Name: افضل طريقة لرابيد تنبيب القصبة الهوائية في الفئران (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-02-22T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 46 s
Description: تعلم طريقة سريعة لتنبيب القصبة الهوائية في الفئران لإعطاء الأدوية مباشرة في الرئتين. هذه التقنية سهلة التعلم ولا تحتاج معدات متخصصة وتقلل من تلف الأنسجة المحيطة.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

الكتاب أشكر براين جونسون علم الأنسجة والتصوير الأساسية في جامعة واشنطن للمساعدة في تلطيخ ثلاثي الألوان والتحليل. وأيد هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة منح HL098067 وHL089455.

وقد وافقت اللجان المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) في جامعة واشنطن وسيناي الطبي مركز العمل الحيوان اللازم لهذه الدراسات. 1. إعداد <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعقيم كل من ملقط نهاية حادة والأوتوكلاف خافضة عبر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استخدام خزانة السلامة البيولوجية، وإعداد مخزون عمل بلم في برنامج تلفزيوني من مسحوق مجفف بالتجميد. يصوتن الحل لمدة 10 دقيقة في 35 كيلوهرتز لضمان حتى الاختلاط. ملاحظة: ينصح الحجم الكلي يتراوح بين 30 و 45 ميكرولتر لمنع الاختلاف pipetting لفي نهاية منخفضة، والاختناق مع كميات أكبر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد مساحة العمل النظيفة التي تضم حوالي 1 م 2 لإجراء العملية نفسها، وكذلك المواقع المخصصة لأقفاص قبل وبعد العملية على حد سواء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إصلاح قاعدة في مجلس الإجراء على مقاعد البدلاء على الفور أمام الباحث من خلال وضع 2 أو 3 شرائح من الشريط مختبر عبر قاعدة وunderlيينغ مقاعد البدلاء. انظر الشكل 1 لمزيد من مواصفات على خلق لوحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعادل طول واحد من حجم 4.0 خيوط الجروح بين المسمارين المواقع من مجلس الإجراء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توليد مقياس التنفس مؤقت عن طريق إزالة والتخلص من المكبس من ثلاثة 1 مل الحقن، وإيداع 60 ميكرولتر من برنامج تلفزيوني في الجزء العلوي من كل برميل لتشكيل ختم محكم. تأمين مركز القسطرة فضفاضة إلى واحدة من الحقن ووضعه على جانب واحد من مجلس الإدارة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نضح 300 ميكرولتر من الهواء إلى حقنة 1 مل ووضعه على جانب واحد من مجلس الإدارة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع قطعة إضافية من الشريط حوالي 6 بوصات في الطول، ومكان لجانب واحد. وسوف تستخدم هذه لتأمين الحيوان إلى المجلس في الخطوة 2.4. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انشاء غرفة الأيزوفلورين. إرفاق O 2، الأيزوفلورين، والفراغ إلى الموانئ المناسبة على كل من غرفة التعرض والفراغ التخليص. بدلا من ذلك، إدارة مخدر في الأيزوفلورين متوافق مع البيولوجيةمجلس الوزراء السلامة. </li></ol> 2. التنبيب <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الماوس مع isoflurane في غرفة حتى يفقد وعيه والتنفس يتباطأ إلى المعدل المناسب. ويشمل التعرض نموذجي 4٪ الأيزوفلورين و 2٪ O 2 لمدة 3 إلى 4 دقائق، والنتيجة المثالية هي 2-2،5 دقيقة من التخدير. وهذا يتوافق مع معدل التنفس من 1 التنفس كل ثانية 2. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> أثناء انتظار التخدير لوضع في، نضح ما بين 30 و 45 ميكرولتر من بلم في pipettor ومكان لجانب واحد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما تصبح جاهزة، تعليق الماوس مخدرا بواسطة القواطع العلوية من موضوع تعلق على مسامير المواقع من منصة الإجراء. تأكد من أن ظهر الحيوان شقة تقع ضد سطح المنصة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> والحرص على عدم تقييد التهوية، ضع قطعة من الشريط فضفاضة عبر (الذيلية) الجزء السفلي من التجويف الصدري، وذلك فوق الحجاب الحاجز. وينبغي أن يكون وضع ما يكفي من ضيق للحفاظ على التوافق السليم خلال بروكedure، ولكن ليس ضيق بحيث أنه يحد من التنفس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدوره على إضاءة ما بين 80٪ و كثافة 100٪ وتوجيه معقوفة بحيث يكون 1-2 سم من سطح الجلد، قرب الضفيرة الشمسية. فحص دوري غيض من معقوفة للحرارة للتأكد من أنه لا تجرح الماوس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يقف وراء المنصة، استخدام معقم، ملقط نهاية حادة لتحديد اللسان. الحرص على تجنب القواطع السفلية، بلطف قبضة ورسم اللسان من تجويف الفم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استعمال اليد المتبقية، إدراج خافضة واستخدامها لتسطيح اللسان ضد الكلمة من تجويف الفم. الافراج عن ملقط، ولكن ترك خافضة في مكان لالخطوتين التاليتين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توجيه الضوء بحيث القصبة الهوائية مرئيا من خلال توجيه معقوفة بشكل قريب من مستوى الضفيرة الشمسية حتى تصل إلى مستوى القصبات mainstem. ملاحظة: القصبة الهوائية يمكن تمييزها بسهولة عن طريق عمل التنفس، مبادرة الخوذ البيضاءالفصل يسبب الضوء المنبعث أن تتقلب في كثافة. عند وضعه بشكل صحيح، وهذا الهيكل أن يكون ملحوظ في الطائرة المحورية كما دبوس في موقع مركزي الضوء مع الإضاءة المحيطة الحد الأدنى في تجويف الفم نفسه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> زاوية الحقنة بحيث يتبع مسار الطبيعي للالقصبة الهوائية، وخفض القسطرة طرف 22-G، مع حقنة المرفقة التي تحتوي على الحبرية، مباشرة في التجويف. ستبدأ فقاعة برنامج تلفزيوني لترتفع وتنخفض مع كل نفس على وضع ناجحة. ملاحظة: قد يتم تأخير هذا الإجراء من قبل عدة ثوان نتيجة التخدير العميق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغذية القسطرة في 5 ملم إضافية. إزالة خافض اللسان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التحول المحقنة إلى الجانب المعاكس، والتي تجتاح المحور، وإزالة بلطف الحقنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إيداع ما بين 30 و 45 ميكرولتر من بلم في وسط المناطق الداخلية من مركز القسطرة، ونعلق الحقنة الثانية والاستغناء 300 ميكرولتر من الهواء إلى المركز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استبدال الثانيةالمحاقن مع تحتوي على أول فقاعة من برنامج تلفزيوني. سيستمر فقاعة لترتفع وتنخفض إذا كان قد تم إجراء العملية بنجاح. </li></ol> العناية 3. بعد الإجرائية <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة القسطرة والشريط، ووضع الحيوان في مكان دافئ جاف حتى يستعيد وعيه - عادة في غضون بضع دقائق. </li></ol>

