تقييم التوعية السلوكية التي يسببها الكوكايين ومشروطة مكان الأفضلية في الفئران

الهدف العام من هذه المهام السلوكية هو السماح للباحثين بتقييم السلوكيات المرتبطة بالأدوية مثل المكافأة والتحسس. يمكن لهذه الطرق أن تساعد في الإجابة على أسئلة رئيسية في مجال إدمان المخدرات، مثل الجزيئات أو المسارات التي تساهم في اللدونة الناجمة عن العقاقير. الميزة الرئيسية لهذه التقنيات هي أنها ذات إنتاجية عالية ويمكن إجراؤها باستخدام معدات مصنعة منزلياً أو مشتراة. عندما نقوم بإجراء اختبارات تفضيل المكان الشرطي باستخدام جرعات دوائية مختلفة، يمكن لهذا النهج الكشف عن الاختلافات الناتجة عن تغير الحساسية للدواء وتوفير ثقة إضافية في نتائجك. تستخدم هذه التجربة صناديق CPP ذات ثلاث غرف مجهزة بحزم ضوئية لجمع البيانات آلياً. يجب توفير أربعة صناديق أو أكثر. يحتوي هذا الجهاز على غرفتين كبيرتين، A وB، يمكن من خلالهما إدخال الفئران عبر غطاء. يوجد داخل كل غرفة مصدر ضوء قابل للتعتيم. يتم جعل الغرفتين A وB متمايزتين بصرياً، على سبيل المثال، الأبيض مقابل الأسود، وأيضاً متمايزتين لمسياً، مثل استخدام أنسجة أرضيات مختلفة. بين الغرفتين الكبيرتين توجد غرفة محايدة أصغر متبادلة، أو C، يمكن الوصول إليها عن طريق أبواب منزلقة. لمزيد من التفاصيل حول صناديق CPP، بما في ذلك معلومات مهمة حول كيفية إعداد تصميم متوازن، راجع البروتوكول النصي. لهذه التجارب، استخدم الفئران التي خضعت لعمليات مناولة منتظمة لتقليل تأثير تباين مناولة الحيوانات على النتائج. قم بتجهيز غرفة الاختبار، ونظف صناديق CPP جيداً. قم بتشغيل المعدات وخفت أضواء الغرفة. ثم، انقل الفئران إلى منطقة الاختبار قبل 60 إلى 90 دقيقة من التجربة. في يوم الاختبار الأول، قم بإجراء اختبار قبلي. جهز الغرف بفتح الأبواب الفاصلة بين الغرف. بعد ذلك، افتح برنامج الكمبيوتر. قم بتحميل برنامج الاختبار. أدخل معرفات الحيوانات وأصدر أمر البدء. عندما تكون جاهزاً، ضع كل فأر برفق في الغرفة الوسطى من الجهاز المخصص له. بعد التجارب القبلية، أعِد الفئران إلى أقفاصها المنزلية وصدر البيانات. من نتائج الاختبار القبلي، حدد تفضيل كل حيوان للغرفتين A وB. اطرح الوقت الذي قضاه في كل غرفة من الأخرى، واستخدم الفرق كمؤشر. أولِ اهتماماً خاصاً للحيوانات التي لديها تفضيلات قوية في الاختبار القبلي، والموضحة هنا باللون الأحمر، كما هو موضح في البروتوكول النصي. اختر الغرفة المقترنة بالدواء لكل فأر بناءً على هذه النتيجة. يجب جعل مجموع درجات المؤشر لكل مجموعة اختبار متكافئاً وقريباً من الصفر. بعبارة أخرى، اختر الجانب المفضل لنصف الفئران تقريباً. أيضاً، وزع الحيوانات بالتساوي على الغرفتين A وB داخل كل مجموعة. إذا كان من المرغوب في إجراء التكييف لمجموعات متعددة في وقت واحد، فحاول تعيين الحيوانات التي تستخدم نفس الجهاز في غرف متقابلة. لمزيد من التفاصيل، راجع البروتوكول النصي. خطوة حاسمة في تفضيل المكان الشرطي عند استخدام تصميم متوازن هي تعيين الغرف المقترنة بالدواء بحيث تكون درجات الاختبار القبلي متساوية تقريباً لجميع مجموعات الاختبار وأقرب ما يمكن إلى الصفر أو عدم وجود تفضيل. للبدء، قم دائماً بوزن كل فأر قبل مرحلة التكييف. في اليوم الأول من التكييف، جهز المحاقن بالكوكايين أو الدواء التجريبي المختار وفقاً لوزن جسم كل حيوان. في الأيام المتبادلة، جهز المحاقن بالمحلول الملحي أو أي وسيط مناسب آخر. جهز الصناديق بإغلاق الأبواب الفاصلة بين الغرف. قم بتحميل برنامج التكييف على الكمبيوتر، وأدخل المعرفات، وابدأ البرنامج. بعد ذلك، احقن الحيوانات بجرعة الدواء أو الوسيط ثم ضعهم في الصندوق المخصص لهم. من الضروري التأكد من حدوث التكييف في الغرف A أو B الصحيحة لكل فأر، كل يوم، حسب التعيين، لأن الأخطاء في هذه الخطوة قد تفرض استبعاد الحيوانات من الدراسة. بعد ما لا يزيد عن 30 دقيقة من