولوية للخصائص التي تشير إلى الأسبقية في التحليل. هذا الأسلوب هو بروتوكول دنفر الحليمات (DPP)، مفتاح شيئين مع خصائص واضحة ومتميزة من FP لضمان التهم دقيقة وقابلة للتكرار من الصور الرقمية من اللسان. النيابة العامة هو الطريقة المقترحة لتوحيد المستخدمة سابقا ميلر وريدي الأسلوب، وبالتالي إزالة التفسير الفردي وضمان تحقيق نتائج أكثر اتساقا عند تحليل كثافة FP. من خلال القيام بذلك، DPP يمكن استخدامها لأكثر ثقة دetermine دور FP في الذوق. وقد تم تحليل الصور اللسان اتخذت من الموضوعات من قبل العلماء المواطن (الهدافين) من مختبر الذين الموضوعات الحقيقية لهذه الدراسة. وتتألف لاب الأساسية من العلماء مواطن من أعضاء من المجتمع تتراوح أعمارهم (سنة) في الفترة من 16 وحتى منتصف 80S. ويصف تقرير تقييم تلخيصي بتكليف من متحف في عام 2012 العلماء المواطن على أن لها مصلحة قوية في مجال العلوم ومع الثلثين بعد أن حصل على شهادة جامعية في تخصص علمي (22). يتم تجنيد العلماء مواطن مرشح حاليا عن طريق الكلمة من فمه، يجب بنجاح إكمال عملية مقابلة مع المتطوعين المخضرم في المتحف، والخضوع لفترة اختبار في معرض الصحة الدائم للمتحف، إكسبيديشن الصحة، قبل أن تتاح لهم الفرصة لتقديم طلب للحصول على وظيفة في مختبر. مرة واحدة مقبولة في المختبر، يخضع العلماء المواطن التدريب لمدة 12 أسبوعا لتصبح معتمدة على الانخراط موضوع الإنسانالصورة. وبعد هذه الشهادة، وهم قادرون على اتخاذ وحدات تدريبية على تقنيات مختلفة في مختبر (على سبيل المثال العد الحلمية، استخراج DNA) وبعد شهادات إضافية وتدابير مراقبة الجودة العادية، هؤلاء العلماء المواطن لديهم الفرصة للمشاركة بنشاط في تحليل البيانات. العلماء المواطن بوقتهم ولا تعويض عن مساهماتها في المتحف.

<table><tbody><tr><td>صورة J</td><td>المعاهد الوطنية للصحة</td> <td><a href = "http://rsb.info.nih.gov/ij" >http://rsb.info.nih.gov/ij< / a></td><td></td></tr> <tr><td>صبغة طعام ، ظل أزرق غامق</td><td>Esco</td><td>http://escofoods.com/blue-food-coloring.html</td><td></td></tr><tr><td>رايون معقم يميل OB / GYN قضيبات</td><td>البيوريتان</td><td>25-808 1PR</td><td></td></tr><tr><td>الصف 1 ورق ترشيح</td><td>Whatman Whatman Whatman</td><td>No.: 1001-325</td><td></td></tr><tr><td>Coolpix P100 (10.3 ميجابكسل) و P500 (12.1 ميجابكسل)</td><td>نيكون</td><td>http://imaging.nikon.com/lineup/coolpix/</td> <td>لا يبدو أن أي من الطرازين متاح على الموقع</td></tr> أي <tr><td>مناشف يدوية ورقية</td><td>Kleenex</td><td>https://www.kleenex.com/HandTowelsDetail.aspx</td><td></td></tr></tbody></table>