<ol><li>Hyde, D. M., Hamid, Q., Irvin, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomy%2C+pathology%2C+and+physiology+of+the+tracheobronchial+tree%3A+emphasis+on+the+distal+airways%5BTitle%5D)+AND+%22J+Allergy+Clin+Immunol%22%5BJournal%5D)">Anatomy, pathology, and physiology of the tracheobronchial tree: emphasis on the distal airways.</a> J Allergy Clin Immunol. 124, S72-S77 (2009).</li>
<li>Rosenthal, N., Brown, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+ascending%3A+perspectives+for+human-disease+models%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The mouse ascending: perspectives for human-disease models.</a> Nat Cell Biol. 9, 993-999 (2007).</li>
<li>Peters, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+as+a+model+for+human+biology%3A+a+resource+guide+for+complex+trait+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Genet%22%5BJournal%5D)">The mouse as a model for human biology: a resource guide for complex trait analysis.</a> Nat Rev Genet. 8, 58-69 (2007).</li>
<li>Baron, R. M., Choi, A. J., Owen, C. A., Choi, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+manipulated+mouse+models+of+lung+disease%3A+potential+and+pitfalls%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Genetically manipulated mouse models of lung disease: potential and pitfalls.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 302, 485-497 (2012).</li>
<li>Sharma, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+respiratory+distress+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ+Clin+Evid%22%5BJournal%5D)">Acute respiratory distress syndrome.</a> BMJ Clin Evid. 2010, (2010).</li>
<li>Saguil, A., Fargo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+respiratory+distress+syndrome%3A+diagnosis+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Am+Fam+Physician%22%5BJournal%5D)">Acute respiratory distress syndrome: diagnosis and management.</a> Am Fam Physician. 85, 352-358 (2012).</li>
<li>Wilson, M. S., Wynn, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+fibrosis%3A+pathogenesis%2C+etiology+and+regulation%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunol%22%5BJournal%5D)">Pulmonary fibrosis: pathogenesis, etiology and regulation.</a> Mucosal Immunol. 2, 103-121 (2009).</li>
<li>Wuyts, W. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathogenesis+of+pulmonary+fibrosis%3A+a+moving+target%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">The pathogenesis of pulmonary fibrosis: a moving target.</a> Eur Respir J. 41, 1207-1218 (2013).</li>
<li>Mouratis, M. A., Aidinis, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+pulmonary+fibrosis+with+bleomycin%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Pulm+Med%22%5BJournal%5D)">Modeling pulmonary fibrosis with bleomycin.</a> Curr Opin Pulm Med. 17, 355-361 (2011).</li>
<li>Moeller, A., Ask, K., Warburton, D., Gauldie, J., Kolb, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+bleomycin+animal+model%3A+a+useful+tool+to+investigate+treatment+options+for+idiopathic+pulmonary+fibrosis%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Biochem+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">The bleomycin animal model: a useful tool to investigate treatment options for idiopathic pulmonary fibrosis?</a> Int J Biochem Cell Biol. 40, 362-382 (2008).</li>
<li>Myllärniemi, M., Kaarteenaho, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+treatment+of+idiopathic+pulmonary+fibrosis+-+preclinical+and+clinical+studies+of+pirfenidone%2C+nintedanib%2C+and+N-acetylcysteine%5BTitle%5D)+AND+%22European+Clinical+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">Pharmacological treatment of idiopathic pulmonary fibrosis - preclinical and clinical studies of pirfenidone, nintedanib, and N-acetylcysteine.</a> European Clinical Respiratory Journal. 2, (2015).</li>
<li>Reinert, T., Baldotto, C. S. dR., Nunes, F. A. P., Scheliga, A. A. dS. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bleomycin-Induced+Lung+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Bleomycin-Induced Lung Injury.</a> Journal of Cancer Research. 2013, 1-9 (2013).</li>
<li>Lakatos, H. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oropharyngeal+aspiration+of+a+silica+suspension+produces+a+superior+model+of+silicosis+in+the+mouse+when+compared+to+intratracheal+instillation%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Lung+Res%22%5BJournal%5D)">Oropharyngeal aspiration of a silica suspension produces a superior model of silicosis in the mouse when compared to intratracheal instillation.</a> Exp Lung Res. 32, 181-199 (2006).</li>
