Name: على المدى الطويل قياس ضغط الدم في الانتقال بحرية الفئران عن طريق القياس (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-05-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 54 s
Description: تعلم قياس ضغط الدم المستمر في الفئران المتحركة بحرية باستخدام أجهزة التتبع اللاسلكي القابلة للزرع. تتيح هذه الطريقة مراقبة الفسيولوجيا الوعائية بدقة عالية دون قيود أو تخدير.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

تم دعم هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة (NIH / NHLBI) [رقم المنحة. HL114869] والدعم من UTHSC إلى SM.

الأخلاق البيان: جميع الإجراءات الحيوانية المذكورة في هذا الفيديو المقالات التي تم مراجعتها والموافقة عليها من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان (IACUC) في جامعة مركز العلوم الصحية ولاية تينيسي. ملاحظة: استخدام أدوات معقمة المجهرية طوال العملية الجراحية. يمكن تعقيم الأدوات الجراحية باستخدام معقم الأشعة تحت الحمراء في درجة حرارة تعقيم المثلى من 1500 درجة فهرنهايت (815.6 درجة مئوية). Telemeters يمكن إعادة استخدامها، ولكن، قبل إدراجه في الحيوان للتأكد من تعقيم الارسال بأكمله وفقا لتعليمات الشركة الصانعة والتي تم تعبئتها من طرف القسطرة مع هلام خاص المقدمة من قبل الشركة المصنعة. 1. حيوانات التجارب <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحصول على موافقة IACUC لجميع التجارب التي سوف يتم تنفيذها. بالتشاور مع IACUC المؤسسي ينصح بشدة بشأن متطلبات لاستخدام مسكن بعد العملية بعد هذا الإجراء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحفاظ على الحيوانات في جالغرف التي تسيطر عليها limate وجود درجة حرارة الغرفة من 21 درجة مئوية والرطوبة النسبية 60٪، وعلى بعد 12 ساعة ضوء الظلام دورة مع حرية الوصول إلى الغذاء والماء. ملاحظة: نظرا لأن جسم الفأر أن تستوعب التحقيق القياس عن بعد (بشكل تقريبي 1 سم قطر × 2 سم طويلة)، فمن الأفضل استخدام الفئران التي تزن 20 غراما أو أكثر. </li></ol> 2. التخدير وتحضير المنطوق <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وزن الماوس باستخدام مقياس الدقة وتسجيل وزنه. تأكد من التعامل مع الحيوان برفق وهدوء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الحيوانات في غرفة تحريض وإغلاقه. تعيين معدل تدفق الأوكسجين عند 0.5 لتر / دقيقة ووضع تركيز الأيزوفلورين في 4-5٪. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عندما يفقد وعيه الماوس، وضعه على لوحة ظاهرة الاحتباس هيئة الحفاظ على 36-37 درجة مئوية. الحفاظ على التخدير عن طريق الرؤوس مع مجموعة الأيزوفلورين في 2٪ (الحفاظ على معدل التدفق عند 0.5 لتر / دقيقة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد مناطق العملية عن طريق إزالة الشعر من الجزء الخلفي من الرقبة وركان الجانب البطني من الرقبة عن طريق تطبيق كريم إزالة الشعر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> علاج موقع شق مع 3 تطبيقات فرك الجراحية (حل betadine) بالتناوب مع 70٪ ايزوبروبيل. </li></ol> 3. جراحة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الماوس في موقف ضعيف. تحقق من ردود الفعل من قبل معسر القدم، وضبط التخدير حتى لا يكون هناك أي رد. تقديم حوالي 1 سم شق خط الوسط تحت رقبة الفأر مع مشرط. في الجانب الأيسر من قطع خلق مساحة تحت الجلد عن طريق فصل بعناية البشرة من النسيج الضام الكامنة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الوجه الماوس، واستخدام مشرط لجعل شق الجلد من حوالي 1.5 سم في الجانب الظهري خلفها لوح الكتف. إنشاء جيب تحت الجلد على طول الجناح الحيوان كبيرة بما يكفي لاستيعاب الجهاز. إدراج الارسال في الجيب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج المشبك مرقئ صغير في شق الظهر والمناورة هو تحت الجلد نحو الجزء الأماميافتتاح الرقبة. باستخدام المشبك إدراجها-مرقئ، فهم بلطف أنبوب البولي ايثيلين غير سامة (4 سم طول × 1 مم ID). <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> سحب مرقئ مرة أخرى من خلال نفق من شق الجانبي في الخلف حتى يبرز أنابيب من كل من البطن وظهري شق، والإفراج عن أنبوب من مرقئ. من الخلف، إدراج استشعار قسطرة في أنبوب إلى نفق غيض من القسطرة الاستشعار عن الضغط من خلال الرقبة. من الأمامي الرقبة، وسحب وإزالة أنبوب البولي اثيلين وإغلاق شق ظهري باستخدام مقاطع معدنية. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعناية فصل الغدد الفك السفلي باستخدام أدوات تطبيقها طرف القطن المعقم وسحب الغدة الفك السفلي الأيسر باستخدام ربط البقاء مرنة. باستخدام ملقط المنحنية غرامة الرؤوس، حدد موقع الشريان السباتي على طول الجانب الأيسر من القصبة الهوائية. الحفاظ على موقع الجراحية المعقمة عن طريق وضع وتأمين ثنى العقيمة. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعناية عزل السفينة من الأنسجة المحيطة بها وبلطف فصلالعصب المبهم (بيضاء اللون) التي هي على طول الشريان السباتي بعيدا عن الشرايين. يجب الحرص على عدم قطع أو تلف العصب أو الشريان. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تمرير ثلاث قطع من غير قابل للامتصاص 7-0 خياطة تحت قسم الشريان السباتي معزولة. ربطة عنق خياطة الجمجمة لإغلاق تدفق الدم. سحب الخيط الذي هو أقرب إلى القص لانسداد مؤقت في تدفق الدم من الشريان الأورطي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جعل عقدة فضفاضة باستخدام خياطة الوسطى. وسوف تستخدم هذه لتأمين القسطرة في وعاء. قطع شق صغير في الشريان بين الجمجمة والغرز القصية باستخدام مقص الصغرى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انتزاع القسطرة مع ملقط إقناء؛ إدخال القنية السفينة الخاصة، والحرص على عدم الضغط على القسطرة لمنع فقدان جل من لجنة التحقيق. بلطف، والاستيلاء على الشريان مع طرف على ما يرام منحني الملقط الملقط، استرداد القسطرة، وأدخله في السفينة من خلال شق صغير. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تشديد عقدة خياطة الوسطى حول الشريان ودفع بلطف القطheter. إطلاق سراح بلطف خياطة الجروح التي هي الأقرب إلى القص ومواصلة التقدم القسطرة نحو الشريان الأورطي عرضية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> لاحظ علامة على القسطرة التي تعطي مؤشر تقريبي لمدى حاجة القسطرة لإدراجها. مرة واحدة يتم الوصول إلى نقطة، وتشديد بلطف كلا من الدنيا وخياطة العليا حول القسطرة. يتم تأمين القسطرة إلى الشريان السباتي عن طريق عقدة الخيط. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق شق الجلد مع غير قابل للامتصاص 5-0 خياطة. مرة واحدة مغلقة، وختم الجرح بمادة لاصقة الأنسجة. </li></ol> 4. الجراحية الإنعاش وBP القياسات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة الحيوانات عن كثب لعودة المواقف العادية والسلوكيات. خلال 24 ساعة بعد الجراحة تسكين فترة إدارة وفقا لتوجيهات من قبل طبيب بيطري الموظفين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وبمجرد أن الحيوانات قد تعافى (5-7 أيام بعد الجراحة)، إيوائهم بشكل فردي في قفص الفأر العادي وضعها على الجزء العلوي من لوحة القياس الاستقبال. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحويل آر مزروعansmitters &quot;على&quot; و &quot;إيقاف&quot; باستخدام جهاز مغناطيسي وضع لفترة وجيزة على مقربة من الحيوانات من خارج القفص. </li></ol>