بروتوكول الحليمات دنفر للتحليل الموضوعي لكمئي الحليمات

Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae

الهدف من البروتوكول الحليمات دنفر هو استخدام مفتاح بين شيئين لتعريف وتحديد أولويات خصائص كمئي الحليمات (FP) لضمان تسجيل متناسقة بين الهدافين. هذا البروتوكول يبني الخروج من الحاجة التي نشأت من خلال العقدين الأخيرين من البحوث طعم باستخدام FP كوكيل لكثافة طعم المسام. تاريخيا تم تحليل كثافة FP باستخدام ميلر وريدي عام 1990 الأوصاف من التشكل: جولة، ملطخة أخف وزنا، بوجه عام، ومرتفعة. في هذا العمل، محذر المؤلفون أن تعريفات أكثر صرامة من FP التشكل اللازمة لتكون الخطوط العريضة. على الرغم من هذا دعوة إلى العمل، وقد تم متابعة الأدب نادرة، ومعظم الدراسات المستمرة في الاستشهاد ميلر وريدي في العمل الأصلي. ونتيجة لذلك، كانت تقارير كثافة FP متغير بدرجة كبيرة و، جنبا إلى جنب مع أحجام عينة صغيرة، يمكن أن تسهم في استنتاجات متباينة حول دور FP في حساسية الذوق. في علم الوراثة من طعم مختبر استكشاف هذه incon واضحsistency في العد وجدت أن الهدافين تم إعطاء الأولوية بشكل فردي على أهمية هذه الخصائص بشكل مختلف وليس لديه توجيهات لأنه عندما كان حليمة بعض، ولكن ليس كل شيء، من الصفات المبلغ عنها FP. ونتيجة لهذا الذاتية هي التهم FP شديدة التباين من نفس الصورة اللسان. وقد تم تطوير بروتوكول الحليمات دنفر الى تدارك هذه النتيجة من خلال استخدام مفتاح شيئين أن المزيد من يعرف وأولوياتها أهمية الخصائص التي وضعتها ميلر وريدي. الطريقة المقترحة يمكن أن تساعد في خلق وسيلة معيارية لقياس FP للباحثين في مجال الذوق والدراسات في مجال التغذية.

وسجلت هنا صورة تمثيلية من قبل اثنين من الهدافين الفردي عند استخدام منهجية ميلر وريدي شائعة الاستخدام لتحديد FP استنادا إلى المعايير مجال الجولة، كبيرة، وردي أو ملطخة أخف وزنا، ومرتفعة، ثم سجل نفس الصورة من قبل اثنين من الهدافين استخدام النيابة العامة. التهم المعروضة هي تمثيلية من التباين الملحوظ باستخدام طريقة الأصلي بالمقارنة مع تباين أقل باستخدام DPP. <img alt="الرقم 4" src="/files/ftp_upload/52860/52860fig4.jpg" /> الرقم 4: ميلر وريدي الكمي مقابل DPP الكمي الصورة على اليسار هو ممثل التهم اثنين من الهدافين &#39;باستخدام ميلر وريدي الطريقة. الصورة على اليمين تمثل تهمتين الهدافين &#39;باستخدام DPP. الأحمر هو هداف 1، الأصفر هو هداف 2، الأخضر هو الهدافين 1 و 2. الموثوقية الإحصائية لموانئ دبيوP درس سابقا باستخدام نموذج خطي مختلطة لتقييم التغير 10. لفترة وجيزة، لتوليد البيانات لتقييم الدور الذي تلعبه النيابة العامة في اتساق الدرجات، وسجل خمسة عشر الصور مرتين. في أول دفعة من عشرات، وتستخدم DPP الهدافين السذاجة ميلر وريدي طريقة 2. وكان الهدافين ثم تدريبهم على استخدام النيابة العامة وكان rescored الصور بشكل فردي دون توافق خطوة النهائية هو موضح في القسم 2.7 تفاصيل ضبط الجودة (الشكل 5). كان FP مجموعة البيانات النتيجة المستخدمة في النموذج المختلط لتقييم الاختلافات جنبا إلى جنب نظرا لبروتوكول (الشكل 6)، التباين داخل هداف والتفاعل بينهما. وأظهر هذا النموذج اختلاف كبير في التهديف عند استخدام الأسلوب ميلر وريدي مقارنة DPP (ع القيمة &lt;1 × 10 -6) مع النيابة العامة مما أدى إلى عدد أكبر من قبل 6.99 (SE = 0.99). كانت 5.2٪ من التباين في النتيجة بسبب التدريب، 25.9٪ نتيجة لهداف، والباقي بسببلتقلبه تحديدا إلى الصورة 10. المقبل، لتوليد البيانات لتحديد التباين داخل هداف، وسجل سلسلة من ثلاثين صورة في ترتيب عشوائي من قبل 11 شخصا. دون علم الهدافين، وتضمنت هذه السلسلة من الصور الثلاث الصور التي تكررت. لاحظنا الفرق الكبير في درجة تقلب مقارنة صور مميزة versusrepeated الصور. <img alt="الرقم 5" src="/files/ftp_upload/52860/52860fig5.jpg" /> توفر DPP-السذاجة مقابل المشاركة DPP تدريب الفريق boxplots عشرات المعلقين على 15 صورة قبل وبعد التدريب بروتوكول الحليمات دنفر: الرقم 5. لكل boxplot، وشغل في دائرة يشير إلى متوسط ​​في حين أن دائرة مفتوحة تشير عزلاء. <img alt="الشكل (6)" src="/files/ftp_upload/52860/52860fig6.jpg" /> الرقم 6: تغيير في هداف الفرق يمثل الرمادي ركان التباين الهدافين فردي قبل التدريب DPP. الأسود هو نفس المنصب هداف DPP التدريب.