<li>Helms, M. N., Torres-Gonzalez, E., Goodson, P., Rojas, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+tracheal+instillation+of+solutes+into+mouse+lung%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Direct tracheal instillation of solutes into mouse lung.</a> J Vis Exp. , (2010).</li>
<li>Osier, M., Oberdorster, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intratracheal+inhalation+vs+intratracheal+instillation%3A+differences+in+particle+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Fundam+Appl+Toxicol%22%5BJournal%5D)">Intratracheal inhalation vs intratracheal instillation: differences in particle effects.</a> Fundam Appl Toxicol. 40, 220-227 (1997).</li>
<li>Driscoll, K. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intratracheal+instillation+as+an+exposure+technique+for+the+evaluation+of+respiratory+tract+toxicity%3A+Uses+and+Limitations%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Sci%22%5BJournal%5D)">Intratracheal instillation as an exposure technique for the evaluation of respiratory tract toxicity: Uses and Limitations.</a> Toxicol Sci. 55, 24-35 (2000).</li>
<li>MacDonald, K. D., Chang, H. Y., Mitzner, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+simple+method+of+mouse+lung+intubation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Physiol+%281985%29%22%5BJournal%5D)">An improved simple method of mouse lung intubation.</a> J Appl Physiol (1985). 106, 984-987 (1985).</li>
<li>Spoelstra, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+and+simple+method+for+endotracheal+intubation+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">A novel and simple method for endotracheal intubation of mice.</a> Lab Anim. 41, 128-135 (2007).</li>
<li>Cai, Y., Kimura, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+intratracheal+intubation+to+study+the+pathology+and+physiology+of+mouse+lung%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Noninvasive intratracheal intubation to study the pathology and physiology of mouse lung.</a> J Vis Exp. , e50601(2013).</li>
<li>Starcher, B., WIlliams, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+for+intratracheal+instillation+of+endotoxin+into+the+lungs+of+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim%22%5BJournal%5D)">A method for intratracheal instillation of endotoxin into the lungs of mice.</a> Lab Anim. 23, 234-240 (1989).</li>
<li>Daubeuf, F., Frossard, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+bronchoalveolar+lavage+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Performing bronchoalveolar lavage in the mouse.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 2, 167-175 (2012).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Severe+lung+fibrosis+requires+an+invasive+fibroblast+phenotype+regulated+by+hyaluronan+and+CD44%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Severe lung fibrosis requires an invasive fibroblast phenotype regulated by hyaluronan and CD44.</a> J Exp Med. 208, 1459-1471 (2011).</li>
<li>Grazioli, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CYR61+%28CCN1%29+overexpression+induces+lung+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">CYR61 (CCN1) overexpression induces lung injury in mice.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 308, L759-L765 (2015).</li>
<li>Redente, E. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+necrosis+factor-alpha+accelerates+the+resolution+of+established+pulmonary+fibrosis+in+mice+by+targeting+profibrotic+lung+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Tumor necrosis factor-alpha accelerates the resolution of established pulmonary fibrosis in mice by targeting profibrotic lung macrophages.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 50, 825-837 (2014).</li>
<li>Lawrenz, M. B., Fodah, R. A., Gutierrez, M. G., Warawa, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intubation-mediated+intratracheal+%28IMIT%29+instillation%3A+a+noninvasive%2C+lung-specific+delivery+system%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Intubation-mediated intratracheal (IMIT) instillation: a noninvasive, lung-specific delivery system.</a> J Vis Exp. , e52261(2014).</li>
</ol>

