مسرى مكروي تسترشد زرع الأقطاب الكهربائية في نواة تحت المهاد الجرذان على المدى الطويل العميق تحفيز الدماغ

الهدف العام من هذا الإجراء هو إجراء عملية زرع موجهة للتسجيل للأقطاب الكهربائية الدقيقة في النواة تحت المهاد للفئران ، وبعد ذلك تحفيز طويل الأمد لهذه النواة. يتم تحقيق ذلك عن طريق حفر ثقب قطب كهربائي أولا من خلال الجمجمة المكشوفة. الخطوة الثانية هي دفع القطب الكهربائي عبر ثقب القطب إلى الدماغ ، وتسجيل النشاط الكهربائي في نفس الوقت في مناطق مختلفة من الدماغ حتى يمكن اكتشاف النشاط المحدد ل STN.

بعد ذلك ، يتم تثبيت القطب عن طريق وضع الأسمنت السني حول ساق القطب ، ويتم توصيل سدادة الرأس بدبوس القطب. الخطوة الأخيرة هي إصلاح القابس بواسطة الأسمنت السني وتوصيله بالسلك المؤدي إلى المحفز. في النهاية ، يتم تقطيع الدماغ المحصود إلى شرائح بسمك ثمانية ميكرون وتلطيخه بالهيمات والتوين والإيوين لإظهار أن طرف القطب يتم وضعه في النواة تحت المهاد.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية على الطرق الحالية مثل زرع القطب الكهربائي الأعمى ، هي أن تسجيل الزرع الموجه للأقطاب الكهربائية الدقيقة يحسن استهداف النواة تحت المهاد بدقة عالية تمت الموافقة على التجارب على من قبل جامعة بورغ وسلطات الدولة القانونية وتم إجراؤها وفقا لتوصيات البحث في دراسات السكتة الدماغية التجريبية وتقارير الأبحاث الحيوانية الحالية للتجارب في الجسم الحي. تبدأ الإرشادات بتخدير الفئران في غرفة الحث مع توصيل الهواء بسرعة لترين في الدقيقة وهومن الفلور بنسبة 3.5٪ قم بإزالة الفئران من غرفة الحث وحلق المنطقة الواقعة بين الأذنين والعينين. استخدم قطعة قطن مبللة بمحلول مطهر لمسح المنطقة المحلوقة.

لإزالة أي شعر متساقط ، قم بتبديل تدفق الهواء إلى مخروط الأنف واضبط التخدير على 2.5٪ من الفلور Isof الذي يتم توصيله بمعدل تدفق لتر واحد في الدقيقة. ضع الجرذ على مخروط الأنف وضعه في الإطار التجسيمي. تحقق من مستوى التخدير عن طريق الضغط على المنطقة بين الأصابع.

إذا تم تخدير الجرذ بشكل كاف ، يتم إلغاء ردود الفعل الدفاعية. ضع مرهما بيطري على العينين لمنع الجفاف أثناء التخدير. مراقبة درجة حرارة جسم الفئران والحفاظ عليها عند 37 درجة مئوية.

حقن 0.2 مل من ميبيفاكاين تحت الجلد في وسط المنطقة المحلوقة لتخدير المنطقة الجراحية ، مما يضمن العقم من هذه النقطة فصاعدا. استخدم مشرطا لعمل شق في خط الوسط يبدأ بين الأذنين ويمتد للأمام لحوالي سنتيمترين. تأكد من شق السمحاق أيضا ، ثم كشف الجمجمة بأربعة مشابك.

استخدم برعم قطن لإزالة السمحاق برفق حتى تنكشف الغرز الإكليلية والسهمية. افصل أي دم بالصوف القطني. ثبت إبرة على حامل المسبار ثم ضع علامة على طرف الإبرة بقلم طرف أسود.

استخدام مسامير محرك خط الوسط الأمامي الخلفي الجانبي والظهري. ضع طرف الإبرة مباشرة فوق bgma. خذ قراءات مقياس قشرة AP و ML.

اطرح 3.6 ملم من قراءة نقطة الوصول و 2.5 ملم من قراءة التعلم الآلي لزرع القطب الكهربائي في STN الأيمن. اخفض طرف الإبرة إلى سطح الجمجمة لتمييز موقع الحقن بالصبغة من قلم طرف اللباد ، وقم بتثبيت مثقاب الأسنان على حامل المسبار الكبير للأداة التجسيمية. انقل مثقاب الأسنان إلى النقطة المحددة على الجمجمة ، وأثناء النظر من خلال المجهر ، قم بحفر ثقب يبلغ قطره حوالي ملليمتر واحد من خلال الجمجمة حتى تظهر الجافية.

هذا هو ثقب القطب. اسحب الجافية باستخدام ملقط التشريح الدقيق أو إبرة معقمة لأن الجافية صلبة بما يكفي لتدمير طرف القطب. قم بحفر ثقب باستخدام مثقاب الأسنان في كل حرشفة أمامية وفي الحرشفة الجداري المقابلة لفتحة القطب.

بعد ذلك ، قم بحفر ثقب في كل مشفرة بين الجدارية. قم بربط برغي عظمي في كل من الثقوب الخمسة. تجنب ربط البراغي بعمق شديد ، مما يضغط على الدماغ.

