مارس 11, 2016
تدعم ظهارة صبغة الشبكية (RPE) شبكية العين الحسية من خلال إعادة تدوير المنتجات الثانوية للدورة البصرية ، والتي تتراكم على شكل ليبوفوسين. هذه المنتجات ذاتية الفلورسنت ويمكن تصويرها نوعيا في الجسم الحي. هنا ، نصف طريقة لتصوير ليبوفوسين RPE كميا باستخدام تنظير العين بالليزر المسح الضوئي متحد البؤر.
الهدف العام من التألق الذاتي الكمي ، أو qAF ، هو تقييم المستوى الكلي للليبوفوسين في الخلايا الداعمة لشبكية العين ، أو ظهارة صبغة الشبكية ، أو RPE ، في كل من العيون السليمة والمريضة. يمكن أن تساعد هذه التقنية في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في بيولوجيا خلية الشبكية ، مثل كيفية تفاعل صحة ظهارة صبغة الشبكية مع تطور التنكس البقعي المرتبط بالعمر ، أو AMD. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بتحديد المستويات المطلقة من التألق الذاتي ليبوفوسين في قاع العين ، وبالتالي المتابعة الكمية والتكاثرية بين المرضى ، وبين جلسات تصوير المريض ، وفي مجموعات الدراسة الكبيرة.
قبل التصوير ، قم بإعداد تنظير البصر بالليزر للمسح الضوئي متحد البؤر بشكل مناسب ، أو CSLO ، للحصول على البيانات وفقا لتعليمات الشركة المصنعة. لتركيب مرجع فلورسنت داخلي، يتم شراؤه من الشركة المصنعة، قم بلف العدسة لإزالتها، وفك الحلقة المعدنية للماكينة، واستبدلها بالحلقة المعدنية الجديدة التي تحتوي على المرجع. من الضروري توسيع حدقة العين إلى 6 مم على الأقل لمرور الضوء دون انقطاع.
مع 0.5٪ تروبيكاميد ، و 2.5٪ فينيليفرين ، قم بتوسيع تلاميذ المريض على الأقل 6 مم ، وهو أمر ضروري لمرور الضوء دون انقطاع لرؤية وقياس قاع العين. ضع المريض بشكل صحيح على CSLO مع وضع الذقن على مسند الذقن ، ووضع الجبهة على مسند الجبهة ، والكانثي الجانبي محاذاة بشكل صحيح مع المؤشرات. للحصول على صور أساسية ، قم أولا بتصوير قاع العين بانعكاس الأشعة تحت الحمراء القريبة ، أو ضوء الأشعة تحت الحمراء ، من أجل تركيز الكاميرا فوق البقعة والحصول على تركيز خشن.
مع وضع المريض بشكل صحيح ، قم بتبديل إعداد الجهاز على لوحة التحكم إلى وضع التصوير بالأشعة تحت الحمراء ، ضع الكاميرا يدويا حتى يصبح قاع العين في التركيز الكامل ، والتقط صورة. اضبط الإعداد الموجود على لوحة التحكم على IROCT ، والذي يستخدم التصوير المقطعي للتماسك البصري للمجال الطيفي ، أو SDOCT ، جنبا إلى جنب مع التصوير بالأشعة تحت الحمراء ، لتقييم البقعة للمرض الكامن. استخدم الأدلة الموجودة في نافذة التصوير لتوجيه OCT بشكل صحيح إلى صورة الأشعة تحت الحمراء لقاع العين.
لتحقيق جودة SDOCT المثلى ، ضع الكاميرا بحيث تكون صورة OCT في الثلث العلوي من نافذة التصوير الخاصة بها. احصل على مسح خط أفقي واحد على الأقل عبر النقرة ، ويمتد على مجال التصوير بأكمله. لإعداد تصوير qAF ، استخدم الحصول على صور عالية السرعة ، مما يقلل من خطر فقدان الإشارة بسبب حركة المريض ، وانسداد الضوء بواسطة القزحية أو الجفون.
استخدم متوسط 9 إطارات ، والذي يلتقط بسرعة وبشكل متتابع تسعة إطارات صور يتم بعد ذلك حساب متوسطها لتقليل التشويش والقطع الأثرية. اختر مجالا بحجم 30 × 30 درجة، يشير إلى درجات مساحة الشبكية التي تم التقاطها أثناء الحصول على الصورة. بعد تحذير المريض من الضوء الأزرق ، قم بتشغيل وضع التركيز البؤري التلقائي وقم بمحاذاة محور الكاميرا بحيث تمتلئ الشاشة إلى أقصى حد بتركيز بؤري تلقائي قاع العين ، مع الحد الأدنى من تعتيم جوانب وزوايا الصورة.