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

في الحالات التي تكون فيها هباء غير عملي نظرا لمحدودية كاشف، والسلامة، أو التكلفة، والإدارة القصبة الهوائية المباشرة هي طريقة مثلى لإيصال عوامل دخيلة إلى الرئتين عبر الرغامى 16 تقطير وقد استخدم على نطاق واسع لتحقيق ذلك؛ ومع ذلك، كما هو الحال مع كل تدخل جراحي، فإنه يحمل أيضا في طياته احتمالات المضاعفات الناجمة عن الإجراء في حد ذاته، وليس بالضرورة وكيل يجري تغرس 13 لهذه الأسباب، فقد أصبح شائعا بشكل متزايد لإدارة المواد مباشرة إلى القصبة الهوائ...

على الرغم من بعض الاختلافات التشريحية والفسيولوجية، تستمر 1 نماذج الفئران أنها لا تقدر بثمن لنمذجة البيولوجيا البشرية والتسبب بالمرض. 2 من وجهة نظر لتربية والفئران من السهل التعامل معها، ويكون وقتا تربية منخفضة، والعمر المتوقع تسارع، وغير مكلفة نسبيا الى المنزل. مع تطور سلالات متنوعة الوراثية واستراتيجيات (على سبيل المثال، مشروطة تدق الرافضة والفئران مراسل والنهج تتبع النسب، وما إلى ذلك)، فضلا عن مجموعة واسعة من الكواشف المتاحة (على سبيل المثال، الأجسام المضادة، والبروتينات المؤتلف، مثبطات، وما إلى ذلك)، أصبحت الفئران والضروري نموذج الفقاريات كائن لكشف عمليات التوازن وأمراض الإنسان. 3 وكانت الفئران ذات قيمة خاصة لدراسة أوضاع الرئوية، بما في ذلك الإصابات الحادة الرئة (علي) والتليف الرئوي. 4 ALI في البشر يمكن أن تكون ناجمة عن الصدمة أو الإصابة، أو تعفن الدم ويتميز الظهارية وتسرب البطانية (أي، وذمة)، والتهاب، والتليف الوليدة. في كثير من المرضى، ALI يتقدم لفي شكل حاد، متلازمة الضائقة التنفسية الحادة (ARDS)، والذي غالبا ما يؤدي إلى تليف وفاة بسبب فشل في الجهاز التنفسي. 5،6 التليف الرئوي هو تقدمي، علم الأمراض القاتلة والتي تتميز ترسب الزائد من المصفوفة خارج الخلية ، وأبرزها النوع الأول من الكولاجين، مما يؤدي إلى عرقلة وظيفة الرئة. 7،8 إدارة بليوميسين (بلم) هو النموذج الأكثر استخداما على نطاق واسع وأفضل وصف لإحداث ALI وتليف في حيوانات التجارب. 9 وعلى الرغم من بلم الناجم عن التليف الرئوي في القوارض يفعل لا ألخص تماما الظواهر التليفية الإنسان، أدت 10 دراسات الفأر مع هذا النموذج إلى اكتشاف العديد من العوامل الهامة التي تؤثر على ظهور وتطور المرض. 11 في حين أن الآلية الدقيقة (ق) وراء تكون الألياف التي يسببها بلم غير معروفة، وإصابة بدءويعتقد أن تنشأ من فواصل حبلا الحمض النووي التي تعتمد على الاتصال في الخلايا الظهارية المبطنة الشعب الهوائية التي تقوم بتنفيذ أو الحويصلات الهوائية، وعلى وجه الخصوص، نوع 1 pneumocytes 12 الحاجة للاتصال المباشر بين بلم والظهارة الرئوية يسلط الضوء على أهمية وجود مسار تسليم قوي وهذه المخاوف هي أيضا ثيق لمجموعة واسعة من العلاجات التي تستهدف الشعب الهوائية البعيدة، بما في ذلك البروتينات المؤتلف، والأجسام المضادة، سيرنا، الفيروسات، البكتيريا، والجسيمات، وأكثر من ذلك. طموح الفم والبلعوم (OPA) وقد استخدم على نطاق واسع لهذا الغرض 13، ولكن أحد أوجه القصور الرئيسية من التلوث النفطي هو جزء من وكيل تسليمها قد ابتلع في الجهاز الهضمي، مما يؤدي إلى عدم الدقة في الجرعة. مقاربة أخرى تستخدم على نطاق واسع هو تقطير عبر الرغامى، الذي ينطوي على القصبة الهوائية تحت التخدير قوية لفضح القصبة الهوائية وتقطير وكيل مباشرة في الجهاز التنفسي. 14 ومع ذلك، لا يجوز هذا فقطإجراء يكون غير مرغوب فيه بسبب invasivity لها، ولكنها أيضا وقتا طويلا، ويتطلب عادلة قليلا من التدريب، ويؤدي إلى إصابة قوية في الجهاز التنفسي وقد وضعت. 15،16 العديد من البروتوكولات التي تنطوي على الإدارة المباشرة للعملاء في القصبة الهوائية دون الحاجة للتدخل الجراحي، 16،17،18،19،20 أوقات الانتعاش ولكن هذه الطرق تتضمن تمديد الناجمة عن التخدير قوية، واستخدام معدات باهظة الثمن (أي، منظار الأذن / المنظار، لوحات إجراء المتاحة تجاريا، بالألياف البصرية الأسلاك، وما إلى ذلك)، وجود فائض من التلاعب في تجويف الفم، وعدم اليقين بشأن الجرعة. توضح هذه الورقة طريقة سهلة نسبيا للإدارة عبر التنبيب التي تسمح للباحث بسرعة، غير مكلفة، وغرس موثوق كاشف في الرئة الفئران مع خطر محدود من الضرر المتبقية إلى الأنسجة المحيطة بها.

