مارس 11, 2016
تدعم ظهارة صبغة الشبكية (RPE) شبكية العين الحسية من خلال إعادة تدوير المنتجات الثانوية للدورة البصرية ، والتي تتراكم على شكل ليبوفوسين. هذه المنتجات ذاتية الفلورسنت ويمكن تصويرها نوعيا في الجسم الحي. هنا ، نصف طريقة لتصوير ليبوفوسين RPE كميا باستخدام تنظير العين بالليزر المسح الضوئي متحد البؤر.
يتمثل الهدف العام من قياس التألق الذاتي الكمي، أو qAF، في تقييم المستوى الإجمالي لليبوفوسين في الخلايا الداعمة للشبكية، وهي الظهارة الصبغية للشبكية، أو RPE، في كل من العيون السليمة والمصابة. يمكن أن تساعد هذه التقنية في الإجابة على أسئلة رئيسية في بيولوجيا خلايا الشبكية، مثل كيفية تفاعل صحة الظهارة الصبغية للشبكية مع تطور التنكس البقعي المرتبط بالسن، أو AMD. وتكمن الميزة الرئيسية لهذه التقنية في أنها تسمح بتحديد المستويات المطلقة للتألق الذاتي لليبوفوسين في قاع العين، وبالتالي تتيح متابعة كمية وقابلة للتكرار بين المرضى، وبين جلسات تصوير المريض الواحد، وفي المجموعات السكانية الدراسية الكبيرة.
قبل البدء بالتصوير، قم بإعداد جهاز تنظير العين الليزري الماسح البؤري، أو CSLO، بشكل مناسب للحصول على البيانات وفقاً لتعليمات الشركة المصنعة. لتركيب مرجع فلوري داخلي، والذي يتم شراؤه من الشركة المصنعة، قم بتدوير العدسة لإزالتها، وفك الحلقة المعدنية للجهاز، واستبدلها بالحلقة المعدنية الجديدة التي تحتوي على المرجع. من الضروري أن يتم توسيع حدقات العين إلى 6mm على الأقل لضمان مرور الضوء دون انقطاع.
استخدم تروبيكاميد 0.5% وفينيل إفرين 2.5% لتوسيع حدقتي المريض إلى 6mm على الأقل، وهو أمر ضروري لمرور الضوء دون انقطاع لرؤية قاع العين وقياسه. ضع المريض بشكل صحيح على جهاز CSLO بحيث يستند الذقن على مسند الذقن، والجبهة على مسند الجبهة، وتكون الزوايا الخارجية للعين محاذية بدقة للمؤشرات. وللحصول على الصور المرجعية، ابدأ أولاً بتصوير قاع العين باستخدام انعكاس الأشعة تحت الحمراء القريبة، أو ضوء IR، وذلك لتمركز الكاميرا فوق البقعة والحصول على تركيز تقريبي.
بعد وضع المريض في الوضعية الصحيحة، قم بتغيير إعدادات الجهاز في لوحة التحكم إلى وضع التصوير بالأشعة تحت الحمراء (IR)، وقم بضبط وضعية الكاميرا يدويًا حتى يصبح قاع العين في تركيز كامل، ثم التقط صورة. اضبط الإعداد في لوحة التحكم على وضع IROCT، الذي يستخدم التصوير المقطعي البصري المتماسك في النطاق الطيفي (SDOCT) بالتزامن مع التصوير بالأشعة تحت الحمراء (IR)، لتقييم البقعة الشبكية بحثًا عن أي أمراض كامنة. استخدم الأدلة الموجودة في نافذة التصوير لتوجيه الـ OCT بشكل صحيح بالنسبة لصورة قاع العين الملتقطة بالأشعة تحت الحمراء (IR).
لتحقيق جودة مثالية في تصوير SDOCT، قم بوضع الكاميرا بحيث تكون صورة OCT في الثلث العلوي من نافذة التصوير الخاصة بها. قم بالتقاط مسح خطي أفقي واحد على الأقل عبر النقرة، بحيث يمتد عبر مجال التصوير بالكامل. لإعداد تصوير qAF، استخدم خاصية الحصول على الصور عالية السرعة، مما يقلل من خطر فقدان الإشارة الناتج عن حركة المريض، أو حجب الضوء بواسطة القزحية أو الجفون.
استخدم خيار متوسط 9 إطارات (Mean of 9 frames)، والذي يلتقط تسعة إطارات صور بشكل سريع ومتسلسل ثم يتم حساب متوسطها لتقليل الضوضاء والشوائب. اختر مجال رؤية بمقدار 30 × 30 درجة، وهو ما يشير إلى درجات مساحة الشبكية التي يتم تصويرها أثناء عملية التقاط الصور. بعد تحذير المريض من الضوء الأزرق، قم بتفعيل وضع التركيز التلقائي (AF mode) وقم بمحاذاة محور الكاميرا بحيث تملأ صورة التركيز التلقائي لقاع العين الشاشة إلى أقصى حد، مع تقليل التعتيم في جوانب وزوايا الصورة.