نحن هنا نقدم بروتوكول لقياس كثافة كمئي حليمة من الصور الرقمية. هذا الأسلوب يعتمد تحديد الأولويات والمقاييس مميزة الموضوعية في عمل وصفي الأصلي على كمئي الحليمات التي كتبها ميلر وريدي (1990).

The goal of the Denver Papillae Protocol is to use a dichotomous key to define and prioritize the characteristics of fungiform papillae (FP) to ensure ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو قياس الحليمات الورقية الفطرية بطريقة متسقة بين التقييمات والمختبرات من خلال استخدام مفتاح ثنائي. ويتم تحقيق ذلك أولاً عن طريق صبغ لسان الخاضع للفحص باللون الأزرق باستخدام صبغة غذائية، ولصق ورقة ترشيح بها فتحة بقطر 1 cm على اللسان. وتتمثل الخطوة الثانية في التقاط صورة مقربة عالية الجودة للسان الخاضع للفحص.بعد ذلك، يستخدم القائم بالتقييم المفتاح الثنائي لفحص شكل الحليمة المرشحة وحجمها ولونها وارتفاعها. تُصنف الحليمة على أنها حليمة ذات شكل فطري إذا لم تكن غير متبلورة، وكان لونها وردياً أكثر من الخلفية بمقدار 0.5 millimeters على الأقل، ولم تكن غائرة. وتتمثل الخطوة النهائية في مطابقة أعداد الحليمات بين تقييمين وضمان أن تكون الأعداد ضمن نطاق 10% من بعضها البعض.في نهاية المطاف، يُستخدم بروتوكول Denver Papillae لتحديد وتحديد أولويات خصائص الحليمات الفطرية لضمان اتساق العدّ عبر التقييمات والمختبرات المختلفة. وتتمثل الميزة الرئيسية لهذه التقنية مقارنة بالطرق الحالية، مثل بروتوكول Miller and Read، في أنها تقلل من ذاتية التقييمات عند قياس الحليمات الفطرية كمياً. ويتحقق ذلك من خلال التعريف الواضح لكل خاصية ومن خلال استخدام مفتاح ثنائي لضمان أن جميع التراكيب المصنفة كحليمات فطرية تستوفي كل معيار من هذه المعايير.تساعد هذه الطريقة في الإجابة على أسئلة رئيسية في مجال التذوق، مثل تحديد الدور الذي تلعبه كثافة الحليمات الفطرية الشكل (fungi formm papillae)، إن وجد، في إدراك المذاق. لقد خطرت لنا الفكرة الأولى لهذه الطريقة عندما طلبنا من علمائنا المواطنين عد الحليمات الفطرية الشكل باستخدام طريقة ميلر وريدينج (Miller and Reading)، ولكننا لاحظنا أن نتائج العد تفاوتت بشكل كبير لصورة اللسان نفسها. وقد كشف التحدث مع القائمين على الرصد أنهم أعطوا أولويات مختلفة للخصائص، وتفاوتوا في كيفية عد الحليمات التي استوفت بعض المتطلبات ولكن ليس جميعها.سيقوم رودي توريس، وهو عالم مواطن متطوع في مختبر وراثة التذوق، بشرح الإجراء. ولتحضير الأشخاص الخاضعين للتجربة لهذا الإجراء، اعرض عليهم صورة توضح كيفية اتخاذ الوضعية المناسبة وشكل الصورة التي سيتم التقاطها. وجه المشاركة لتجفيف لسانها باستخدام منشفة ورقية، مع ترك اللسان بارزاً من الفم.باستخدام مسحة رايون معقمة ذات طرف بطول بوصة واحدة، ضع حوالي 3 mL من صبغة طعام زرقاء بتركيز 1:36 على قمة اللسان. وجّه الشخص الخاضع للاختبار لإعادة لسانه إلى داخل الفم والبلع لإزالة الصبغة الزائدة. بعد ذلك، وجّه الشخص لاتخاذ الوضعية الموضحة في الصورة بحيث يكون الذقن مستنداً على اليدين والمرفقان مرتكزين على الطاولة لضمان الثبات.وجّه الخاضعة للفحص لمد لسانها لمسافة مريحة وتثبيته برفق بين أسنانها. قم بلصق قطعة من ورق الترشيح بطول 2.5 سنتيمتر وبها فتحة دائرية بقطر 10 مليمتر على طرف الجزء الداخلي من الجانب الأيسر للسان. وبجوار الخط المتوسط، ثبّت كاميرا رقمية عالية الجودة من نوع (point and shoot) على حامل ثلاثي القوائم لضمان الاستقرار.