<table><tbody><tr><td>Bleomycin للحقن ، 30 وحدة / قارورة</td><td>APP Pharmaceuticals، LLC</td><td>103720</td><td>للحصول على أفضل النتائج ، يجب تعليق BLM في PBS ، وتخزينه كمواد</td></tr> مخفضة لسان <tr><td>Blunt End</td><td></td><td></td><td></td></tr> Filps <tr><td>للاستخدام الفردي (أي Valleylab Blade Blade Electrode ، 2.4 بوصة) & nbsp ؛</td><td>Covidien</td><td>E1551G</td><td>قبل الاستخدام ، قم بإنشاء منحنى 45 درجة 1.5 سم &nbsp من طرف الشفرة. يمكن أيضا إنشاء خافض مناسب من أي أداة معدنية ذات أبعاد مماثلة.</td></tr><tr><td>قسطرة إكسيل سفليت 22 جم × 1 بوصة</td> <td>إكسل إنترناشيونال</td><td>26746</td><td></td></tr><tr><td>1 مل حقنة درن قابلة للتصرف (200 / ليرة لباسية ، 1600 / كاليفورنيا)</td> <td>309659</td><td></td> <td>بحريني</td></tr><tr><td>0.2 مل ماصة وأطراف</td><td></td><td></td><td></td>فلتر</tr><tr><td>إضاءة الألياف الخفيفة. الموديل 181-1: موديل 180 متزاوج مع إضاءة معقوفة مزدوجة قياسية</td><td>دولان جينر إندستريز، إنك.</td><td>181-1</td><td>لا ينصح باستخدام مصابيح LED ذات الإخراج المنخفض لأنها تفشل في إضاءة القصبة الهوائية بشكل كاف.</td></tr><tr>لوحة <td></td><td></td><td>التنبيب</td><td>انظر الرسم البياني 1.</td></tr><tr><td>شريط الملصقات الملون: 0.5 &nbsp ؛ في. </td><td>فيشربراند</td><td>واسع 15-901-15A</td><td></td></tr><tr><td>أكسجين &nbsp ؛</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>محلول ملحي مخزن بالفوسفات ، 1X</td><td>Corning</td><td>21-040-CV</td><td>يجب أن يكون المنتج معقما</td></tr><tr><td>بكرة خياطة مضفرة سوداء من الحرير غير المعقم ، 91.4 م ، مقاس 4-0</td><td>جهاز هارفارد</td><td>517698</td><td></td></tr><tr><td>آلة تخدير أعلى الطاولة معدات طبية http://www.highlandmedical.net/</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>غرفة الأيزوفلوران التعريفي العلوي</td><td>MIP / Anesthesia Technologies</td><td>AS-01-0530-SM</td><td></td></tr><tr><td>FORANE (isoflurane ، USP) سائل للاستنشاق 100 مل & nbsp ؛</td><td>باكستر</td><td>1001936040</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; نظام علم الأمراض الرقمي Nanozoomer</td><td>Hamamatsu</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IgM ELISA Quantification Kit &nbsp;</td><td>مختبرات البيثيل</td><td>E90-101</td><td></td></tr></tbody></table>

افضل طريقة لرابيد تنبيب القصبة الهوائية في الفئران

An Improved Method for Rapid Intubation of the Trachea in Mice

على الرغم من بعض الاختلافات التشريحية والفسيولوجية ، لا تزال نماذج الفئران أداة أساسية لدراسة أمراض الرئة البشرية. سمية البليومايسين هي نموذج شائع الاستخدام لدراسة كل من إصابة الرئة الحادة والتليف ، وقد تم تطوير طرق متعددة لإدارة البليومايسين (والعوامل السامة الأخرى) في الرئتين. ومع ذلك ، فإن العديد من هذه الأساليب ، مثل التقطير عبر القصبة الهوائية ، لها عيوب متأصلة ، بما في ذلك الحاجة إلى التخدير القوي وجراحة البقاء على قيد الحياة. تشير هذه الورقة إلى طريقة سريعة وقابلة للتكرار للتنبيب داخل القصبة الهوائية تتضمن تخديرا استنشاقيا خفيفا ، وتصور القصبة الهوائية ، واستخدام مقياس التنفس البديل لتأكيد التعرض. كدليل على المفهوم ، تم إعطاء الفئران C57BL / 6 البالغة من العمر 8-12 أسبوعا إما 2.0 وحدة / كجم من بليومايسين أو حجم مكافئ من PBS ، وتم قياس كل من الضرر ونقاط النهاية الليفية بعد التعرض. يسمح هذا الإجراء للباحثين بعلاج مجموعة كبيرة من الفئران في فترة قصيرة نسبيا بتكلفة قليلة وأقل قدر من الرعاية بعد العملية.

<html> تم رصد الفئران تنبيب يوميا لفقدان الوزن والضيق، والتضحية في وقت لاحق 4، 10 أو 17 يوما عن طريق الحقن داخل الصفاق من 2.5٪ 2،2،2- ثلاثي بروم إيثانول. تم جمع غسل القصبات (نال) في ثلاثة يغسل من برنامج تلفزيوني كما هو موضح في أماكن أخرى 21 وكان قد حدد في الرئة اليمنى في 10٪ من الفورمالين، البارافين جزءا لا يتجزأ، وملطخة ثلاثي الألوان ماسون من جامعة واشنطن الأنسجة والتصوير الأساسية 22. <p class="jove_conte...