إذا واجه المرضى صعوبة في تحمل الضوء الأزرق الساطع، فقم بإبعاد الكاميرا عن العين لبدء التصوير، ثم قرب الكاميرا ببطء نحو المريض حتى يصبح قاع العين مرئياً بالكامل. قم بضبط محاذاة الكاميرا، إما يدوياً أو باستخدام عصا التحكم في منظار العين، عن طريق تحريك جهاز CSLO لإعادة وضع الكاميرا بحيث تكون إشارة AF عند أعلى مستوياتها في جميع أنحاء المجال، بدلاً من السعي لتحقيق أوضح صورة. أثناء عملية الحصول على الصور، تشير البكسلات الملونة التي تظهر سواء في المرجع الداخلي أو في قاع العين إلى حدوث تشبع مفرط، وبالتالي فقدان الإشارة.
قم بتعريض الشبكية بالكامل لضوء AF لمدة 20 ثانية على الأقل لتقليل امتصاص الضوء بواسطة rhodopsin في الشبكية الحسية أثناء التصوير. استخدم هذه الفترة لتحسين محاذاة الكاميرا والتركيز والحساسية. اطلب من الخاضعين للفحص الرمش قبل كل عملية التقاط صورة، حيث أن غشاء الدموع المتجدد يحسن جودة الإشارة.
تجنب وجود الجفون في مستوى الالتقاط ثم التقط الصورة. من المهم إنشاء صورتين عالية الجودة على الأقل في كل جلسة تصوير لاستخدامهما في تحليل البيانات. قم بإجراء معالجة ما بعد التصوير باستخدام برنامج CSLO لحساب المتوسط لطبقة مكونة من تسعة إطارات، وذلك لزيادة نسبة الإشارة إلى الضجيج.
قم بإجراء تحليل الصور وفقاً للبروتوكول النصي. وكما هو موضح هنا، في العيون السليمة، يتوزع الفلورة الذاتية (AF) المنبعث من الظهارة الصبغية للشبكية (RPE) بشكل متجانس نسبياً في جميع أنحاء قاع العين. ويلاحظ انخفاض في الشدة في منطقة البقعة المركزية بسبب حجب الضوء بواسطة صبغة البقعة، وفي الجوانب والزوايا بسبب البصريات الخاصة بالعين والكاميرا.
يجب أن تكون الأوعية داكنة وواضحة التركيز. يمثل هذا الشكل عرضاً لخريطة حرارية مقابلة لمستويات qAF من هذا الشكل. تشير الألوان الباردة إلى المناطق ذات شدة AF المنخفضة، بينما تشير الألوان الدافئة إلى المناطق ذات شدة AF الأعلى.
تظهر الكثافة القصوى عمومًا في الحلقة الثامنة متحدة المركز الثانية، وتُستخدم متوسطات الكثافة في هذه المنطقة لمعظم تحليلات البيانات. يظهر هنا تحليل نموذجي لعين مصابة بمرض التنكس البقعي المرتبط بالسن (AMD)، مما يوضح وجود الضمور الجغرافي، وهو شكل متقدم من مرض AMD. يؤدي هذا الشكل من AMD إلى حدوث مناطق موضعية من فقدان الظهارة الصباغية للشبكية (RPE)، وهو ما يتضح من خلال انخفاض ملحوظ أو غياب في التألق الذاتي (AF)، ويتسبب في فقدان تدريجي للرؤية المركزية.
عند محاولة تنفيذ هذا الإجراء، من المهم تذكر اختيار المرضى المرشحين بعناية والحصول على صور عالية الجودة بشكل قابل للتكرار لرفع جودة البيانات إلى أقصى حد. يمكن أن يتيح استخدام هذا الإجراء المتابعة الطولية لصحة الشبكية لتحديد مدى تطور تنكسات الشبكية. وبعد تطويرها، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال طب العيون لمتابعة تنكسات الشبكية وتحليلها.
بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن تكون لديك معرفة جيدة بكيفية استخدام التألق الذاتي الكمي لتقييم المرضى الذين يعانون من تنكس الشبكية. شكراً للمشاهدة، وبالتوفيق في تجاربكم.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تناقش هذه المقالة طريقة للتصوير الكمي لليبوفوسين في الظهارة الصباغية للشبكية (RPE) باستخدام تنظير الشبكية الليزري المسحي البؤري (CSLO). تهدف هذه التقنية إلى تقييم مستويات الليبوفوسين في العيون السليمة والمصابة على حد سواء، مما يساهم في فهمنا لبيولوجيا خلايا الشبكية.
يتيح التصوير الفلوري الذاتي الكمي لقاع العين (qAF) قياساً مطلقاً وقابلاً للتكرار لمستويات الليبوفوسين في الظهارة الصبغية للشبكية (RPE)، مما يوفر مؤشراً حيوياً للإجهاد الخلوي والتنكس في النماذج قبل السريرية لأمراض الشبكية. ويدعم هذا النهج التحقق من الأهداف من خلال ربط الحالة الوظيفية لـ RPE بسلامة الشبكية الحسية، مما يساهم في تقليل المخاطر الميكانيكية في برامج اكتشاف الأدوية الخاصة بطب العيون. كما تعزز هذه التقنية من الثقة التنبؤية في تحديد المركبات الرائدة من خلال تمكين التتبع الطولي للتطور المرضي في الأنظمة ذات الصلة بالمرض.
يتكامل التألق الذاتي الكمي في سلسلة اكتشافات طب العيون، بدءاً من التحقق المبكر من الأهداف وصولاً إلى تقييم الفعالية قبل السريرية، مما يتيح اتخاذ قرارات مبنية على البيانات بالاستمرار أو التوقف بناءً على مقاييس صحة RPE.