مايو 2, 2016
توضح هذه المخطوطة بروتوكول مفصلة لجمع البيانات حجم الضغط من الماوس.
الهدف العام من قياس حلقات حجم الضغط في الماوس هو الحصول على تقييم مفصل لوظيفة القلب. هذه الطريقة مفيدة للتوصيف الفسيولوجي للفئران التي تحتوي على تلاعبات جينية محددة ، والتي بدورها يمكن أن تنتج نظرة ثاقبة حول دور بروتينات معينة في وظيفة القلب. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها توفر تقييما مفصلا لوظيفة الانقباض غير المتوفرة من خلال منهجيات أخرى.
بمجرد تحضير الفأر للجراحة ، ابدأ بعمل شق في الشق القصي يمتد من حوالي خمسة ملليمترات على يمين خط الوسط إلى حوالي خمسة ملليمترات يسار خط الوسط. قم بعمل شق ثان يمتد على طول الحافة اليمنى للظهر الأول إلى حوالي ملليمترين مدللين حتى نهاية الفك السفلي. ثم قم بعمل شق ثالث يمتد من الطرف المنقاري للشق الثاني إلى حوالي خمسة ملليمترات على يمين خط الوسط.
وسحب سديلة الجلد الناتجة إلى اليمين لكشف الأنسجة المسطرة. بعد ذلك ، تحت مجهر تشريح ، قم بتشريح الغدد اللعاب النكفية والغدد اللعابية تحت الفك السفلي عند خط الوسط لفضح العضلات التي تصطف على القصبة الهوائية. ثم افصل بصراحة عضلات القص القصية اليمنى واليسرى.
عندما تكون القصبة الهوائية مرئية ، مرر قطعة من خياطة الحرير ثلاثية الصفر بطول عشرة سنتيمترات تحت أنسجة الحلق ، مع الحرص على عدم تضمين المريء. باستخدام إبرة قياس 20 ، قم بعمل شق واسع في الفجوة فقط دلل الحنجرة قبل حلقة القصبة الهوائية الأولى. ثم قم بإزالة قناع التخدير على الفور من ، وأدخل الأنبوب الرغامي بعناية في القصبة الهوائية.
بمجرد تأمين الأنبوب ، قم بتمديد الحافة اليسرى لشق الجلد الأصلي وصولا إلى عملية الخنجري وعبر خط الوسط إلى حوالي نقطة واحدة على بعد خمسة سنتيمترات على يمين خط الوسط. بعد ذلك ، استخدم تشريحا حادا لسحب سديلة الجلد بشكل جانبي لتعريض العضلات السفلية. واستخدم ملقط توسيع الأوعية الدموية لعزل إدخال الصدرية الكبرى على الجانب الأيمن بالقرب من جانب القص الجانبي.
كي وقطع العضلات. ثم قطع الصدرية الكبرى على طول ارتباطها بالقص. وتقويض الظهرية العريضة على نفس الجانب.
اسحب الطرف المقطوع في الجمجمة للكشف عن الضلوع. واستخدم زوجا من الملقط الحاد لتشريح طبقات العضلات الوربية بعناية لدخول الصدر. بمجرد فتح مساحة الجمع ، أدخل موسعات الأوعية ذات الطرف الحاد بعناية وارفع جدار الصدر بقوة تصاعدية لطيفة.
الآن ، قم بقص جانبي على طول العضلات الوربية مع الحرص على عدم قطع فص الرئة وتمديد الشق وسطيا ، مع الحفاظ على ثلاثة إلى أربعة ملليمترات جانبية من خط الوسط لتجنب تشغيل الشريان الثديي الداخلي بالتوازي مع القص. ثم ضع قضيبا صغيرا مبللا بالقطن المنقوع بالمحلول الملحي من خلال الشق باتجاه خط الوسط ووفر قوة جر لطيفة لأعلى لسحب جدار الصدر بعيدا عن الهياكل السفلية. استخدم الكي بعناية لقطع جدار الصدر بدءا من الحافة الإنسية للشق وينتهي بحوالي سنتيمتر واحد من خط الوسط على الجانب الأيسر.
بمجرد كي الأنسجة تماما ، استخدم المقص لقطع عظم القص بعناية. يجب أن تكون قمة القلب مرئية بوضوح. ثم ، باستخدام تشريح حاد ، قم بتعطيل التامور وتحديد الوريد الأجوف الذيلي.
لوضع قسطرة الوريد الوداجي ، قم بتوجيه قسطرة إبرة قياس 30 متصلة بحقنة تحتوي على عشرة بالمائة من الألبومين بحيث تقع الإبرة على الوريد الوداجي من تلقاء نفسها ، بحيث يكون الجانب المائل لأعلى. لتصور الوريد الوداجي ، أمسك الإبرة بالملقط في يد وسحب الغدة اللعابية بملقط الأنسجة في اليد الأخرى. ضع قوة جر لطيفة على الأنسجة المحيطة بالوريد الوداجي بالديزل لخلق توتر على جدار الوعاء.