تقدم هذه المقالة طريقة سريعة وبسيطة لإدارة بليوميسين مباشرة إلى القصبة الهوائية الماوس عبر التنبيب. المزايا الرئيسية لهذه الطريقة هي أنها تكرار للغاية، وسهلة لسيده، ولا يتطلب معدات متخصصة أو أوقات الانتعاش طويلة.

Despite some anatomical and physiological differences, mouse models continue to be an essential tool for studying human lung disease. Bleomycin toxicity ...

الهدف العام من هذا الإجراء هو توفير طريقة سريعة وسهلة وموثوقة لإعطاء الكواشف في رئة الفئران عن طريق التنبيب. كما تحد هذه الطريقة من مخاطر حدوث أضرار متبقية في الأنسجة المحيطة وتتميز بكونها غير مكلفة. ويمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على أسئلة رئيسية في مجالات بيولوجيا الرئة الأساسية وآليات المرض.مثل إصابة الرئة الحادة وتكون التليف. وتتمثل المزايا الرئيسية لهذه التقنية في كونها عالية القابلية للتكرار، وسهلة الإتقان، ولا تتطلب معدات متخصصة أو فترات تعافٍ طويلة. يجب تنفيذ الإجراء باستخدام أدوات معقمة.قم بأوتوكليف كل من ملقط النهاية غير المدببة والمخفض للسان. وفي غطاء تدفق هوائي معقم، قم بتحضير مخزون عمل من الكاشف لإعطائه عبر عملية الأنبوب الرغامي. يُوصى بحجم جرعة يتراوح بين 30 و 45 µL.قم بمعالجة المحلول بالموجات فوق الصوتية لمدة 10 دقائق عند تردد 35 kilohertz لضمان الخلط المتجانس. الآن، قم بتجهيز مساحة العمل؛ خصص مساحة لا تقل عن متر مربع واحد لمنطقة العمل نفسها.بالإضافة إلى تخصيص أماكن منفصلة للحيوانات قبل الإجراء وبعده. والآن، قم بتجهيز لوحة الإجراءات؛ حيث يتم قص هذا النموذج المخصص من صفيحة ألومنيوم وتدعيمه بزاوية T.تتوفر أيضًا لوحات تجارية مماثلة. باستخدام بضع شرائط من الشريط اللاصق، قم بتثبيت قاعدة لوحة الإجراء على المنضدة، بحيث تكون مباشرة أمام الباحث. ثم اربط قطعة من خيط جراحي بمقاس 4.0 بين برغيي التثبيت الموجودين في لوحة الإجراء.بعد ذلك، قم ببناء مقياس تنفس. أزل المكبس من ثلاث حقن سعة 1 mL. ثم ضع ما يصل إلى 60 µL من PBS في الجزء العلوي من أسطوانة كل حقنة.ثبّت إحدى هذه المحاقن الثلاث بشكل غير محكم في محور القسطرة. عند الاستخدام، سيؤدي الهواء المنبعث من القصبة الهوائية إلى ارتفاع وانخفاض محلول PBS في أسطوانة المحقنة. ضع هذه المجموعة بجانب لوحة الإجراءات.ضع المحقنتين الإضافيتين الأخريين في مكان قريب لتكونا كاحتياط. بعد ذلك، اسحب 300 µL من الهواء في محقنة رابعة، وضعها على أحد جانبي اللوحة. قم أيضاً بتجهيز عدة قطع من الشريط اللاصق بطول ست بوصات لتثبيت الحيوان على اللوحة.بعد ذلك، قم بتجهيز غرفة الإيزوفلوران إذا لزم الأمر. وصّل خطوط الأكسجين والإيزوفلوران والشفط بالمنافذ المناسبة في الغرفة وشفاط التطهير. ابدأ بتخدير الفأر.ومن المهم بمكان أن يقوم كل مختبر بتحسين مدة التعرض للإيزوفلوران وفقاً لاحتياجاته الخاصة، نظراً لأن عوامل مثل عمر الحيوان ووزنه وحالته الصحية يمكن أن تؤثر جميعها على الاستجابة للمخدرات. وأثناء الانتظار، يتم سحب جرعة البولوس من الكاشف في رأس الماصة، ووضعها جانباً. وعندما يصبح الفأر في حالة تخدير، يتم تعليقه من القواطع العلوية بواسطة الخيط الموجود على منصة الإجراء، بحيث يكون ظهر الحيوان مستوياً تماماً على سطح المنصة.الآن، ومع الحرص على عدم تقييد التهوية، قم بتثبيت الجزء السفلي من التجويف الصدري، فوق الحجاب الحاجز مباشرة، إلى المنصة باستخدام شريط لاصق بشكل غير محكم، وذلك للحفاظ على استقامة الحيوان أثناء الإجراء. بعد ذلك، اضبط جهاز الإضاءة ذو العنق المرن على 80 إلى 100%. ضع الضوء على مسافة سنتيمتر واحد إلى سنتيمترين من سطح الجلد بالقرب من الضفيرة الشمسية، وتحقق بانتظام من عدم تسببه في ارتفاع درجة حرارة الجلد. ومن خلف المنصة، استخدم الملقط ذو الطرف الثلم لتحديد موقع اللسان.