<ol><li>Danaei, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+preventable+causes+of+death+in+the+United+States%3A+comparative+risk+assessment+of+dietary%2C+lifestyle%2C+and+metabolic+risk+factors%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Med%22%5BJournal%5D)">The preventable causes of death in the United States: comparative risk assessment of dietary, lifestyle, and metabolic risk factors.</a> PLoS Med. 6 (4), e1000058(2009).</li>
<li>Dornas, W. C., Silva, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+the+study+of+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biosci%22%5BJournal%5D)">Animal models for the study of arterial hypertension.</a> J Biosci. 36 (4), 731-737 (2011).</li>
<li>Henze, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+alterations+in+heart+rate+variability%2C+baroreflex+sensitivity%2C+and+anxiety-like+behaviors+during+development+of+heart+failure+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Persistent alterations in heart rate variability, baroreflex sensitivity, and anxiety-like behaviors during development of heart failure in the rat.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 295 (1), H29-H38 (2008).</li>
<li>Hoffmann, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+tempol+prevents+hypertension%2C+proteinuria%2C+and+poor+feto-placental+outcomes+in+BPH%2F5+mouse+model+of+preeclampsia%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Chronic tempol prevents hypertension, proteinuria, and poor feto-placental outcomes in BPH/5 mouse model of preeclampsia.</a> Hypertension. 51 (4), 1058-1065 (2008).</li>
<li>Lerman, L. O., Chade, A. R., Sica, V., Napoli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+hypertension%3A+an+overview%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lab+Clin+Med%22%5BJournal%5D)">Animal models of hypertension: an overview.</a> J Lab Clin Med. 146 (3), 160-173 (2005).</li>
<li>Johns, C., Gavras, I., Handy, D. E., Salomao, A., Gavras, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Models+of+experimental+hypertension+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Models of experimental hypertension in mice.</a> Hypertension. 28 (6), 1064-1069 (1996).</li>
<li>Vatner, S. F., Braunwald, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+control+mechanisms+in+the+conscious+state%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular control mechanisms in the conscious state.</a> N Engl J Med. 293 (19), 970-976 (1975).</li>
<li>Zhao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterial+Pressure+Monitoring+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Mouse+Biol%22%5BJournal%5D)">Arterial Pressure Monitoring in Mice.</a> Curr Protoc Mouse Biol. 1, 105-122 (2011).</li>
<li>Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D'Alecy, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+simultaneous+measurement+of+mouse+systolic+arterial+blood+pressure+by+radiotelemetry+and+tail-cuff+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 286 (6), H2408-H2415 (2004).</li>
<li>Kurtz, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+blood+pressure+measurement+in+humans+and+experimental+animals.+Part+2%3A+Blood+pressure+measurement+in+experimental+animals%3A+a+statement+for+professionals+from+the+subcommittee+of+professional+and+public+education+of+the+American+Heart+Association+council+on+high+blood+pressure+research%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">Recommendations for blood pressure measurement in humans and experimental animals. Part 2: Blood pressure measurement in experimental animals: a statement for professionals from the subcommittee of professional and public education of the American Heart Association council on high blood pressure research.</a> Hypertension. 45 (2), 299-310 (2005).</li>
<li>Kurtz, T. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+blood+pressure+measurement+in+animals%3A+summary+of+an+AHA+scientific+statement+from+the+Council+on+High+Blood+Pressure+Research%2C+Professional+and+Public+Education+Subcommittee%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Recommendations for blood pressure measurement in animals: summary of an AHA scientific statement from the Council on High Blood Pressure Research, Professional and Public Education Subcommittee.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25 (3), 478-479 (2005).</li>
</ol>

