الفئران البروستاتا الجزئي تشريح والإخصاء الجراحي

الهدف العام من هذه الإجراءات هو السماح بدراسة البروستاتا ، وكذلك الظروف الهرمونية المختلفة داخل الفأر. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال سرطان البروستاتا ، مثل ، ما هي الآثار على الحرمان من الهرمونات على تسرطن البروستاتا. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن دراسة آثار العمليات المرضية المختلفة والتغيرات الهرمونية في غدد البروستاتا الفردية.

ابدأ بتثبيت الماوس على لوحة تشريح في وضع الاستلقاء من خلال وسادة القدم لكل مخلب ورش البطن بنسبة 70٪ من الإيثانول. بعد ذلك ، أمسك جلد أسفل البطن بالملقط ، استخدم المقص لقطع الجلد والصفاق حوالي سنتيمتر واحد أمام فتحة القضيب. استمر في قطع الجلد والصفاق من أسفل البطن إلى جانبي البطن إلى القفص الصدري ، مما يؤدي إلى تعريض التجويف البريتوني.

بعد تحديد موقع المثانة والجهاز البولي التناسلي ، أو UGT ، حرك الدهون والأعضاء الأخرى برفق إلى الجانب لكشف الأنسجة البولية. ثم ، باستخدام الملقط ، أمسك الأسهر في قاعدته بالقرب من مجرى البول ، وقم بتمزيق الوعاء. بعد إزالة القناة الأخرى ، استخدم الملقط لتثبيت المثانة وسحبها بعناية ، مع استخدام المقص في نفس الوقت لقطع مجرى البول أسفل البروستاتا البطنية وحوالي سنتيمتر واحد تحت قاعدة المثانة.

انقل UGT المحصود إلى طبق بتري من 60 إلى 100 ملم يحتوي على ما يقرب من خمسة إلى 10 ملليلتر من PBS ، وضع الطبق تحت مجهر التشريح. بعد ذلك ، التقط زوجا واحدا من الملقط الدقيق في كل يد ، ممسكا بالأدوات مثل أقلام الرصاص ، وضع الساعدين على سطح المقعد ، على جانبي المجهر ، لإبقائهما ثابتين. ضع UGT بالملقط ، بحيث تكون المثانة متجهة لأعلى ، ومجرى البول موجه لأسفل ، ويتم وضع الحويصلات المنوية على جانبي المثانة.

أمسك مجرى البول بملقط واحد ، واستخدم الملقط الآخر لسحب الدهون بعناية دون إزالة أي أنسجة البروستاتا. عند إزالة كل الدهون ، قم بتمزيق النسيج الضام بين الفصين البطنيين للبروستاتا لفصلهما. بعد ذلك ، أمسك أحد الفصوص البطنية بالقرب من الحافة بزوج واحد من الملقط ، أمسك قاعدة الفص بالقرب من مجرى البول قدر الإمكان.

الآن ، حرك الزوج الآخر من الملقط لكبح جماح مجرى البول أثناء سحب الفص بعيدا عن الوعاء بحركة ثابتة وسلسة. تأكد من عدم وجود نسيج بروستاتا ملتصق بمجرى البول. بعد ذلك ، ضع الفص في الوسط المناسب ، وفقا للخطوة التجريبية التالية.

بعد عزل الفص البطني الآخر بنفس الطريقة ، استخدم الملقط لسحب أحد الفصوص الأمامية برفق بعيدا عن الحويصلة المنوية ، مع الحرص على عدم ثقب الحويصلة المنوية. بعد ذلك ، بمجرد أن يصبح الفص مستقلا عن الحويصلة المنوية ، قم بإزالته بنفس الطريقة التي تم توضيحها للتو للفص البطني. بعد عزل الفص الأمامي الثاني ، اقلب UGT المتبقي ، بحيث تكون البروستاتا الظهرية مرئية ، واستخدم الملقط لتمزيق النسيج الضام بين الفصين الجانبيين الظهريين وبين الفصوص والمنطقة الخلفية من الحويصلات المنوية.

ثم قم بإزالة الفصوص الجانبية الظهرية الفردية ، كما هو موضح للتو. لإجراء الإخصاء ، ابدأ بوضع فأر مخدر على سطح نظيف ومعقم في وضع الاستلقاء وتأكد من المستوى المناسب من التخدير عن طريق قرصة إصبع القدم. إذا لم يتفاعل الفأر ، فاستخدم ماكينة حلاقة كهربائية لحلق منطقة الجراحة وتعقيم البطن.