باستخدام إعداد الماكرو، التقط ثلاث صور مقربة على الأقل للسان، بحيث تشمل كامل القطع الدائري الذي يبلغ قطره 10 مليمتر لضمان رؤية جميع الفطريات أو الأشكال أو الحليمات أو الـ FP ضمن تلك المنطقة. قم بالتكبير إلى الحد الذي يتم فيه تصوير القطع الدائري بالكامل مع البقاء ضمن نطاق التكبير الموصى به للكاميرا. تأكد من أن مستوى عدسة الكاميرا موازٍ لمستوى اللسان وأن القطع الدائري يظهر بشكل دائري في الصورة.بدلاً من استخدام صور المراجعة المستطيلة، تأكد من أنها عالية الجودة ومفيدة لعملية العد. ابدأ هذا الإجراء بتحميل الصور التي تم التقاطها للسان نفس الشخص على جهاز الكمبيوتر. اختر صورة واحدة فقط لمزيد من التحليل بناءً على وجود تعريف واضح بين تراكيب اللسان عند أعلى مستوى تكبير وأقل زاوية تشويه، بحيث يكون اللسان عريضاً ومسطحاً في مواجهة الكاميرا.افتح الصورة الخام المختارة في برنامج Image J مفتوح المصدر. انقر على plugins، وفي القائمة المنسدلة، انتقل إلى analyze وانقر على cell counter. عند فتح cell counter، انقر على initialize لربط الصورة بـ cell counter. استخدم تكبيراً قياسياً بنسبة 50% لضمان الاتساق بين النتائج وللاستخدام في الخطوات اللاحقة.لتقدير fp، حرك هذه الصورة إلى الجانب الأيسر من الشاشة بجوار عداد الخلايا. سيُشار إلى هذه الصورة باسم نسخة؛ افتح نسخة ثانية من الصورة الخام لقياس أقطار الحليمات التي يتم تحديد كميتها. حرك هذه النسخة إلى الجانب الأيمن من الشاشة حتى لا يتم الخلط بين النسختين عن طريق الخطأ.سيُشار إلى الصورة الثانية باسم النسخة B. قم بتكبير أو تصغير الصورة حسبما يراه المقيم مناسباً خلال عملية التقييم. انقر على أداة الخط باستخدام النسخة B. قم بالتكبير قدر الإمكان لرسم قطر بدقة عبر الدائرة الداخلية لورق الترشيح التي يبلغ قطرها 10 millimeter عند أي زاوية، ثم انقر على "تحليل وضبط المقياس" (analyze and set scale). أدخل المسافة المعروفة كـ 10.تحقق من صحة المقياس عن طريق قياس زاوية بديلة، وتأكد من أن نطاق القطر يتراوح بين 9.8 إلى 10.2 مليمتر. يأخذ بروتوكول Denver PAPALE أو DPP في الاعتبار الشكل واللون والحجم وانحسار كل حليمة مرشحة لتحديد ما إذا كانت تمثل fp. لن يتم عرض إجراء تدريب الدرجات على استخدام المفتاح الثنائي في هذا الفيديو، ولكنه متاح في نص البروتوكول المرفق لبدء عملية التقييم.حدد ما إذا كانت الحليمة المرشحة غير متبلورة أو عديمة الشكل عند تكبير 50%. تحقق مما إذا كان هناك شكل هندسي متعارف عليه، مثل الشكل البيضاوي، أو المكعبي، أو المستدير. إذا لم يتوفر شكل هندسي، انتقل إلى نافذة عد الخلايا وانقر فوق "النوع واحد" (type one).نسخة A. انقر فوق الحليمة المرشحة لتمييزها على أنها غير متبلورة وليست حليمة شكلية (fp). يتيح النقر على الأنواع من واحد إلى أربعة في هذه الخطوة والخطوات اللاحقة للمقيمين معرفة أنهم قد تعاملوا مع جميع الحليمات المرشحة، كما يحدد القاعدة التي تم انتهاكها عند رفض البنية. إذا كانت الحليمة المرشحة ذات شكل هندسي، فانتقل إلى الخطوة التالية لفحص لونها، وارجع إلى النسخة A وحدد ما إذا كان هناك أي تمايز لوني على سطح اللسان.