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

وقد تحسنت زرع راديو القياس بشكل كبير خلال العقد الماضي. أصغر حجم المسبار يجعل عملية الزرع أقل من صدمة للحيوان، وعمر البطارية لفترات طويلة يساعد على خفض التكاليف، والترددات مقياس البعد مستقلة قضاء الحديث المتبادل بين أجهزة الاستقبال. يعتبر القياس طريقة للدولة من بين الفن لجمع مجموعة متنوعة واسعة من المعلمات الفسيولوجية من التحرك حيوانات بحرية دون القطع الأثرية المرتبطة مع استخدام ضبط النفس، والتفاعل البشري، أو التخدير التي تتطلبها التقنيات الأخرى 8،9. <p class="jove_...

ارتفاع ضغط الدم هو واحد من عوامل الخطر الرئيسية لأمراض القلب والأوعية الدموية، ويمكن القول أنها مشكلة صحية عامة رئيسية في كل من البلدان المتقدمة والنامية 1. وقد وضعت عدة نماذج حيوانية من ارتفاع ضغط الدم تجريبي لتقليد ردود ارتفاع ضغط الدم مثل تلك التي لوحظت في البشر 2. من بين أمور أخرى، يمثل الماوس المتنقلة نموذجا ممتازا لدراسة نشأة وتطور ارتفاع ضغط الدم مما يسمح في التحليل المجراة من مغبة التعرض المزمن إلى ارتفاع ضغط الدم. ضغط الدم قد ساعد (BP) للرصد في الفئران الباحثين لكشف العديد من الآليات التي تشارك في علم وظائف الأعضاء والفيزيولوجيا المرضية لأمراض مثل ارتفاع ضغط الدم وفشل القلب 3 و 4. في الواقع، التلاعب في جينوم الفأر يسمح جيل المعدلة وراثيا أو النماذج التي تستهدف الجينات مناسبة لدراسة ارتفاع ضغط الدم 5، 6. ومع ذلك، وحتى التلاعب لطيفمن الفئران واعية يدفع الإثارة التي يمكن أن تساهم في دس القطع الأثرية خلال الحصول على البيانات، في حين ان استخدام التخدير أو المهدئات تؤثر تأثيرا عميقا ضغط الدم 7. هذه الجوانب مهمة للغاية ويجب أن تؤخذ في الاعتبار عند محاولة مراقبة BP على المدى الطويل. هناك عدة طرق لتسجيل BP في الفئران، وتمت مناقشة المقارنة بين التقنيات الأكثر شيوعا المتاحة حاليا في أي مكان آخر 8 و 9. ومع ذلك، وخلصت التوصيات AHA لقياس BP أن قياس داخل الشرايين لشركة بريتيش بتروليوم ويفضل عموما بسبب قدرتها على قياس مباشرة BP على مدى فترة طويلة من الزمن 10. راديو القياس عن بعد إلى جانب القياس المباشر ضغط الدم هو طريقة للدولة من بين الفن لرصد الوظائف الفسيولوجية في مستيقظا ويتحرك بحرية حيوانات المختبر مع التقليل من التوتر والتحف المصاحب للبيئة 9 و 11.راديو القياس عن بعد يوفر القدرة على جمع ضغط الدم ومعدل ضربات القلب، درجة حرارة الجسم والنشاط حيوان من الحيوانات واعية متعددة تلقائيا. على الرغم من أن هذه المنهجية أصبحت شعبية جدا في العديد من المختبرات، زرع راديو القياس عن بعد في الفئران يمكن أن يكون تحديا تقنيا. هنا نعرض بروتوكول خطوة بخطوة يوضح كيفية زرع محول الضغط في الفئران. والأسلوب الذي ينطوي على الإدراج تحت الجلد لجنة التحقيق في جسم الفأر، توجيه القسطرة في الرقبة وإلى الأمام بالقرب من قوس الأبهر عن طريق الشريان السباتي الأيسر. وأظهرت البيانات التي تم التقاطها عن بعد مباشرة على شاشة الحاسوب. يتم تخزين البيانات أيضا لتحليل &quot;خارج الخط&quot;.

<table><tbody><tr><td>نظام تخدير الصغيرة</td><td>كينت ساينتفيك كورب ، تورينجتون ، كونيتيكت ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td></td><td>نظام تخدير الصغيرة منخفض التدفق</td></tr> يسمح <tr><td>بجهاز تسخين الوسادة ومقياس حدود الفأر</td><td>كينت ساينتيفيك كورب ، تورينجتون ، كونيتيكت ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td></td><td>بمراقبة درجة حرارة الجسم ، والتحكم في الحرارة المنزلية في</td></tr><tr><td>الصغيرة مجهر</td> مجهر <td>كينت سينتفوليك كورب ، تورينجتون ، كونيتيكت ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td>KSCXTS-1121</td><td>جسم مجهر مع عمود حامل ذراع الرافعة وأعلى LED</td></tr><tr><td>Hemostat ملقط</td><td>كينت