بعد ذلك، مع الحرص على تجنب القواطع السفلية، أمسك اللسان برفق واسحبه إلى خارج التجويف الفموي. وأثناء تثبيت اللسان، قم بتسطيحه باستخدام خافض اللسان باليد غير المهيمنة، مما يسمح للملقط بالتحرر. الآن، وجه مصباح عنق الإوزة تقريباً من الضفيرة الشمسية إلى الشعب الهوائية الرئيسية لإضاءة القصبة الهوائية.يمكن أيضاً تمييز القصبة الهوائية بسهولة من خلال عملية التنفس، والتي ستؤدي إلى تذبذب شدة الضوء عند خروجه من القصبة الهوائية. وعندما يتم وضعها بشكل صحيح، تظهر القصبة الهوائية كنقطة مركزية من الضوء، مع الحد الأدنى من الضوء المحيط داخل التجويف الفموي نفسه. يجب ألا يدخل القسطرة إلى التجويف الفموي حتى تصبح رؤية القصبة الهوائية مثالية.لا يمكن رؤية الرغامى من خلال تحريك مصدر الضوء أو أداة خفض اللسان. يجب على الباحثين تحرير اللسان وإعادة محاولة الإجراء. بعد ذلك، يتم توجيه المحقنة بزاوية تتبع المسار الطبيعي للرغامى.ثم يتم خفض طرف القسطرة مقاس 22 gauge، مع المحقنة المتصلة بها والتي تحتوي على PBS، مباشرة إلى داخل اللمعة. الآن، يتم إدخال القسطرة لمسافة خمسة مليمترات إضافية ثم يُزال خافض اللسان. إذا تم الوضع بشكل صحيح، ستبدأ فقاعة PBS في أسطوانة المحقنة بالارتفاع والانخفاض مع كل نفس.كن صبوراً عند البحث عن هذا المؤشر، حيث يمكن أن تؤدي كل من التخدير العميق والخفيف إلى تغيير تردد التنفس. بعد ذلك، انقل المحقنة إلى اليد غير المهيمنة. وأثناء الإمساك بمركز المحقنة، قم بإزالتها برفق مع ترك القسطرة في مكانها.باستخدام اليد المهيمنة، ضع كتلة الكاشف المحضرة مباشرة في مركز صرة القسطرة. ثم قم بتركيب المحقنة الثانية التي تحتوي على 300 microliters من الهواء وادفع الهواء داخل الصرة؛ سيساعد ذلك في ضمان توزيع كتلة الكاشف بشكل جيد في الرئتين.الآن، قم بإزالة المحقنة واستبدلها بمحقنة تحتوي على فقاعة من PBS. ستستمر الفقاعة في الصعود والهبوط إذا تم تنفيذ الإجراء بنجاح. الآن، قم بإزالة القسطرة والشريط اللاصق.ثم يوضع الحيوان في مكان دافئ وجاف حتى يستعيد وعيه، وعادة ما يحدث ذلك في غضون بضع دقائق. وتمت مراقبة الفئران التي خضعت للتنبيب يومياً لرصد أي فقدان في الوزن.جُمعت الفئران في الأيام الرابع والعاشر والسابع عشر بعد التنبيب الرغامي بـ bleomycin. وجُمع سائل غسيل القصبات والأسناخ من هذه الرئات ثم جرى تحليله. وأظهرت المستويات المرتفعة من IgM زيادة ملحوظة تعتمد على الوقت في نفاذية الرئة، مما يشير إلى وجود خلل وظيفي في الحاجز الظهاري و/أو البطاني.تم تثبيت الرئات اليمنى وتلوينها بصبغة ماسون ثلاثية الألوان (Masson's trichrome). كما تم قياس الاستجابة الليفية، والتي تعد مؤشراً معتمداً لمحتوى الكولاجين الكلي. وأظهرت المقاطع النسيجية زيادة في سماكة الخلال الرئوي بناءً على نوع العلاج، وزيادة في الآفات الليفية.بمجرد إتقان هذه التقنية، يمكن تنفيذها في أقل من دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. وأثناء محاولة تنفيذ هذا الإجراء، من المهم تذكر أن التعامل مع الأنسجة الرخوة المحيطة بالرغامى ليس ضرورياً ولا يُنصح به، حيث يمكن أن يؤدي ذلك إلى الإضرار بصحة الحيوان وسلامة التجربة على حد سواء.

an-improved-method-for-rapid-intubation-of-the-trachea-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

القياسات المتكررة لفسيولوجيا الجهاز التنفسي القوارض وأخذ العينات من الخلايا الهوائية الملتهبة مرغوب فيها ، ولكن عموما ليست مجدية. نحن هنا تصف طريقة لتكرار intubating شفويا الفئران التي تسمح القياسات المتكررة لhyperreactivity الهوائية وأخذ العينات من الخلايا الهوائية الملتهبة.