عدد المنعطفات على درجة المسمار. يتم استخدام لفتين إلى ثلاث لفات من كل برغي هنا. افصل حامل المسبار عن الأداة التجسيمية وقم بتثبيت حامل المسبار بالقطب الكهربائي في المعالج الصغير.

باستخدام مسامير محرك AP ML و DV ، حرك حامل المسبار مع القطب الكهربائي حتى يكاد الطرف يلامس Breg ma. لاحظ قراءات مقياس قشرة AP ML و DV في breg ma. ثم ارفع القطب بضعة ملليمترات لمنع القطب من كشط الجمجمة أثناء الحركة.

لتحديد إحداثيات الموضع الذي يجب إدخال القطب الكهربائي فيه في الفتحة ، أضف 3.6 ملم إلى قراءة نقطة الوصول وأضف 2.5 ملم إلى قراءة ML. باستخدام براغي محرك AP وML، حرك القطب الكهربائي إلى الموضع المحسوب. في هذه المرحلة ، يجب وضع طرف القطب مباشرة فوق فتحة القطب المحفورة.

بعد ذلك ، أثناء النظر من خلال المجهر ، قم بخفض القطب إلى مستوى الجافية. لاحظ هذا على أنه صفر في اتجاه DV. ثم أدخل طرف القطب برفق في الدماغ.

أثناء النظر من خلال المجهر ، قم بتوصيل دبوس القطب بموصل نظام التسجيل. قم بتأريض الأداة التجسيمية مع اتزان الغرفة المضاد. ثم ضع قفص فاراداي فوق الجرذ في الأداة التجسيمية بدلا من قفص فاراداي.

يمكنك أيضا استخدام رقائق الألومنيوم كما هو موضح هنا لأن تأثيرها هو نفس تأثير قفص فاراداي. ابدأ تشغيل نظام التسجيل إذا كان متاحا. استخدم مكبر صوت للحصول على إشارة صوتية لتفريغ الوحدات الفردية أثناء تقدم القطب.

أدخل القطب الكهربائي ببطء في الدماغ أثناء تسجيل النشاط الكهربائي أثناء تقدم القطب. أثناء التسجيل ، قلل التخدير قدر الإمكان إلى 0.8 إلى 1٪ حيث تظهر منخفضة التخدير نشاطا كهربائيا أكثر وضوحا للدماغ. عادة ما يكون النشاط الكهربائي المحدد ل STN قابلا للكشف على عمق يتراوح بين 7.5 و 8.1 ملم من الجافية.

النشاط النموذجي للخلايا العصبية في STN بنمط إطلاق غير منتظم ومعدل إطلاق مرتفع. الآن ، قم بمسح أي دم أو سائل نخاعي تم إزاحته على سطح الجمجمة عند خفض القطب ، ثم اخلط كمية صغيرة من الأسمنت السني ثم استخدم ملعقة صغيرة لتطبيقه حول القطب الكهربائي وحوالي أربعة من البراغي الخمسة. عندما يصلب الأسمنت السني ، افصل دبوس القطب الكهربائي عن حامل القطب وموصل نظام التسجيل.

ثم قم بفك المسمار الخامس الذي لم يتم تثبيته بواسطة أسمنت الأسنان. ضع القابس على دبوس القطب الكهربائي وقم بتثبيت السلك الأرضي للقابس بالمسمار الرابع. ضع أسمنت الأسنان حول القابس مع زيادة سماكة الأسمنت.

قم بتشكيله حول القابس لتشكيل غطاء. تجنب الحواف الحادة لأسمنت الأسنان التي قد تضر بالحيوان وقم بإزالتها أثناء التصلب. قم بإزالة حواف الجرح وإغلاقها بخياطة خلف الغطاء وفي المقدمة قم بتطهير حواف الجرح.

قم بتوصيل قابس الرأس بالسلك المثبت على دوار. ثم قم بإزالة الجرذ من أداة التجسيم ، وقم بإدارة التسكين المناسب بعد الجراحة. 12.5 ملليغرام لكل كيلوغرام.

يستخدم الترامادول هنا. ضع الجرذ في قفص نظيف مع دعم حراري وقم بتثبيت الدوران على هذا القفص. راقب انتعاش.

تظهر هذه الصورة قسما بسمك ثمانية ميكرون ملطخا بالهيمات والطنان والإيوين من تم التضحية به بعد 14 يوما من الزرع والتحفيز المستمر لتصور الموضع الذي يوجد فيه طرف القطب. يحيط خط صلب ب STN. تظهر آفة صغيرة حيث كان طرف القطب الكهربائي موجودا خلال فترة تحفيز مدتها 14 يوما.

الجدير بالذكر أنه لا توجد قناة اختراق للقطب الكهربائي مرئية ، مما يشير إلى أن القطب لا يعطل الأنسجة المحيطة. تظهر هذه الصورة نفس المنطقة بتكبير أعلى. تم اكتشاف عدد صغير من الخلايا الالتهابية حول الآفة بسبب تفاعل أنسجة المخ مع طرف القطب.

بمجرد إتقان هذه التقنية ، يمكن القيام بها في ساعة وربع ساعة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.