Scientific Corp ، تورينجتون ، كونيتيكت ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td>INS750451</td><td>تستخدم لتثبيت الأوعية الدموية أو خيوط الغرز</td></tr><tr><td>مشابك معدنية صغيرة ، 7 مم ، الفولاذ المقاوم للصدأ</td><td>كينت Scientific Corp ، تورينجتون ، كونيتيكت ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td>INS750344</td><td>تستخدم لإغلاق الجلد</td></tr><tr><td>محلول البيتادين</td><td>Purdue Products LP ، ستامفورد ، كونيتيكت ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td>NDC-67618-150-01</td><td>محلول موضعي لليود بوفيدون</td></tr><tr><td>10٪ محلول ملحي عادي</td><td>مختبرات Abott</td><td>04930-04-10</td><td>اللازمة لمنع جفاف الأنسجة.</td></tr><tr><td>ناير (غسول مزيل الشعر)</td><td></td><td></td> <td>ضروري لإزالة الفراء من موقع الشق / الجراحة</td></tr><tr><td>خياطة الحرير Braide</td><td>Teleflex Medical OEM ، كوفنتري ، كونيتيكت ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td></td><td>الحجم 5.0 ، 6.0 ، 7.0</td></tr><tr><td>الإيثانول</td><td></td><td>2716</td><td>70٪ إيثانول للتطهير</td></tr><tr><td>مقص الربيع &nbsp ؛</td><td>أداة العلوم الدقيقة</td><td>15000-10</td><td>لمقص التشريح البسيط</td></tr><tr><td>(بزاوية إلى الجانب)</td><td>أداة العلوم الدقيقة</td><td>14063-011</td><td>رقم 3 مقبض</td></tr><tr><td>شفرة</td><td></td> مشرط <td>2976-0</td><td>رقم 10</td></tr><tr><td>ملقط (منحني)</td><td>أداة العلوم الدقيقة</td><td>11150-10</td><td>لحمل الأنسجة</td></tr><tr><td>ملقط (مستقيم)</td><td>أداة العلوم الدقيقة</td><td>11151-10</td><td>لحمل الأنسجة</td></tr><tr><td>حامل إبرة&nbsp;</td><td>أداة العلوم</td><td>الدقيقة 12002-12</td><td>لخياطة</td></tr><tr><td>ملقط الأنف بإبرة دقيقة</td><td>أداة العلوم</td><td></td><td></td></tr><tr><td>الدقيقة Isoflurane</td><td>Henry Schein &nbsp; صحة ، ميلفيل ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td></td><td>عامل تخدير استنشاق عام</td></tr><tr><td>معقم</td><td>معيار علمي ، 116 Corporate Blvd ، South Plainfield ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td>B1000</td><td>تعقيم الأدوات الجراحية &nbsp ؛ في 5-10 ثوان باستخدام وسادات الشاش للتسخين بالأشعة تحت</td></tr><tr><td></td><td>الحمراء Johnson & amp جونسون ، نيو برونزويك ، نيوجيرسي ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td>JJ8513</td><td>لاستخدامها في تنظيف الجروح أو التحضير أو التنظيف أو الضمادات</td></tr><tr><td>لعلوم بيانات جهاز القياس عن بعد</td><td>الدولية ، سانت بول ، مينيسوتا ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td>DSI-PA-C10</td><td>لتسجيل ضغط الدم في نظام استقبال القياس عن بعد للفئران التي تتحرك بحرية</td></tr><tr><td>&nbsp ؛ جنبا إلى جنب مع PC</td><td>Data Sciences International ، سانت بول ، مينيسوتا ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td></td><td></td></tr><tr><td>مختبرات</td><td>Tubing Instech ، بليموث اجتماع ، PA USA</td><td>BTPE-90</td><td></td></tr><tr><td>ملقط قنية للوعاء ، 13 سم ، 0.5 مم OD</td><td>World Precision Instruments</td><td>503374</td><td>ملقط قنية خاص للوعاء</td></tr><tr><td>لاصق الأنسجة</td><td>3M منتجات العناية بالحيوان ، سانت بول ، مينيسوتا ، الولايات المتحدة الأمريكية</td><td>NAC رقم: &nbsp ؛ 11380041</td><td>استخدامها لإغلاق الجروح الطفيفة ، وغالبا ما تلغي الحاجة إلى الغرز و / أو الضمادات</td></tr><tr><td>ميزان الوزن ؛</td><td></td> ميزان <td>المختبر التحليلي</td> <td>الدقيق BB300</td></tr></tbody></table>

