بديل بسيط لحقن المجسم لالدماغ ضربة قاضية محددة من ميرنا

نوضح هنا استخدام الببتيد المخترق للخلية مع قليل النوكليوتيد المضاد للمعنى المعدل لإسقاط الحمض النووي الريبي الصغير في دماغ الفئران على وجه التحديد. تم تحقيق ذلك من خلال تصميم antigo مقابل 29 مايو. في هذه الدراسة ، استخدمنا ذكور الأنتجو لاستهداف الحمض النووي الريبي الصغير الذي يقفل تعديلات الحمض النووي.

أي أن تعديلات الجيش الوطني الليبي قد أدرجت في خمسة مواقع مختلفة. في هذا ، يؤدي دمج تعديلات LNA إلى تعزيز تقاربه المرتبط بالحمض النووي الريبي الصغير. كما أنه يعطي مقاومة للنواة وبالتالي يعزز كفاءة استهداف الحمض النووي الريبي الصغير.

تم تحضير مجمعات ANTIGO MAR مع الببتيد في المختبر وحقنها في الفئران من خلال الوريد الذيل. أدى الانهيار ضربة قاضية للحمض النووي الريبي الصغير إلى تغييرات سلوكية تشير إلى تورط هذا الحمض النووي الريبي الصغير في الرنح ، وكانت ثلاث حقن متتالية كافية لإحداث تغيير ملحوظ في المشية بعد العلاج ، وتم جمع أنسجة المخ وتأكيد ضربة قاضية من microRNA. ظهرت CPPs أو الببتيدات ذاتية الاختراق مؤخرا كناقلات جذابة لتوصيل الحمض النووي.

لقد استخدمنا هنا أحد هذه الببتيد العصبي الغني بالأرجينين الذي يمكن أن يخضع لتعقيد قائم على الشحنة مع LNA ، والذي عند إعطائه في الدورة الدموية الجهازية ، سيصل إلى موقعه المستهدف المحدد وهو الخلايا العصبية في هذه الحالة ويضمن الإطلاق السليم للحمض النووي الريبي في هذه الخلايا. تم استرداد تسلسل أفراد عائلة ME 29 من الميس وتم تصنيع مضاد MER 16 مع تعديلات الحمض النووي المقفل في خمسة مواضع متباعدة بشكل متساو لإعداد المجمعات. تم تحضير محاليل الببتيد والأنتيجو بتركيزات مناسبة بشكل منفصل في جلوكوز معقم بنسبة 10٪.

في ظل ظروف معقمة. تمت إضافة محلول Antigo ببطء إلى محلول الببتيد مع التحريك اللطيف. تعد الإضافة البطيئة والتقليب اللطيف أمرا بالغ الأهمية لتشكيل مجمعات أحادية مشتتة يكون حجمها في مقياس tric.

تمت إضافة Antigo في ثلاثة أجزاء متساوية في كل مرة ، مما يسمح بدقيقة للخلط ، تليها دقيقة من الحضانة دون خلط. يمكن أن تؤدي الإضافة السريعة إلى تراكم المجمعات وهطول الأمطار. مركب Antigo جاهز الآن للحقن.

تم إعطاء المجمع من خلال حقن وريد الذيل. أعيدت الفئران إلى نفس القفص. تم إجراء فحوصات سلوكية للترنح يوميا ، بعد ثلاث ساعات من الحقن.

تم إمساك الفأر بذيله ، ولم يسمح له بلمس أي أشياء محيطة. لاحظ الطريقة التي يتم بها تباعد الأطراف الخلفية لمدة 10 ثوان. في اختبار الحافة ، طلب من الفئران المشي على طول الحافة الرقيقة للقفص.

تمشي الفئران عبر قناة رفيعة تاركة آثار أقدام بأقدام محبرة على شريط من حبر الورق السميك الماص فقط القدمين الخلفيتين. لتجنب البيانات المربكة من أربعة أطراف ، دعونا نرى تأثير العلاج المضاد. قمنا بعزل الدماغ والأنسجة الأخرى من الفئران المعالجة والخاضعة للرقابة.

وجدنا أن ببتيد R VG يوصل siRNA المسمى فلورسنت على وجه التحديد إلى الدماغ ، ولكن ليس إلى الأنسجة الأخرى مثل الكبد. قام ببتيد التحكم غير العصبي RVM بتسليم siRNA إلى الكبد. أظهرت الفئران التي عولجت ب ANTIER 29 عيوبا في الطرف الخلفي.

يمكن للفئران التي يتم التحكم فيها بالمشبك أن تتفاوض على الحافة ، ولكن بعد العلاج بشق النعم ضد MARE 29 ، أظهرت الفئران عيوبا طفيفة في هذا الفحص. في فحص البصمة ، كان هناك تقصير مذهل في طول الخطوة في الفئران المعالجة. بالإضافة إلى ذلك ، أكدنا من خلال QR tpcr أن مستويات منتصف 29 A ومنتصف 29 B قد تم تنظيمها لتطوير العلاجات القائمة على الحمض النووي الدقيق.

يمثل توصيل الدماغ الخاص بمضادات الحمض النووي الريبي الدقيقة تحديا بسبب الحاجز الدموي الدماغي. باستخدام التقنية المعروضة هنا ، يمكننا تجنب طريقة التوصيل التقليدية لمضادات الحمض النووي الريبي الدقيقة إلى الدماغ. هذه الطريقة تجعل ضربة قاضية من microRNAs ممكنة تقنيا وتزيد من خصوصية الأنسجة.