Optical Mapping of Intra-Sarcoplasmic Reticulum Ca<sup>2+</sup> and Transmembrane Potential in the Langendorff-perfused Rabbit Heart

Lianguo Wang; Nicole M. De Jesus; Crystal M. Ripplinger

doi:10.3791/53166

رسم الخرائط البصرية البينية العضلية شبكية كاليفورنيا 2+ وإمكانية الغشاء في قلب الأرنب ...

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Optical Mapping of Intra-Sarcoplasmic Reticulum Ca²⁺ and Transmembrane Potential in the Langendorff-perfused Rabbit Heart

رسم الخرائط البصرية البينية العضلية شبكية كاليفورنيا 2+ وإمكانية الغشاء في قلب الأرنب Langendorff perfused-

Full Text

9,785 Views

09:26 min

September 10, 2015

DOI: 10.3791/53166-v

Lianguo Wang¹, Nicole M. De Jesus², Crystal M. Ripplinger¹

¹Department of Pharmacology,University of California Davis, ²Departments of Pharmacology and Biomedical Engineering,University of California Davis

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

توضح هذه المقالة بروتوكول مفصلة والمعدات اللازمة لرسم الخرائط الضوئية المزدوجة من الغشاء المحتملين (V _م) وخالية شبكية داخل الهيولى العضلية (SR) كا ²⁺ في قلب الأرنب Langendorff perfused. وتسمح هذه الطريقة للمراقبة المباشرة والكمي لV _{م وريال} كا ²⁺ ديناميكية في قلب سليمة.

الهدف العام من هذا الإجراء هو رسم خريطة بصرية في نفس الوقت للشبكة الحرة داخل الساركوبلازمة والكالسيوم وإمكانات الغشاء في قلب الأرنب المعزول LOR السليم. يتم تحقيق ذلك عن طريق استئصال قلب الأرنب أولا وقنية الشريان الأورطي من أجل نضح اللانر الرجعي. الخطوة الثانية هي القضاء على الانكماش عن طريق إضافة انكماش الإثارة الذي ينفصل عن البرفو الثمانية.

بعد ذلك ، يتم تحويل التروية إلى حلقة إعادة تدوير صغيرة الحجم ويضاف مؤشر الكالسيوم منخفض التقارب في درجة حرارة الغرفة. تتمثل الخطوات النهائية في تسخين القلب إلى 37 درجة مئوية باستخدام حلقة وفرة الحجم الكبير وإضافة الصبغة الحساسة للجهد. وهكذا ، أثناء التجربة ، يتم قياس التغيرات في الكالسيوم وإمكانات الغشاء عن طريق إثارة القلب بالضوء الأزرق وقياس الضوء المنبعث بكاميرات CM OS عالية السرعة.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos