A السكتة الدماغية نموذج الخثاري بناء على عابر الدماغي نقص الأكسجة-نقص التروية

الهدف العام من هذا الإجراء هو إنشاء نموذج بسيط للسكتة الدماغية الخثارية مع احتشاء دماغي مستقر، وتقييم الآثار الوقائية لعلاج منشط البلازمينوجين النسيجي، أو TPA. أولاً، يتم توضيح تحفيز نقص التأكسج ونقص التروية الدماغية العابر أو THI عبر الربط المزدوج للشريان السباتي الأصلي الأيمن أو RCCA وتعريض الحيوان المربوط لظروف نقص التأكسج لتحفيز التخثر. وبعد مرور 30 دقيقة من حالة نقص التأكسج، يتم فك العقدتين الموجودتين على الشريان السباتي.

في الخطوة النهائية، يتم عرض إعطاء وتقييم آثار العلاج بـ TPA. وبدلاً من ذلك، يمكن استقصاء التسجيل في الوقت الفعلي لتدفق الدم الدماغي، وتكون الخثرة، ودرجة انسداد الوعاء الدموي. يمكن لهذا النموذج إحداث سكتة دماغية خثارية في الفئران البالغة والراحة باستخدام نظام التخثر الخاص بها.

نرغب في استخدام هذا النموذج لدراسة كيفية تنظيم الدماغ لتدفق الدم الخاص به في ظل ظروف نقص تروية افتراضية. كما نهدف لاستخدامه في دراسة كيفية تحسين العلاج الخثاري. ويُعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرًا بالغ الأهمية، حيث يمكن أن يكون من الصعب الحفاظ على درجة حرارة الجسم المناسبة والتنفس السلس أثناء إصابة الدماغ.

خطوات التحريض: قبل 15 دقيقة على الأقل من بدء الإجراء، ضع السرير الجراحي على وسادة تدفئة، واضبط درجة الحرارة على 37 degrees Celsius، ثم ضع لفافة للرقبة مصنوعة من جسم محقنة سعة three milliliter على السرير. اضبط نظام نقص الأكسجة لتوصيل 2% isof fluorine في 7.5% oxygen متوازن بـ 92.5% nitrogen، وقم بضبط وحدات التحكم في درجة الحرارة.

ضع فأراً ذكراً من سلالة C 57 black six، يتراوح عمره بين 10 إلى 13 أسبوعاً ووزنه بين 22 إلى 30 جراماً، على سرير الجراحة. وبعد التأكد من التخدير عن طريق قرص إصبع القدم، ضع مرهماً على عيني الحيوان. ثم مد الأطراف الأربعة على طول الرقبة، ولفها وثبتها باستخدام شريط طبي.

بعد ذلك، استخدم كريماً لإزالة الشعر لإزالة الشعر من رقبة الحيوان وتطهير موقع الجراحة. الآن، انقل سرير الجراحة تحت مجهر تشريحي وأجرِ شقاً عنقياً أيمن في الجلد بطول 0.5 centimeter على طول الخط الناصف. وباستخدام ملقط دقيق، باعد بين الرغامي والعضلات لكشف الشريان السباتي الأصلي الأيمن، ثم ضع غرزتين من الحرير مقاس 5-0 مقصوصتين مسبقاً أسفل الشريان.

احرص على فصل الشريان السباتي عن العصب المبهم، ثم ضع غرزتين من حرير 5-0 قابلة للإطلاق مقطوعتين مسبقاً على الشريان السباتي الأصلي الأيمن (RCCA). بعد ذلك، استخدم غرز خيوط النايلون أحادية الشعيرة 4-0 لإغلاق الجلد وانقل الفأر بسرعة إلى نظام نقص الأكسجة. ضع قناع الوجه فوق أنف وفم الحيوان ومجسًا شرجيًا لضمان الحفاظ على درجة حرارة الجسم عند 37.5 degree Celsius طوال فترة تعريض الحيوان لنقص الأكسجة.

قم بضبط مصابيح التدفئة بعد 30 دقيقة. انقل الفأر مرة أخرى إلى سرير الجراحة وقم بفك الغرزتين. ثم أغلق الجرح باستخدام صمغ الأنسجة وأعد الفأر إلى قفصه مع مراقبة الحيوان حتى يتعافى تماماً.

وبدلاً من ذلك، يمكن استخدام تصوير تباين بقع الليزر لفحص تدفق الدم الدماغي أثناء وبعد نقص التأكسج الإقفاري. ضع الحيوان في وضعية الانكباب. بعد ذلك، افتح فروة الرأس بشق طولي في المنتصف بطول سنتيمتر واحد للكشف عن الجمجمة دون فتحها.

بعد ذلك، انقل الحيوان فوراً إلى جهاز تصوير تدفق الدم وابدأ في تسجيل تدفق الدم الدماغي. اعرض صور تدفق الدم الدماغي وفقاً لتعليمات الشركة المصنعة باستخدام برنامج FLPI لتحليل المناطق المحددة في الوقت الفعلي. ولتقييم آثار العلاج بـ TPA، احقن الحيوانات وريدياً في وريد الذيل في الوقت المناسب، بعد الانسداد أحادي الجانب العابر للشريان السباتي ونقص الأكسجة.

بعد ذلك، يتم قياس حجم الاحتشاء عن طريق صبغ TTC في الجسم الحي بعد 24 ساعة من نقص التروية ونقص التأكسج الدماغي العابر. وفي اليوم التالي، يُستخدم جهاز vibram للحصول على مقاطع بسمك واحد مليمتر. وأخيرًا، يتم الحصول على سلسلة من أربع صور لمقاطع الدماغ بواسطة المجهر الرقمي، واستخدام برنامج تصوير مناسب لقياس حجم الاحتشاء كنسبة مساحة المنطقة البيضاء المحتشاة إلى مساحة نصف الكرة المخية المقابل غير المتضرر.

بالنسبة لهذا الإجراء، يمكن استخدام طرق أخرى لإذابة الخثرة لتقييم تأثيراتها وإمكاناتها السريرية. وقد مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال السكتة الدماغية الإقفارية لاستكشاف العلاج بإذابة الخثرة في الدماغ.