إذا كان هناك تمايز في اللون، ولكن الحليمة المرشحة زرقاء والحليمات المحيطة بها أفتح لوناً، انتقل إلى نافذة عد الخلايا وانقر على النوع الثاني في عداد الخلايا في النسخة A. انقر على الحليمة المرشحة لتمييزها كحليمة زرقاء ثانية وليست fp. إذا لم يكن هناك تمايز في اللون، أو إذا ظل أي جزء من الحليمة المرشحة وردياً أو مصبوغاً بلون أفتح، فاصعد إلى الخطوة التالية لتحديد الحجم. باستخدام النسخة B، قم بالتكبير وصولاً إلى المسافة التي تتيح رؤية حدود الحليمة المرشحة بوضوح.انقر على أداة الخط وقم بالقياس عبر البعد الأطول للحليمة المرشحة. انقر، ثم حلل، ثم تحقق مما إذا كان الطول المقاس 0.499 millimeters أو أقل. قم بالقياس مرة أخرى لضمان الدقة.إذا كان الطول لا يزال 0.499 مليمتر أو أقل، انقر على النوع ثلاثة في نافذة عد الخلايا، ثم انقر على المرشح لتمييزه على أنه صغير جدًا وليس حليمة فطرية (fp). أما إذا كان الطول المقاس 0.5 مليمتر أو أكثر، فاستمر في فحص تراجعها لتقييم ما إذا كانت الحليمة المرشحة ذات ارتفاع موحد مع بقية اللسان أو مرتفعة. وإذا كانت الحليمة موجودة في شق، فحدد ارتفاعها مقارنة بالبنى الأخرى الموجودة في الشق، وليس مقارنة بسطح اللسان.إذا كانت الحليمة أدنى من الحليمات المحيطة بها، فانقر على النوع الرابع في نافذة عد الخلايا، وفي النسخة A، انقر فوق الحليمة المرشحة لتمييزها على أنها غائرة وليست حليمة شكلية (fp). أما إذا كانت الحليمة المرشحة إما ذات ارتفاع موحد مع بقية اللسان أو مرتفعة، فانقر على النوع الخامس وقم بتمييزها على أنها حليمة شكلية (fp). ويمثل إجمالي النوع الخامس هذا درجة FP الخام.دوّن درجة FP الخام في دفتر ملاحظات لحفظ نسخة منها، ثم انقر فوق تصدير الصورة في نافذة عدّ الخلايا واحفظها وفق نظام التسمية المعتمد في المختبر. سيتيح ذلك فتح النسخة A في المستقبل للاحتفاظ بالعلامات الملونة من الأنواع واحد إلى خمسة. لن يتم حفظ درجة FP الخام من أجل مراقبة الجودة.يجب تقييم كل صورة بواسطة درجتين منفصلتين ثم مقارنة هاتين الدرجتين. إذا كانت درجة FP الخام الأعلى تقع ضمن نطاق 10% من متوسط درجة FP الخام الأدنى، تُعتمد الدرجتان معاً كدرجة FP توافقية. أما إذا اختلفتا بمقدار يتجاوز 10%، فيتم عرض كلتا الصورتين المقيمتين على الشاشة.استخدم أنواع العدادات من واحد إلى أربعة للمساعدة في مناقشة التناقضات والاتفاق على درجة إجماع نهائية. في حال تعذر الوصول إلى إجماع، يتم استدعاء تقييم ثالث لتقييم الصورة ثم إجراء حوار مع التقييمين الآخرين. وقد تم تقييم صورة ممثلة في البداية من قبل مقيمين فرديين باستخدام منهجية Miller و3D الشائعة لتحديد FP.ثم تم تقييم الصورة نفسها من قبل مقيمَين باستخدام DPP. يمثل اللون الأحمر المقيم الأول، واللون الأصفر المقيم الثاني، واللون الأخضر المقيمين الأول والثاني معاً. تظهر هذه الأعداد نموذجاً للتباين العالي الملحوظ عند استخدام الطريقة الأصلية مقارنة بالتباين المنخفض عند استخدام DPPA لمقارنة تقييم المتغيرات لـ 11 تقييماً فردياً.أظهرت نتائج مرحلة ما قبل التدريب على DPP (الموضحة باللون الرمادي) وما بعد التدريب على DPP (الموضحة باللون الأسود) انخفاضاً ملحوظاً في درجة التباين بعد التدريب. وبمجرد إتقان هذه التقنية، يمكن إنجازها في أقل من خمس دقائق لكل صورة. وأثناء تنفيذ هذا الإجراء، من المهم أخذ فترات راحة متكررة لضمان دقة النظر في كل صورة والتأكد من رؤية كل حليمة مرشحة.بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تقدير كمية الفطريات التي تشكل حليمات بطريقة متسقة باستخدام مفتاح ثنائي التفرع.

denver-papillae-protocol-for-objective-analysis-of-fungiform-papillae

Research

JoVE Journal

Neuroscience

علم الأعصاب

تمتعت معرفة الآليات الجزيئية الكامنة وراء تنبيغ ذوقي مؤخرا تقدما كبيرا ، إلى حد كبير بسبب استخدام النماذج الحيوانية. ومع ذلك ، فإن التنوع الواسع في حساسية الذوق والنوعية بين الدراسات أوامر الثدييات في الأنسجة البشرية. وصفنا تقنية خزعة لجمع الخلايا الحية من طعم حليمات اللسان على الإنسان.

تقنية لجمع كمئي (التذوق) النتوئات الإنسان من اللسان

نحن تهدف لوضع بروتوكول للتكرار لعزل والمحافظة عليها على المدى الطويل الثقافات من الخلايا البشرية كمئي حليمات الذوق. واستمرت بنجاح من خلايا الحليمات كمئي الإنسان التي تم الحصول عليها بواسطة الخزعة في ثقافة لأكثر من ثمانية ممرات (12 شهرا) دون فقدان للحيوية.

العزلة والثقافة من خلايا الإنسان حليمات كمئية طعم

في هذا الفيديو ، نصف عزل ظهارة الحليمات المحيطة (CVP) من لسان الفئران.