التكييف، أعِد الفئران إلى أقفاصها المنزلية. عند اكتمال جميع التجارب، صدر البيانات وأعِد الفئران إلى المستعمرة. يستخدم هذا المقاييس مصفوفات حزم ضوئية بأبعاد أربعة في ثمانية وبمقاس 20 بوصة في 11.5 بوصة. يجب توفير ما بين أربعة إلى 16 مصفوفة. ضع كل مصفوفة في غرفة من البلكسي جلاس الأسود مفتوحة من الأعلى. في غرفة الاختبار، جهز ضوءاً أحمر لإضاءة الغرف. في البرنامج، جهز جلسات البرنامج للتأقلم اليومي وتجارب الحقن. أولاً، اضبط طول تجربة التأقلم ليكون من 30 إلى 60 دقيقة. ساعة واحدة هي نقطة بداية جيدة. اجعل تسجيل انقطاعات الحزمة في فترات زمنية مدتها خمس دقائق أو أقل. ثانياً، اضبط وقت التجربة في كل غرفة ليبدأ عند تفعيل أول حزمة ضوئية، والذي يأتي بعد بدء التجربة بإشارة البدء. ثالثاً، اضبط طول تجربة الحقن ليكون من 60 إلى 120 دقيقة. إذا كان ذلك ممكناً، في تجارب الحقن، اختر بدء إشارات البدء من مصفوفات الحزم الضوئية بشكل فردي وليس في آن واحد. يتطلب التحسس الحركي جولة اختبار أولية لمدة 10 أو 11 يوماً متتالية. في كل يوم، انقل الفئران إلى الغرفة الجانبية السلوكية قبل 30 إلى 60 دقيقة من الاختبار. الآن، ضع قفص فئران شفافاً جديداً في كل غرفة. تأكد من تمركز الحزم الضوئية على المحور الطولي لكل قفص. عندما تكون جاهزاً، أخرج الفئران بترتيب عشوائي من أقفاصها المنزلية. أولاً، قم بإمساكها من الرقبة ووزنها. ثم ضع كل واحد منها في قفص الاختبار الحركي المخصص له لتجربة التأقلم وغطِّه بغطاء. يتضمن كل يوم تجربة تأقلم بدون حقن، تليها تجربة حقن. خلال تجربة التأقلم، جهز المحاقن بناءً على وزن الجسم الحالي لكل فأر. بعد انتهاء جميع تجارب التأقلم، قم بتحميل برنامج تجربة الحقن وادخل غرفة الاختبار بهدوء. بعد حقن الفأر، أصدر بسرعة إشارة بدء القفص في البرنامج، ثم أعِد ذلك الفأر إلى قفص الاختبار الخاص به. على مدار أول ثلاثة إلى أربعة أيام من الاختبار، أعطِ محلولاً ملحياً أو وسيطاً مناسباً آخر. على مدار الأيام السبعة التالية، أعطِ الكوكايين أو الدواء التجريبي المختار. بعد انتهاء جميع تجارب الحقن، أعِد الفئران إلى غرفة إيوائهم. في مقياس CPP، تم تكييف فئران C57 black 6n من النوع البري باستخدام المحلول الملحي فقط، أو تركيزين مختلفين من الكوكايين. لم تظهر مجموعة المحلول الملحي فقط أي تغيير في التفضيل بعد التكييف، كما كان متوقعاً، بينما لوحظت تفضيلات معززة في المجموعات التي عولجت بالكوكايين. أظهر الوقت الذي قضاه الفئران في الغرف المختلفة قبل الاختبار وبعده أن الفئران المعالجة بالكوكايين قضت وقتاً أطول في الغرفة المقترنة بالكوكايين مقارنة بأي غرفة أخرى. لم تظهر الفئران التي تلقت المحلول الملحي فقط اختلافات ملحوظة في تفضيل الغرف، كما كان متوقعاً. بعد ذلك، تم إجراء المقاييس الحركية على فئران C67 black 6n. تم إعطاء حقن المحلول الملحي لمدة ثلاثة إلى أربعة أيام، تلتها حقن الكوكايين بأربع جرعات مختلفة لمدة سبعة أيام. كما كان متوقعاً، لوحظت تغيرات أكثر وضوحاً في السلوك مع زيادة جرعات الكوكايين. كاختبار تحدٍ، بعد أسبوع إلى أسبوعين من الانسحاب، أعطيت كل مجموعة الجرعة الأصلية من الكوكايين. ثم أُعطيت تحديات إضافية بفترات انسحاب وجرعات متغيرة. على الرغم من أن هذا الفيديو استعرض هذه التقنيات باستخدام معدات مشتراة تجارياً، إلا أن العديد من المختبرات نفذتها بنجاح باستخدام أجهزة مصنعة منزلياً. أثناء محاولة تنفيذ هذه الإجراءات، من المهم ضمان حصول جميع الحيوانات على معاملة متساوية من أجل تقليل التوتر والأخطاء والتباين بين التجارب. تشمل المتغيرات التي يجب مراعاتها وقت المناولة والوقت الذي يقضيه الحيوان في غرفة الاختبار والغرفة. قد يكون من المرغوب في تنفيذ توسعات لهذه المقاييس تشمل الانطفاء والاستعادة لـ CPP وتحديات التحسس طويلة المدى أو المتقاطعة للتحسس الحركي. بالإضافة إلى ذلك، من المهم استخدام أدوية نـ