على المدى الطويل قياس ضغط الدم في الانتقال بحرية الفئران عن طريق القياس

Long-term Blood Pressure Measurement in Freely Moving Mice Using Telemetry

خلال تطوير عوامل فعال في الأوعية الجديد، مراقبة ضغط الدم الشرياني هو أمر حاسم لتقييم فعالية الأدوية الجديدة المقترحة. في الواقع، والبحوث التي تركز على اكتشاف الأهداف العلاجية الجديدة المحتملة باستخدام الفئران المعدلة وراثيا يتطلب موثوق بها، تقييم طويل الأجل من الضغط الشرياني الجهازي الاختلاف. حاليا، عن معيار الذهب للحصول على القياسات طويلة الأجل لضغط الدم في الفئران المتنقلة يستخدم زرع راديو الإرسال، والتي تتطلب إقناء؛ إدخال القنية الشريان. هذا الأسلوب يلغي الحاجة إلى الربط، تقييد، أو التخدير الحيوانات الذي يعرض التوتر والقطع الأثرية أثناء أخذ العينات البيانات. ومع ذلك، الشرياني مراقبة ضغط الدم في الفئران عن طريق القسطرة يمكن أن يكون تحديا بدلا نظرا لصغر حجم الشرايين. هنا نقدم دليل خطوة بخطوة لتوضيح الممرات الرئيسية حاسمة لزرع تحت الجلد الناجح لراديو الإرسال والشريان السباتي جannulation في الفئران. نحن تشمل أيضا أمثلة من النشاط ضغط الدم على المدى الطويل المأخوذة من الفئران تتحرك بحرية بعد فترة من التعافي بعد الجراحة. وبعد هذا الإجراء يسمح التسجيلات ضغط الدم مباشرة موثوقة من الحيوانات متعددة في وقت واحد.

يمكن الحصول على البيانات عن بعد بواسطة جهاز استقبال. وتصور آثار على شاشة الكمبيوتر لمراقبة الجودة (الشكل 1A). وترد تفاصيل مثل هوية الحيوان، ضغط الدم الانبساطي والانقباضي ضغط الدم أيضا (الشكل 1B). الشرايين BP يمكن تسجيلها بشكل مستمر (24/7)، أو لفترات مبرمجة قصيرة (أي 60 اكتساب ثانية كل ساعة). البيانات التي يمكن تخزينها تلقائيا في القرص الصلب لتحليلها لاحقا. بلغ متوسط ​​تظهر بيانات ميزان المدفوعات من التسجيل...