عزل الحليمات المحيطة (CVP) بالظهارة من نموذج الفأر: إجراء إنزيمي لفصل ظهارة CVP عن لسان الفأر

استقبال كيميائي عن طريق الفم من الأحماض الدهنية وبالاشتراك مع النظام الغذائي وأذواقهم الغذائية الدهنية قد تمكن من تحديد الآليات التي تشارك مع تطور البدانة والسبب قد يكون من الصعب بالنسبة للعديد من الأفراد التغييرات الغذائية.

قياس الأحماض الدهنية عن طريق الفم العتبات، الدهون الإدراك، الأغذية الدهنية الميل، والحليمات الكثافة في البشر

هي الدافع دراسات التنمية الحنك قبل حدوث الشق الحلقي وهو عيب خلقي الذي يفرض عبئا صحية هائلة، ويمكن أن يترك تشوهات دائمة. علينا أن نظهر هنا تقنية لرفوف الثقافة حنكي التي يمكن استخدامها لدراسة مسارات الإشارات المختلفة المشاركة في التنمية حنكي والانصهار.

طريقة دراسة حلقي فيوجن باستخدام ثابت الجهاز الثقافة

تغييرات في ميكروبيومي عن طريق الفم طوال مرحلة الطفولة الاهتمام المتزايد. مقارنة للدراسات ميكروبيومي مختلفة يكشف عن عدم وجود بروتوكولات أخذ العينات موحدة. يجعل مساحة محدودة أخذ العينات ناصف سوبجينجيفال السليمة للأطفال صعبة. ورقة نقطة أخذ العينات المعروضة هنا بالتفصيل كأسلوب الاختيار لهذا المجال.

بيوفيلم الشفوي أخذ العينات للتحليل ميكروبيومي في الأطفال الأصحاء

هذا البروتوكول تدابير الردود الذوق البشري ويشمل تقييما موجزاً تشريحية واختبار طعم قصيرة، وأسلوب التحقق من صحة باستخدام عن الإحساس والذوق الوراثي هذا الموضوع مستقبلات.

امتحان الذوق: اختبار قصيرة، وتم التحقق من صحتها

تصف هذه الورقة طرق إعداد الأنسجة ، وتلطيخ ، وتحليل براعم طعم الفطريات والحواف والحنك الكاملة والناعمة التي تنتج باستمرار براعم الذوق الكاملة وال سليمة (بما في ذلك الألياف العصبية التي ت الداخلي لهم) والحفاظ على العلاقات بين الهياكل داخل براعم الذوق والبابيات المحيطة بها.

كامل جبل تلطيخ، والتصور، وتحليل الفطريات، Circumvallate، وبراعم طعم الحنك

توضح هذه المقالة بالتفصيل بروتوكول لelectroporate في الرحم قشرة الدماغ والحصين في E14.5 في الفئران. علينا أن نبين أن هذا هو وسيلة قيمة لدراسة التشعبات والعمود الفقري في هاتين المنطقتين الدماغي.

التصور والتلاعب الجيني من التشعبات والاعمده الفقريه في قشرة الدماغ والحصين ماوس باستخدام<em&gt; في الرحم</em&gt; Electroporation

تم توسيع الخلايا neuroprogenitor الإنسان (الشخصيات) في ظل الظروف المتكاثرة. وقد تختلف الشخصيات في الثقافات الخلايا العصبية الغنية في وجود مزيج من neurotrophins. تم الكشف عن علامات العصبية التي كتبها المناعي تلطيخ. لعزل السكان نقية من الخلايا العصبية، وقد تختلف الشخصيات في PEN الشرائح الغشاء وتم إجراء الليزر التقاط تسليخ مجهري.

لقطة ليزر تسليخ مجهري من الخلايا العصبية من الخلايا المتمايزة Neuroprogenitor الإنسان في الثقافة

تعلم بروتوكول دنفر لقياس كثافة الحليمات الفطرية على اللسان باستخدام صور رقمية ومفتاح ثنائي. يوفر هذا الأسلوب موضوعية عالية للبحث في علوم التذوق والأعصاب.

بروتوكول الحليمات دنفر للتحليل الموضوعي لكمئي الحليمات

استكشف المزيد من الفيديوهات