A عكسية ، غير الغازية طريقة لقياس مقاومة مجرى الهواء وأخذ عينات السوائل غسل القصبات في الفئران

وقد وضعنا طريقة بسيطة وموثوق بها، وغير مكلفة نسبيا لالتنبيب الرغامي في الفئران عن طريق تنظير الحنجرة المباشر باستخدام منظار الأذن مع 2.0 مم المنظار. هذا الأسلوب هو ارضحي، ويمكن استخدامها لقياس المتكررة في التجارب المزمنة. نجد أنها متفوقة على القصبة الهوائية أو سبق وذكرت التقنيات غير الجراحية.

التنبيب الرغامي في الفئران<em&gt; عبر</em&gt; تنظير الحنجرة المباشر باستخدام منظار الأذن

وتصف هذه الورقة طريقة striaghforward وكفاءة تنبيب الفئران لقياس وظائف الرئة أو تقطير الرئوي، التي تسمح للفئران لاسترداد ويكون درس في أوقات لاحقة. الإجراء ينطوي على مصدر الضوء غير مكلفة الالياف البصرية الذي ينير مباشرة القصبة الهوائية.

طريقة بسيطة لتركيب الانبوبة الرئة ماوس

استخدام نموذج الذي يحاكي حالة من أمراض الرئة في البشر أمر بالغ الأهمية لدراسة الفيزيولوجيا المرضية و / أو مسببات مرض معين لتطوير والتدخل العلاجي. هنا يتم تقديم طريقة التنبيب داخل الرغامى موسع التي يمكن ان تنقل مباشرة إلى مواد خارجية الماوس الرئتين.

موسع داخل الرغامى التنبيب لدراسة علم الأمراض وعلم وظائف الأعضاء من الرئة ماوس

نقدم هنا، بروتوكول انقباض "عرضية الابهري" (تاك) عن طريق ثوراكوتومي أفقي. هذا الأسلوب إجراء العمليات جراحية صدر كسبها، مغلقة تهدف إلى محاكاة الضغط الزائد وفشل القلب في الفئران التي تستخدم إعدادات المختبر تاك القياسية.

نموذج الصدر مغلقة للحث على انقباض الابهري عرضية في الفئران

الهدف من هذه المقالة هو وصف طريقة مكررة من تنبيب فأرالمختبر. هذه الطريقة غير الغازية ، وبالتالي ، مثالية للدراسات التي تتطلب الرصد التسلسلي لوظيفة الجهاز التنفسي و / أو غرس العلاجات في الرئة.

التنبيب المتكرر للأوتراكشفاء في الفئران

نقدم بروتوكولا لكشف جذع دماغ الفأر البالغ من الجانب البطني. باستخدام عدسة مؤشر الانحدار الانكسار مع المجهر مصغرة، يمكن استخدام التصوير الكالسيوم لفحص نشاط سوماتا الزيتون العصبية أدنى في الجسم الحي.

في الجسم الحي تصوير الكالسيوم في الزيتون السفلي الماوس

نموذج جراحي للفأر لإنشاء إصابة نقص تروية الرئة اليسرى (IR) مع الحفاظ على التهوية وتجنب نقص الأكسجة.

نموذج فأر للتنبيب الرغامي وجراحة نقص تروية الرئة المهواة

هنا ، نقترح بروتوكولا لتوصيل عديد السكاريد الدهني داخل القصبة الهوائية (LPS) عن طريق التنبيب الرغامي الفموي البلعومي غير الباضع. تقلل هذه الطريقة من صدمة الإجراء الجراحي للحيوان وتوصل بدقة LPS إلى القصبة الهوائية ثم إلى الرئتين.

تقطير عديد السكاريد الدهني داخل القصبة الهوائية غير الباضع في الفئران

نقدم هنا إجراء موحدا للتنبيب الرغامي عن طريق بضع القصبة الهوائية متبوعا ببضع الصدر في الفئران ، يهدف إلى تعزيز دقة وقابلية تكرار التطبيقات غير القابلة للبقاء على قيد الحياة التي تتطلب تهوية جراحية وتعرض الأعضاء الصدرية في نماذج الفئران في الجسم الحي .

التنبيب الرغامي عن طريق بضع القصبة الهوائية وبضع الصدر اللاحق في الفئران لتطبيقات عدم البقاء على قيد الحياة

يعرض هذا البروتوكول كيف يتيح وضع الفأر على النحو الأمثل وإدخال منظار الأذن القائم على الكاميرا عبر الفم تصور المزمار ، والتنبيب السريع مع الحد الأدنى من صدمة الأنسجة ، وتوصيل السوائل بشكل ثابت إلى الرئتين.

منهجية محسنة لتوصيل السوائل إلى رئة الفأر: التنبيب باستخدام منظار الأذن للمستهلك

تعلم طريقة سريعة لتنبيب القصبة الهوائية في الفئران لإعطاء الأدوية مباشرة في الرئتين. هذه التقنية سهلة التعلم ولا تحتاج معدات متخصصة وتقلل من تلف الأنسجة المحيطة.

افضل طريقة لرابيد تنبيب القصبة الهوائية في الفئران

استكشف المزيد من الفيديوهات