RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
ar
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/53603-v
Elza van Deel1,2, Yanto Ridwan1, J. Nicole van Vliet1, Sasha Belenkov3, Jeroen Essers1,4,5
1Department of Genetics,Erasmus MC, Rotterdam, 2Department of Experimental Cardiology,Erasmus MC, Rotterdam, 3PerkinElmer, Inc., 4Department of Vascular Surgery,Erasmus MC, Rotterdam, 5Department of Radiation Oncology,Erasmus MC, Rotterdam
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
توضح هذه الطريقة استخدام التصوير المقطعي المحوسب الدقيق الكمي (MicroCT) لتقييم مورفولوجيا القلب ووظيفته والتروية والتمثيل الغذائي وقابليته للبقاء باستخدام عامل التباين المعالج باليود في الفئران المصابة بنقص تروية عضلة القلب المستحث تجريبيا. يمكن تطبيق هذه التقنية للتصوير الطولي غير المدمر عالي الإنتاجية في الجسم الحي لنماذج حيوانية مختلفة لأمراض القلب البشرية.
الهدف العام من هذا الإجراء هو إثبات استخدام التصوير المقطعي المحوسب الدقيق عالي السرعة في تصوير بوابات القلب التنفسية الجوهرية لتقييم وظائف عضلة القلب العالمية والإقليمية في نموذج نقص تروية القلب في الفئران. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في الفيزيولوجيا المرضية للقلب مثل ما هي التأثيرات على علم الأمراض أو علاجات malfa على وظيفة عضلة القلب العالمية والإقليمية؟ الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها توفر تقييما سريعا وطوليا وغير جراحي لأهم المعلمات القلبية التي يتم إجراؤها بسهولة من قبل غير الخبراء.
تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنية إلى علاج أمراض القلب والأوعية الدموية. كما يمكن استخدامه كأداة قبل السريرية للحصول على نظرة ثاقبة متقدمة لتطور أمراض القلب. ستظهر الإجراء نيكول فان فليت ، وهي فنية بالإضافة إلى إلزا فان ديل ، وهي باحثة ما بعد الدكتوراه ، ويانتو رضوان ، فني آخر من مختبرنا.
ابدأ بعمل شق صغير في جلد فأر يبلغ من العمر 12 أسبوعا بين الضلعين الثاني والثالث. ثم باستخدام خطافات صغيرة ، اسحب عضلات الصدر جانبا لكشف العضلات الوربية. بعد ذلك ، استخدم مقص زنبركي منحني بملليمترين لقطع العضلة الوربية الثالثة بعناية دون الإضرار بالرئتين.
ثم باستخدام الملقط ، قم بتمزيق التامور واستخدم قطعة من الشاش المبلل لدفع الرئتين جانبا. أعد وضع الخطافات داخل الصدر بحيث يكون جزء كبير من الجدار الحر للبطين الأيسر وجزء من الأذين الأيسر مرئيا. ثم باستخدام الأذين لتحديد موقع الشريان التاجي الأيسر ، أدخل خياطة جراحية من الحرير سبعة صفر تحت الشريان التاجي الأيسر وربط الخيط على بعد ملليمترين تحت حافة الأذين الأيسر لتوحيد حجم الاحتشاء.
بعد التأكيد بصريا على نجاح تحريض الاحتشاء عن طريق شحوب الجدار الحر للبطين الأيسر ، قم بإعادة تضخيم الرئة بعناية وأغلق الصدر بإحكام بخياطة جراحية من الحرير بستة صفر. نظف الجرح بالمحلول الملحي واستخدم المزيد من الغرز الحريرية لإغلاق الجلد متبوعا بتطبيق رذاذ الجروح لتحفيز التئام ومنع العدوى. ثم ضع الماوس في قفص على وسادة تدفئة حتى يتم تعافيه تماما.
بعد ثلاث إلى أربع ساعات من الجراحة، قم بتشغيل الماسح الضوئي المقروسات المجهري، وافتح برنامج التحكم في التصوير المقطعي المحوسب وقم بتسخين أنبوب الأشعة السينية. ثم عالج سدادة القارورة المطاطية لحاوية عامل تباين اليود بنسبة 70٪ كحول واستخدم حقنة منخفضة المساحة الميتة لسحب خمسة إلى 10 ميكرولترات من العامل لكل جرام من وزن جسم. بعد تطهير فقاعات الهواء ، امسح ذيل الفأر المخدر بالكحول بنسبة 70٪ وقم بتوسيع عروق الذيل بالحرارة.
حقن عامل التباين في وريد الذيل الجانبي. عندما يظهر زر الوضع المباشر في برنامج التحكم ، يكون أنبوب الأشعة السينية جاهزا. أدخل غطاء التجويف الصغير وسرير الصغير.
انقر فوق الزر قاعدة البيانات الجديدة في نافذة قاعدة البيانات وأدخل اسما لقاعدة البيانات الجديدة. عندما يظهر مربع الحوار ، انقر فوق الزر تصفح وانتقل إلى محرك الأقراص حيث سيتم حفظ قاعدة البيانات. ثم انقر فوق "موافق" وراقب قاعدة البيانات الجديدة في نافذة قاعدة البيانات.