بعد ذلك ، استخدم مقصا جراحيا معقما لعمل شق رأسي بطول سنتيمتر واحد عبر خط الوسط لأسفل البطن ، على بعد نقطة واحدة تقريبا خمسة سنتيمترات أمام القضيب ، متبوعا بشق أصغر عبر الصفاق ، مع الحرص على عدم قطع أي أعضاء. باستخدام ملقط معقم ، ارفع الحافة المقطوعة للبريتوني برفق لتصور التجويف البريتوني واستخدم ملقطا معقما آخر لسحب إحدى وسادات دهن الخصية حتى تظهر الخصيتين. بعد ذلك ، استخدم قلم كي لقطع الوسادة الدهنية ببطء ، مع إمساك الخصيتين حتى يتم قطع شريان الخصية.

إذا تم قطع الشريان بسرعة كبيرة ، فقد ينزف الوعاء أكثر من اللازم ، مما يتطلب القتل الرحيم للفأر. أوصي بتسخين قلم الكي على دفعات ، وعدم تركه يسخن كثيرا ، ثم تحريك الأداة ببطء عبر الشريان حتى لا ينزف. بمجرد قطع الوسادة الدهنية والشريان ، تخلص من الخصيتين ووسادة الدهون وكرر الإخصاء للخصيتين الأخريين.

بعد إزالة الخصيتين الثانيتين ، أغلق الصفاق بخيوط حريرية معقمة ، وقم بتدبيس الجلد بمشابك الجرح الجراحية. بعد ذلك ، قم بإعطاء التسكين للتحكم في الألم ووضع الفأر في قفص نظيف ، على قفص أكثر تدفئة ، لمدة 5 إلى 10 دقائق مع المراقبة ، حتى يتعافى تماما. يتكون الجهاز البولي التناسلي الكامل من جميع فصوص البروستاتا الستة والمثانة والحويصلات المنوية والإحليل.

يعلق الأسهر على مجرى البول ، ولكنه غير ضروري لتشريح البروستاتا المعدني وبالتالي يمكن فصله قبل إزالة UGT. سيبقى الجهاز البولي التناسلي سليما بمجرد إزالته من البطن. مغطاة بالأنسجة الدهنية التي يجب إزالتها للوصول إلى فصوص البروستاتا. في هذه التجربة التمثيلية ، تبع الإخصاء دورتان من التجديد الهرموني ، وتمت مراقبة مستويات هرمون التستوستيرون في المصل بواسطة ELISA.

كما هو متوقع ، في ظل ظروف الإخصاء ، اختفت مستويات هرمون التستوستيرون تقريبا. في وجود تاموكسيفين ، وهو معدل مستقبلات هرمون الاستروجين الانتقائي ، لم يلاحظ أي فرق كبير في الحالة الطبيعية الهرمونية. بعد الإخصاء ، تسببت إعادة إدخال هرمون التستوستيرون في ارتفاع كبير في مستويات هرمون التستوستيرون في الدم.

بعد التشريح الدقيق ، تتضاءل فصوص البروستاتا للفئران المخصية بشكل كبير ، بينما تتعافى الفصوص من المعالجة بالتستوستيرون إلى حجمها الأصلي. علاوة على ذلك ، فإن تلطيخ الهيماتوكسيلين واليوزين لأنسجة البروستاتا الأمامية في ظل الظروف الطبيعية والمخصية والمتجددة ، يكشف عن انخفاض كبير في نمو الأنسجة القوي في أقسام المخصية. بمجرد إتقانها ، يمكن إكمال هذه التقنية في خمس دقائق لكل فأرة ، إذا تم تنفيذها بشكل صحيح.

أثناء محاولة الإخصاء ، من المهم أن تتذكر إبقاء كل شيء معقما والتأكد من التحكم في الألم الذي يشعر به الفأر. بعد الإخصاء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل إعادة إدخال الأندروجين للإجابة على أسئلة إضافية حول تأثيرات هرمون التستوستيرون على أورام البروستاتا. بعد تطويرها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال سرطان البروستاتا لاستكشاف التسرطن والتطور ومقاومة الإخصاء في الفئران.