الفحص حساس للغاية لقياس مرفق الفيروسة الرملية خلية

الهدف العام من هذا البروتوكول هو القياس الكمي لارتباط جسيمات فيروس الساحة بالخلايا المضيفة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي حساسيتها العالية. يمكن أيضا تكييفه لقياس الالتقام الخلوي للفيريون ، وكذلك إطلاق الجينوم في السيتوبلازم بعد الاندماج.

للبدء ، لعمل DMEM كامل ، إلى زجاجة 500 مل من DMEM ، أضف 50 مل من مصل الأبقار الجنينية المعطل بالحرارة ، وخمسة ملليلتر لكل من 100X البنسلين والستربتومايسين ، و 100X HEPES العازلة. في نهاية اليوم ، قم بالبذور 2.5 مرة 10 إلى خلايا Vero E6 الرابعة لكل بئر ، ثلاث نسخ لكل فيروس ، في صفيحة زراعة الأنسجة المكونة من 48 بئرا في حجم نهائي يبلغ 500 ميكرولتر من DMEM الكامل. احتضان اللوحة عند 37 درجة مئوية في حاضنة رطبة مع 5٪ ثاني أكسيد الكربون لمدة 10 إلى 18 ساعة.