الهدف من هذا البروتوكول هو تقييم ضغط الدم الجهازي في الفئران التي تتحرك بحرية واعية باستخدام أجهزة القياس الراديوي عن بعد القابلة للزرع.

During the development of new vasoactive agents, arterial blood pressure monitoring is crucial for evaluating the efficacy of the new proposed drugs. ...

الهدف من هذا البروتوكول هو تقييم ضغط الدم الجهازي في الفئران الواعية التي تتحرك بحرية باستخدام أجهزة القياس عن بُعد اللاسلكية القابلة للزرع. يمكن لهذه الطريقة أن تساعد في الإجابة على أسئلة رئيسية في مجال الأمراض الوعائية وتسمح بتقييم العديد من العوامل المشاركة في تنظيم ضغط الدم. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تتيح جمع مجموعة واسعة من المعايير الفسيولوجية من حيوانات تتحرك بحرية دون التداخلات الناتجة عن استخدام أدوات التقييد، أو التفاعل البشري، أو التخدير التي تتطلبها التقنيات الأخرى.يتم إيواء الحيوانات المخصصة لهذه الدراسة عند درجة حرارة 21 درجة Celsius مع رطوبة نسبية تبلغ 60%، وتحت دورة إضاءة وظلام مدتها 12 ساعة، مع إتاحة الوصول الحر إلى الغذاء والماء. يتم وزن فأر مختار، مع التعامل معه بلطف وهدوء. ونظراً لضرورة ملاءمة الجسم لمجس القياس عن بُعد (telemetry probe)، يجب ألا يقل وزن الفأر عن 20 غراماً.لتحفيز التخدير، استخدم غرفة تحريض تحتوي على 4% إلى 5% من الإيزوفلوران بتدفق قدره 0.45 liters per minute. انقل الفأر الفاقد للوعي إلى لوحة تدفئة، ووفّر له 2% من الإيزوفلوران عبر قناع أنفي. ثم تأكد من حالة التخدير عن طريق قرص إصبع القدم.إذا كان الفأر غير متفاعل، فباشر بإزالة الشعر من الجانب البطني لرقبته باستخدام كريم إزالة الشعر. ثم امسح الشعر والكريم الزائد، وقم بفرك الجلد لتنظيفه من خلال ثلاثة تطبيقات متبادلة من betadine و70% isopropyl alcohol. يمكن إعادة استخدام أجهزة القياس عن بُعد (telemeters) في هذه التجربة إذا تم تعقيمها وفقاً لتعليمات الشركة المصنعة، وإعادة ملء أطراف القسطرة الخاصة بها بهلام الشركة المصنعة.الآن، وبينما يكون الفأر في وضعية الاستلقاء الظهري، قم بإجراء شق طولي بطول 1 سنتيمتر في خط المنتصف أسفل رقبة الفأر باستخدام المشرط. في الجانب الأيسر من الشق، قم بإنشاء مساحة تحت الجلد عن طريق فصل الجلد بعناية عن النسيج الضام الكامن تحته. بعد ذلك، اقلب الفأر واستخدم المشرط لإجراء شق بطول 1.5 سنتيمتر في الجانب الظهري الأيسر خلف لوح الكتف.قم بإنشاء جيب تحت الجلد يكون حجمه كافياً لاستيعاب الجهاز. الآن، أدخل جهاز الإرسال في الجيب. ثم أدخل ملقطاً شريانياً صغيراً في الشق الخلفي وقم بتوجيهه تحت الجلد نحو فتحة الرقبة الأمامية.باستخدام الملقط، أمسك برفق أنبوباً بلاستيكياً بطول 4 سم واسحب الملقط الشرياني (hemostat) للخلف عبر النفق وإلى الخارج من خلال الشق الجانبي في الظهر. قم بتحرير الأنبوب من الملقط بمجرد بروزه من الشقين البطني والظهري. الآن، ومن جهة الظهر، أدخل مستشعر القسطرة في الأنبوب لتمرير طرف قسطرة استشعار الضغط عبر الرقبة.