لتعيين شروط الفحص، حدد المعلمات المناسبة. الآن ضع الماوس المحقون المخدر على فراش في الماسح الضوئي وحرك باب الجهاز إلى اليمين لإشراك قفل الأمان. انقر فوق زر الوضع المباشر لعرض الموضوع في الوقت الفعلي ومراقبة نافذة التقاط X.
يؤدي الضغط على أزرار التحكم في المحور Z للخلف وللأمام إلى تحريك فراش حتى يصبح صندوق الماوس داخل مجال الرؤية. ثم استخدم السهمين الأيمن والأيسر للتحكم في سرير لوضع داخل المربع المحيط الأزرق. حدد 90 من القائمة المنسدلة للتحكم في الدوران في نافذة برنامج التحكم وانقر فوق زر الضبط لتدوير القنطرية مع التأكد من بقاء داخل المربع المحيط الأزرق لنافذة التقاط X.
في نافذة التقاط X ، انقر بزر الماوس الأيسر فوق الماوس لتغيير حجم المنطقة القلبية التنفسية ذات الاهتمام. سحب الحواف بحيث تكون آثار القلب والجهاز التنفسي مرئية بوضوح في عرض التزامن. اضغط على وضع المنزل وقم بتغيير حجم المنطقة التي تهم القلب والجهاز التنفسي.
تأكد من أن منطقة الاهتمام تغطي الحجاب الحاجز والجزء القمي من القلب في جميع أوضاع القنطرية. ثم قم بتدوير القنطرية 90 درجة للتأكد من أن آثار القلب والجهاز التنفسي لا تزال مرئية بوضوح. عندما يكون في موضعه ، انقر فوق زر التصوير المقطعي المحوسب لتهيئة عملية الاستحواذ.
ستظهر رسالة تأكيد الفحص بالأشعة المقطعية. انقر فوق نعم. سيقوم مؤشر تنشيط الأشعة السينية الأحمر بتشغيل الجهاز وسيبدأ الفحص.
في نهاية المسح ، راقب المناظر عبر المحور والإكليل والسهمي لعمليات إعادة البناء في برنامج عارض ثنائي الأبعاد. أخيرا ، قم بإزالة من الماسح الضوئي وراقبه حتى يتم تعافيه بالكامل. هنا ، يتم عرض تجمع الدم التمثيلي المقاطع العرضية قصيرة المحورية الانبساطي والانقباضي النهائي لقلب الفأر المصاب باحتشاء عضلة القلب.
في هذه الصور ، تظهر المقاطع العرضية المحورية القصيرة والانبساطي النهائي لقلب الفأر بدون احتشاء عضلة القلب تحديدا ممتازا لتجويف البطين الأيسر مع القليل من ضوضاء الخلفية. لاحظ كيف تم تحديد مناطق التباين ، المقابلة لاحتشاء عضلة القلب ، بشكل جيد على الصور المحورية القصيرة لقلب الفأر الخاضع لربط الشريان التاجي الأمامي الأيسر الهابط. ولكن ليس في الذي يتم تشغيله بشكل زائف.
وفقا لنموذج جمعية القلب الأمريكية المكون من 17 مقطعا ، يمكن تقسيم البطين الأيسر إلى أجزاء قاعدية ومتوسطة التجويف وقمية قصيرة المحور. في هذه المخططات القطبية المحيطية التمثيلية ، تظهر وفرة غير متشابهة واضحة في الأجزاء الأمامية الوسطى والوسطى السفلية الجانبية والوسطى الأمامية والقمية الأمامية والقمية في فأر احتشاء عضلة القلب مقارنة بالحيوان الذي يتم تشغيله بشكل زائف. بمجرد إتقان ، يمكن إكمال تحريض احتشاء عضلة القلب في 45 دقيقة بينما يتطلب التصوير المقطعي المحوسب اللاحق أربع ساعات.
أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر أن الأداء الوظيفي للقلب يعتمد على نوع ودرجة التخدير. وبالتالي ، من أجل قياسات دقيقة ، يجب أن يظل معدل ضربات القلب فسيولوجيا قدر الإمكان أثناء الحصول على الصورة. بعد تطويرها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال علم الأدوية لاستكشاف استراتيجيات التدخل في الفئران وتحليل تأثير استراتيجيات العلاج المستوية على تطور المرض.
بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لجراحة احتشاء عضلة القلب ومعرفة كيفية استخدام نظام التصوير المقطعي المحوسب عالي السرعة جنبا إلى جنب مع عامل تباين تجمع الدم القائم على اليود. لا تنس أن العمل مع Isoflurane يمكن أن يكون خطيرا وأنه يجب دائما اتخاذ الاحتياطات مثل التهوية الجيدة أثناء تنفيذ هذا الإجراء.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Related Videos
10:16
Related Videos
33.3K Views
10:53
Related Videos
5.8K Views
06:53
Related Videos
9.3K Views
06:46
Related Videos
10K Views
11:13
Related Videos
7.1K Views
12:54
Related Videos
3.7K Views
12:15
Related Videos
2.9K Views
11:09
Related Videos
4.2K Views
07:33
Related Videos
840 Views
06:02
Related Videos
12.1K Views