بعد ذلك ، باستخدام زاوية الاقتراب الضحلة ، أدخل الإبرة بعناية في الوريد وتقدم الطرف من ثلاثة إلى أربعة ملليمترات في الوعاء. عندما تكون القسطرة في موضعها ، قم بتثبيت الإبرة على تسطير الغدد اللعابية باستخدام الغراء الجراحي وابدأ في غرس محلول الألبومين. لوضع قسطرة حجم الضغط، أولا، حرك حقنة تحتوي على محلول ملحي متوازن وقسطرة حجم الضغط بجوار الفأر مع طرف القسطرة بنفس ارتفاع القلب تقريبا وصفر قراءة الضغط.
بعد ذلك ، باستخدام قضيب صغير مبلل بالقطن المنقوع بالمحلول الملحي ، قم بمناورة القلب لتصور القمة واستخدم إبرة قياس 25 لعمل شق طعنة بالقرب من مركز القمة قدر الإمكان. بعد إزالة الإبرة ، أدخل القسطرة بسرعة ولكن برفق من خلال الشق. يمكن بعد ذلك قياس حلقات حجم الضغط البطيني.
بعد وضع القسطرة ، قم بخفض التخدير لإلقاء الضوء على تأثيرات الاكتئاب القلبي التي قد يكون لها التخدير. إذا كان هناك فقدان مفرط للدم أثناء العملية ، يمكنك ببساطة زيادة حجم الألبومين المنقوع. وفقا للاتفاقية ، يتم رسم الحجم على المحور X والضغط على المحور y.
يجب أن تشبه حلقات حجم الضغط الناتجة عن رسم الضغط ضد الحجم مستطيلا مع حواف رأسية تمثل التغيرات متساوية الحجم في الضغط. يمثل الجانب الأفقي السفلي الحشو البطيني من خلال الصمام التاجي والجانب الأفقي العلوي الذي يمثل إفراغ البطين من خلال الصمام الأبهري. في الفأر البري السليم ، من المتوقع أن يتراوح ضغط البطين الأيسر من 90 إلى 110 ملم من الزئبق بمعدل أقصى لمشتق أقصى للضغط يتراوح من 8000 إلى 12000 مليمتر من الزئبق في الثانية.
علاوة على ذلك ، فإن واحدة من أكثر القطع الأثرية شيوعا للقياس التي يمكن أن تعقد تحليل بيانات حجم الضغط هي انحباس القسطرة الذي يتضح على أنه ارتفاع في الضغط في نهاية الانقباض ناتج على الأرجح عن الضغط المباشر لمحول الضغط بواسطة عضلة حليمية أو بنية ديناميكية أخرى داخل البطين. أثناء تنفيذ هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر مراقبة الماوس باستمرار لضمان عمق مخدر كاف. بمجرد إتقانها ، يمكن إكمال هذه التقنية في غضون ساعة تقريبا اعتمادا على البروتوكول المستخدم بعد وضع القسطرة.
بعد الانتهاء من هذا الإجراء ، يمكن استخدام حقن المركبات التجريبية لتقييم تأثيراتها على وظائف القلب. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية وضع قسطرة حجم الضغط جراحيا في البطين الأيسر للفأر والحصول على حلقات حجم ضغط عالية الجودة لتحليل القلب.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تصف هذه المخطوطة بروتوكولاً مفصلاً لجمع بيانات الضغط والحجم من الفأر، بهدف تقييم الوظيفة القلبية. وتعد هذه الطريقة مفيدة بشكل خاص لفهم الخصائص الفسيولوجية للفئران المعدلة وراثياً.
يوفر تحليل حلقة الضغط والحجم في الفئران تقييماً عالي الدقة لوظيفة الانقباض القلبي، مما يتيح تقليل المخاطر الميكانيكية للأهداف العلاجية في عملية اكتشاف أدوية القلب والأوعية الدموية. وتدعم هذه الطريقة التحقق من صحة الأهداف من خلال ربط التلاعبات الجينية بأنماط ظاهرية ديناميكية دموية قابلة للقياس الكمي، مما يعزز الثقة التنبؤية في النماذج قبل السريرية. كما تعالج هذه الطريقة فجوة حرجة في مرحلة الاكتشاف المبكر من خلال تقديم بيانات وظيفية لا يمكن الوصول إليها عبر تخطيط صدى القلب أو المقايسات النهائية وحدها.
تندرج هذه الطريقة ضمن سلسلة عمليات الاكتشاف، بدءاً من التحقق من الهدف ووصولاً إلى تحديد المركبات الواعدة واختبار الفعالية قبل السريرية، مما يوفر توصيفاً ظاهرياً وظيفياً للقلب في كل مرحلة.