إذا كان المرضى يواجهون صعوبة في تحمل الضوء الأزرق الساطع ، فحرك الكاميرا بعيدا عن العين لبدء التصوير ، وقم بإحضار الكاميرا ببطء نحو المريض حتى يصبح قاع العين على مرأى ومسمع من الجميع. إما يدويا أو باستخدام عصا التحكم في منظار البصريات ، اضبط محاذاة الكاميرا عن طريق تحريك CSLO لإعادة وضع الكاميرا بحيث تكون إشارة التركيز البؤري التلقائي في أعلى مستوى لها في جميع أنحاء المجال ، بدلا من تحقيق الصورة الأكثر وضوحا. أثناء الحصول على الصورة ، تشير وحدات البكسل الملونة المرئية إما في المرجع الداخلي أو قاع العين إلى التشبع الزائد ، وبالتالي فقدان الإشارة.
تعريض شبكية العين بالكامل لضوء الرجفان البؤري التلقائي لمدة 20 ثانية على الأقل لتقليل امتصاص رودوبسين للضوء في شبكية العين الحسية أثناء التصوير. استخدم هذه الفترة لتحسين محاذاة الكاميرا والتركيز عليها والحساسية. اجعل الأهداف تومض قبل كل الحصول على صورة ، حيث يعمل الفيلم المسيل للدموع الجديد على تحسين جودة الإشارة.
تجنب الجفون في مستوى الاستحواذ والتقط الصورة. من المهم إنشاء صورتين على الأقل عالية الجودة لكل جلسة تصوير لتحليل البيانات. قم بإجراء معالجة ما بعد الصورة باستخدام برنامج CSLO لحساب متوسط مكدس الإطارات التسعة ، لزيادة نسبة الإشارة إلى الضوضاء.
قم بإجراء تحليل الصور وفقا لبروتوكول النص. كما هو موضح هنا ، في العيون السليمة ، يتم توزيع الرجفان الأذيني المنبعث من RPE بشكل موحد نسبيا في جميع أنحاء قاع العين. يظهر انخفاض الشدة في المنطقة البقعية المركزية بسبب حجب الضوء بواسطة الصبغة البقعية ، وفي الجانبين والزوايا بسبب بصريات العين والكاميرا.
يجب أن تكون الأوعية مظلمة وفي تركيز واضح. يمثل هذا الشكل عرضا لخريطة الحرارة المقابلة لمستويات qAF من هذا الشكل. تتوافق الألوان الأكثر برودة مع المناطق ذات كثافة التركيز البؤري التلقائي المنخفضة، بينما تتوافق الألوان الأكثر دفئا مع المناطق ذات كثافة التركيز البؤري التلقائي الأعلى.
تظهر الكثافة القصوى بشكل عام في الحلقة الثانية من ثمانية أجزاء متحدة المركز ، ويستخدم متوسط الشدة في هذا المجال لمعظم تحليل البيانات. يظهر هنا تحليل تمثيلي للعين مع AMD ، مما يدل على الضمور الجغرافي ، وهو شكل متقدم من AMD. ينتج عن هذا النوع من AMD مناطق موضعية من فقدان RPE ، كما يتضح من انخفاض ملحوظ أو غيابه في AF ، ويسبب فقدان الرؤية المركزية التدريجي.
أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر اختيار المرضى المرشحين بعناية والحصول على صور عالية الجودة قابلة لإعادة الإنتاج لزيادة جودة البيانات إلى أقصى حد. يمكن أن يسمح استخدام هذا الإجراء بالمتابعة الطولية لصحة الشبكية لتحديد تقدم تنكس الشبكية. بعد تطويرها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال طب العيون لمتابعة وتحليل تنكس الشبكية.
بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية استخدام التألق الذاتي الكمي لتقييم مرضاك الذين يعانون من تنكس الشبكية. شكرا على المشاهدة ، ونتمنى لك التوفيق في تجاربك.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تناقش هذه المقالة طريقة لتصوير الليبوفوسسين بشكل كمي في الظهارة الصباغية للشبكية (RPE) باستخدام فحص العين بالليزر المقطعي المجسم (CSLO). تهدف التقنية إلى تقييم مستويات الليبوفوسسين في كل من العيون الصحية والمريضة، مما يساهم في فهمنا لبيولوجيا الخلايا الشبكية.
Quantitative fundus autofluorescence (qAF) enables reproducible, absolute measurement of retinal pigment epithelium (RPE) lipofuscin levels, providing a biomarker for cellular stress and degeneration in preclinical models of retinal disease. This approach supports target validation by correlating RPE functional status with sensory retina integrity, informing mechanistic de-risking in ophthalmology discovery programs. The technique enhances predictive confidence in lead identification by enabling longitudinal tracking of pathological progression in disease-relevant systems.
Quantitative autofluorescence integrates into the ophthalmology discovery continuum from early target validation through preclinical efficacy assessment, enabling data-driven go/no-go decisions based on RPE health metrics.