ارتفاع العائد ونظام التعبير التكلفة ذات كفاءة من Granzymes الإنسان في خلايا الثدييات

9.9K مشاهدة

استشهد بها 13

09:16 دقيقة

يونيو 10, 2015

10.3791/52911-v

يونيو 10, 2015

9.9K مشاهدة

Farokh Dotiwala¹ , Isabelle Fellay² , Luis Filgueira² , Denis Martinvalet³ , Judy Lieberman¹ , Michael Walch²

¹Cellular and Molecular Medicine Program, Boston Children’s Hospital and Harvard Medical School, ²Department of Medicine, University of Fribourg, ³Centre Médical Universitaire, University of Geneva

نصف هنا نظام تعبير الجرانزيم الفعال من حيث التكلفة باستخدام خلايا HEK293T تنتج عوائد عالية من البروتياز النقي والجليكوزيل بالكامل والنشط إنزيميا.

استكشف المزيد من الفيديوهات

تعبير الجرانزايم

ترانسفكشن الخلايا الثديية

طريقة فوسفات الكالسيوم

كروماتوغرافيا الألفة للمعادن المثبتة

كروماتوغرافيا التبادل الكاتيوني

التنشيط بواسطة الإنتروكاينيز

خلايا HEK293T

تنقية البروتين

مقايسة النشاط الإنزيمي

بروتياز غليكوزيلي

Chapters in this video

0:05

العنوان

1:40

التعبير عن البروتينات الجرانزيمية (Gzms) في خلايا HEK293T

3:52

تنقية البروتينات الجرانزيمية (Gzms) من supernatant المزرعة بواسطة كروماتوغرافيا الألفة المعدنية المخلبية (Nickel-IMAC)

5:25

المعالجة بإنزيم الإنتروكاينيز (EK) والتنقية النهائية بواسطة كروماتوغرافيا التبادل الكاتيوني

7:46

النتائج: تحليل الجرانزيمات المؤتلفة بواسطة الفصل الكهربائي للهلام بوجود دوديسيل كبريتات الصوديوم (SDS-PAGE) والمقاييس اللونية

8:47

الاستنتاج

حقوق الطبع والنشر © 2026 MyJoVE Corporation. جميع الحقوق محفوظة.