بعد ذلك، اسحب وأزل أنبوب البولي إيثيلين من الرقبة من الجهة الأمامية، وأغلق الشق الظهري باستخدام المشابك المعدنية. بعد ذلك، افصل الغدد الفكية بعناية باستخدام مسحات قطنية. ثم قم بإبعاد الغدة الفكية اليسرى باستخدام خطاف تثبيت مرن.الآن، باستخدام ملقط منحني دقيق الطرف، حدد موقع الشريان السباتي على طول الجانب الأيسر من الرغامي وقم بعزل الوعاء الدموي بعناية عن الأنسجة المحيطة. ثم افصل العصب المبهم بلطف عن الشريان السباتي مع الحرص على عدم قطع أو إتلاف العصب أو الشريان. وبمجرد الفصل، مرر ثلاث قطع من خيوط جراحية غير قابلة للامتصاص 7-0 تحت الشريان السباتي المعزول واربط الخيط القحفي لإغلاق تدفق الدم.اسحب الغرزة الأقرب إلى القص لسد تدفق الدم من الأبهر مؤقتاً. الآن قم بعمل عقدة رخوة باستخدام الغرزة الوسطى لتثبيت القسطرة. بعد ذلك، قم بعمل شق صغير في الشريان بين الغرزتين باستخدام مقص جراحي دقيق.باستخدام ملقط كانيولا الأوعية الخاص، قم بتثبيت القسطرة برفق بحيث لا يندفع المسبار للخارج. بعد ذلك، استخدم ملقطاً للإمساك بالشريان برفق. الآن، استخرج القسطرة وأدخلها في الوعاء الدموي من خلال الشق الصغير.تعد خطوة إدخال المسبار في الوعاء الدموي هي الخطوة الأكثر أهمية في هذا البروتوكول. لذا، تأكد من استرخائك والجلوس بشكل مريح عند تنفيذها، لأن التنسيق الجيد لليدين أمر بالغ الأهمية في هذه الخطوة. بعد ذلك، قم بشد عقدة الخياطة الوسطى حول الشريان وادفع القسطرة برفق.بعد ذلك، قم بتحرير الغرزة القريبة من القص برفق واستمر في دفع القسطرة باتجاه الأبهر المستعرض. عند دفع القسطرة إلى الشريان السباتي، من المهم مراقبة الطرف الدقيق للمسبار؛ لأن الدفع لمسافة بعيدة جداً سيؤدي إلى سد الأبهر وموت الفأر.بمجرد إدخال القسطرة وصولاً إلى العلامة الصحيحة، قم بشد كل من الغرزة السفلية والعلوية برفق حول القسطرة لتثبيتها في الشريان السباتي. وأخيراً، أغلق شق الجلد باستخدام غرزة غير قابلة للامتصاص من مقاس 5-0، وقم بسد الشق باستخدام لاصق أنسجة. بعد العملية، راقب الفأر حتى يستعيد وضعياته وسلوكياته الطبيعية.خلال الـ 24 ساعة الأولى، يتم إعطاء المسكنات وفقاً لتوجيهات الطبيب البيطري المسؤول. وبمجرد تعافي الحيوانات، بعد خمسة إلى سبعة أيام من الجراحة، يتم إيواؤها بشكل فردي في أقفاص فئران عادية توضع فوق لوحة مستقبل القياس عن بُعد. ولجمع البيانات، يوضع قفص الفأر فوق لوحة مستقبل القياس عن بُعد ويتم تشغيل جهاز الإرسال باستخدام الجهاز المغناطيسي الخاص بالشركة المصنعة.بعد الإجراء الموصوف، يمكن الحصول على البيانات عن بُعد بواسطة جهاز استقبال. يتم عرض الآثار على شاشة الكمبيوتر لغرض مراقبة الجودة. كما تظهر تفاصيل أخرى مثل معرف الحيوان، وضغط الدم الانبساطي والانقباضي، وتاريخ الحصول على البيانات.يمكن تسجيل ضغط الدم الشرياني بشكل مستمر أو لفترات زمنية قصيرة ومبرمجة. ومن النتائج الواضحة تمامًا من التسجيلات المستمرة لضغط الدم لدى الفئران أنها تتبع إيقاعًا يوميًا. بعد مشاهدة هذا الفيديو، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية زرع مجسات القياس عن بُعد لمراقبة القيم الأساسية.بمجرد إتقان هذه التقنية، يمكن تنفيذها في غضون 30 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.

