بروتوكول لالفئران الإسكان في بيئة المخصب

الهدف من هذا الإجراء هو توفير التفاصيل اللازمة لإسكان والحفاظ عليها في الإثراء البيئي ، مما ينتج عنه تأثيرات استقلابية قوية ومضادة للسرطان في الفئران. يتم تحقيق ذلك عن طريق إعداد بيئة السكن المخصبة أولا في صندوق كبير به أشياء مثل العجلات ومصادر التشغيل والأقفاص والأنابيب والسجلات والأقفاص. الخطوة الثانية هي تعريف بالبيئة الجديدة.

بعد ذلك ، يتم الحفاظ على البيئة المخصبة عن طريق تغيير موقع ونوع الأشياء في الحاوية وتوفير الطعام والمياه العذبة بشكل منتظم. الخطوة الأخيرة هي تنظيف الأشياء التي تم استبدالها في البيئة حتى تكون جاهزة للتبادل في المستقبل. في النهاية ، عند القتل الرحيم وتحليل الأنسجة الحيوانية.

تظهر تقنية التخصيب البيئي هذه انخفاضا في السمنة ، وزيادة مقاومة إنفاق الطاقة ضد السمنة الناجمة عن النظام الغذائي ، وتبديل النمط الظاهري للدهون البيضاء إلى البنية عن طريق تنشيط محور الخلايا الشحمية العصبية تحت المهاد. تصف هذه الطريقة التفاصيل المتعلقة بإعداد بيئة غنية للقوارض المختبرية التي تعزز مقاومة السرطان وأمراض التمثيل الغذائي. أولا ، قم برش ومسح الجزء الداخلي من صندوق التخصيب الكبير بمطهرات البوبوريسيدين.

باتباع تعليمات الشركة المصنعة ، امسح الصندوق بورق منقوع بماء الصنبور بنسبة 30٪ أو منشفة ومجفف بمنشفة ورقية للتخلص من أي رائحة من المطهر السابق. استخدم كوخ الثلج من الأنابيب البلاستيكية مع عجلات من نوع SOR وغيرها من القفص البلاستيكي المتنوع مثل الألعاب في البيئة المخصبة. اغسل هذه الألعاب كما كان من قبل ، واستخدم عجلات تشغيل معدنية تم غسلها كما كان من قبل.

إذا بدأ الطلاء الموجود على العجلة في التلاشي بحيث تصبح العجلة صاخبة عندما تسير عليها ، فضع كمية صغيرة من الفازلين على مكان توصيل العجلة والمحور. استخدم جذوع الأشجار الخشبية في البيئة المخصبة. قم بتنظيف جذوع الأشجار عن طريق إزالة أي فراش أو حطام آخر يدويا.

ثم قم بتعقيم جذوع الأشجار عن طريق تعقيمها في دورة جافة أو دورة نسيج تصل درجة حرارتها إلى 121 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. استخدم أقفاص تغذية نظيفة بأبعاد 29 سم × 18 سم × 12.5 سم و 30.5 سم × 19 سم × 14 سم لتثبيتها. يقطع رف سلك التغذية والشرب حفرة قطرها خمسة سنتيمترات على الأقل من الجزء السفلي الأمامي من القفص حتى تدخل الفئران وتخرج منها.

للبدء. لفراش مختبر الذرة ربع بوصة في صندوق التخصيب النظيف إلى الكبير على عمق من سنتين إلى 2.5 سم. بعد ذلك ، ضع اثنين أو ثلاثة من جذوع العصا الأبهرية السابقة في أحد أركان الصندوق لعزل مساحة تبلغ حوالي 1،225 سم مربع.

ثم في المنطقة المعزولة بواسطة جذوع الأشجار ، ضع ثلاثة مواد لاصقة مع عجلات SOR في الأعلى. تأكد من أن العجلات بها مساحة للدوران بحرية. الآن قم بتجميع الأنبوب البلاستيكي معا بحيث تتفرع أذرع متعددة من قطعة التوصيل المركزية.

ضع هذا الأنبوب في منتصف الصندوق عند زاويتين من سلة المهملات. ضع قفص تغذية مملوء بنفس الفراش مثل سلة المهملات. يجب أن تكون الفتحة الموجودة في مقدمة كل قفص تغذية متجهة نحو مركز الصندوق.

ضع سلك طعام وماء يحتوي على طعام الفأر فوق كل قفص تغذية. أضف زجاجة الماء. ضع عجلة بطول 11.5 سم وعجلة 20.5 سم وعجلة 28 سم في سلة المهملات.

ثم ضع أربعة إلى خمسة أقفاص بلاستيكية أخرى مثل الألعاب أو الأنفاق في جميع أنحاء صندوق التخصيب. قم بتغطية الحاوية بورق ترشيح عازل دقيق واستخدم مشابك الموثق لقص ورق الترشيح في سلة المهملات. عند وضع في سلة التخصيب من قفص قياسي ، ضع القفص في سلة المهملات على جانبه حتى تتمكن من التحرك بحرية من القفص القياسي إلى صندوق التخصيب.

لا تسمح بنقل مواد التعشيش إلى صندوق التخصيب. يمكن إيواء 10 إلى 20 من نفس العمر والجنس والسلالة الجينية في البيئة المخصبة في وقت واحد. تأكد من مراقبة يوميا بحثا عن علامات المرض أو الضيق.

إذا لزم الأمر ، تعامل مع برفق لفحص حالتها مرتين في الأسبوع. تحقق من مستويات الطعام والماء ، وتأكد من أن الطعام والماء سيستمر خلال اليومين المقبلين. أيضا ، قم بتصويب عجلات الجري وألعاب التخصيب بحيث تنتشر ويمكن استخدامها بسهولة.

استبدل أي عناصر تخصيب متسخة مرة واحدة في الأسبوع ، من الناحية المثالية عند إزالة الفئران من البيئة. للأغراض التجريبية ، قم بإزالة أقفاص التغذية ورفوف الأسلاك واستبدلها بأقفاص ورفوف نظيفة مملوءة بالطعام الطازج. استبدل زجاجات المياه بزجاجات مياه نظيفة.

أعد ترتيب عناصر التخصيب بشكل حاسم بحيث يتم الاحتفاظ بالجوانب الرئيسية للإعداد، ولكن يتم وضع عناصر التخصيب بشكل مختلف. بقعه. افحص باقي صندوق التخصيب الكبير ونظفه إذا لزم الأمر. عن طريق التخلص من القمامة المتسخة ونشر فراش نظيف جديد مرة كل أسبوعين.

عند إجراء التربية الأسبوعية ، اغسل الألعاب يدويا أو بإرسالها عبر غسل القفص. كل شهر ، قم بتنظيف غالبية القمامة عن طريق إزالة ألعاب التخصيب وأقفاص التغذية واستخراج القمامة. استبدلها بفضلات طازجة مع التأكد من وجود سنتيمترين من الفراش في جميع مناطق القفص مرة كل ثلاثة أشهر أو كما هو مطلوب بموجب بروتوكول الخاص بك ، وقم بإزالة جميع الفراش والألعاب وتطهير صندوق التخصيب عن طريق الغسيل كما كان من قبل التحكم في المنزل مجموعة في نفس دورة الظلام الفاتحة لمدة 12 ساعة.

نظرا لأن الفئران في البيئة المخصبة في أقفاص معزولة دقيقة ، قم بتوفير نفس فراش كوز الذرة في قفص التحكم كما هو الحال في البيئة المخصبة ، وأضف عشا مقاس أربعة سنتيمترات × أربعة سنتيمترات مضاء بعش صانع مايستر يضم ثلاثة إلى خمسة فئران من نفس الجنس في قفص فأر عادي. لا توفر أي أنبوب لعبة أو قفص في القفص. قم بتضمين رف سلكي في القفص لحمل الطعام وزجاجة ماء إذا لم يتم توصيل القفص بنظام سقي أوتوماتيكي.

راقب صحة يوميا ، وتأكد من حصول على الكثير من الطعام والماء. استبدل أو نظف الأقفاص وأسلاك التغذية والطعام والماء. مرة واحدة في الأسبوع ، قم بتنظيف الأقفاص والرفوف السلكية كما كان من قبل.

تم إيواء ذكور الفئران البالغة من العمر ثلاثة أسابيع في بيئة غنية أو أقفاص تحكم لمدة خمسة أسابيع قبل تلقيح الورم تحت الجلد ب 10 إلى خمس خلايا لكل. تظهر النتائج أوزان ورم الورم الميلانيني B 16 بعد 17 يوما من التلقيح. تتكون كل مجموعة من 10.

تمثل العلامة النجمية قيمة P أقل من 0.05 محسوبة بواسطة اختبار الطلاب هنا. تعرضت الفئران البالغة من العمر ثلاثة أسابيع للتخصيب البيئي لمدة ستة أيام. ستة أيام في بيئة مخصبة ، انخفضت خلف الصفاق ، والأنسجة الدهنية البيضاء ، ووزن وسادة الدهون.

يوضح هذا الرسم البياني أن ستة أيام في بيئة غنية ، انخفضت الأنسجة الدهنية البنية ، والأنسجة الدهنية البيضاء للبشرة ، والأنسجة الدهنية البيضاء خلف الصفاق ، وأوزان وسادة الدهون بالنسبة لوزن الجسم. يشترك الرسم البياني التاليان في نتائج الفئران الموجودة في بيئة غنية لمدة أربعة أسابيع كما هو موضح هنا ، أربعة أسابيع في التخصيب البيئي ، وانخفاض أوزان وسادة الدهون في جميع أنواع الدهون باستثناء الأنسجة الدهنية البنية. أربعة أسابيع في التخصيب البيئي ، انخفضت أوزان وسادة الدهون بالنسبة لوزن الجسم لجميع أنواع الدهون باستثناء الأنسجة الدهنية البنية.

بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إعداد بيئة غنية والحفاظ عليها تحفز تأثيرات مضادة للسرطان والسمنة والفئران.