long-term-blood-pressure-measurement-freely-moving-mice-using

Research

JoVE Journal

Medicine

الطب

8 القناة CODA السامية المناولة ضغط الدم غير الغازية نظام يقيس ضغط الدم في ما يصل إلى 8 الفئران او الجرذان في وقت واحد. هذا النظام يستخدم الذيل الكفة تسجيل حجم الضغط (VPR) لقياس ضغط الدم عن طريق تحديد حجم الدم الذيل.

قياس ضغط الدم في الفئران باستخدام تسجيل حجم الضغط ، وهو أسلوب الذيل الكفة

ويرد تقنية جراحية لزرع مرسلات القياس عن بعد المتاحة تجاريا المستخدمة لقياس المستمر لbiopotential (واحد في قيادة ECG) ، معدل ضربات القلب ، درجة حرارة الجسم الأساسية والنشاط الحركي في الفئران تتحرك بحرية. التوصيات والبروتوكولات اللاحقة للعمليات الجراحية وتخفيف الألم ، وتحسين الانتعاش ، ورفاه وتقدم أيضا معدل البقاء على قيد الحياة.

غرس المرسلات القياسات اللاسلكية استسلام بيانات عن تخطيط القلب ومعدل ضربات القلب الهيئة الأساسية ، درجة الحرارة والنشاط في الفئران المختبرية الحركة الحرة

هذا الفيلم يوضح كيفية الحصول على ديناميكا الدم النظامية والكبد في الفئران. رصد كامل يشمل اكتساب المعلمات الحيوية، النظامية ضغط الدم، الضغط الوريدي المركزي، معدل تدفق الشريان الكبدي المشترك، وضغط الوريد البابي وكذلك معدل تدفق المدخل في الفئران.

رصد معلمات الجهازية والكبد الدورة الدموية في الفئران

معرض تخديره من الفئران غير الفسيولوجية ضغط الدم النظامية، مما يحول دون تقييم حقيقي للهجة اللاإرادي ونظرا للعلاقة الحميمة بين ضغط الدم والجهاز العصبي اللاإرادي. وهكذا يرد طريقة جديدة لنشاط العصب متعاطفة مع الكلي في وقت واحد تسجيل وضغط الدم مع التسريب الوريدي في الفئران واعية.

نهج جديد للتسجيل المتزامن لنشاط العصب متعاطفة مع الكلي وضغط الدم مع التسريب الوريدي في واعية، الفئران غير المقيد.

هنا، نحن وصف إعداد لتسجيل متزامنة كهربية وضغط الدم الشرياني داخل (BP) في الفئران التجريبية، التي يمكن القيام به مع المعدات القياسية في مرافق الحيوانات ويمكن تطبيقها على فسيولوجية أو الدوائي دراسات للتحقيق في الآليات المسببة للأمراض أو العلاجية في طب القلب والأوعية الدموية.

تسجيل كهربية متزامنة والدم الغازية الضغط القياس في الفئران

المنعكس العضلي هو آلية لتنظيم معدل ضربات القلب بواسطة الجهاز العصبي اللاإرادي استجابة لتغيرات ضغط الدم. وصفنا تقنية جراحية لزرع أجهزة إرسال القياس عن بعد للقياس المستمر والمتزامن لمخطط كهربية القلب وضغط الدم في الفئران. هذا يمكن أن يحدد حساسية المنعكس الضغطي العفوي ، وهي علامة نذير مهمة لأمراض القلب والأوعية الدموية.

زرع جهاز إرسال تخطيط القلب عن بعد وضغط الدم لتحديد حساسية منعكس الضغط التلقائي في الفئران الواعية

يصف البروتوكول الحالي قياسا مستمرا طويل الأجل لتدفق الدم الكلوي في الفئران الواعية وتسجيل ضغط الدم في نفس الوقت باستخدام القسطرة المزروعة (المملوءة بالسوائل أو عن طريق القياس عن بعد).

القياس المستمر طويل الأجل لتدفق الدم الكلوي في الفئران الواعية

يوفر هذا البروتوكول إجراء خطوة بخطوة لتنفيذ إعطاء جرعة بلعة متعددة عن طريق الوريد ومراقبة الدورة الدموية الغازية في الفئران. يمكن للباحثين استخدام هذا البروتوكول لفحص المركب العلاجي المستقبلي لارتفاع ضغط الدم في الشريان الرئوي.

جرعات البلعة الوريدية المتعددة وتقييم الدورة الدموية الغازية في نموذج ارتفاع ضغط الدم في الشريان الرئوي الناجم عن نقص الأكسجة في الفئران

هنا ، نصف طريقة بسيطة لزرع جهاز مراقبة الجلوكوز المستمر التجاري المصمم للمرضى على الفئران وتوفير البرامج النصية لتحليل النتائج.

مراقبة بسيطة مستمرة للجلوكوز في الفئران التي تتحرك بحرية

نموذج الفئران لإصابة الرئة الناجمة عن جهاز التنفس الصناعي هو أداة هامة لدراسة إصابة الرئة...

التهوية الضغط الشواهد للحث على إصابة الرئة الحادة في الفئران

تعلم قياس ضغط الدم المستمر في الفئران المتحركة بحرية باستخدام أجهزة التتبع اللاسلكي القابلة للزرع. تتيح هذه الطريقة مراقبة الفسيولوجيا الوعائية بدقة عالية دون قيود أو تخدير.

على المدى الطويل قياس ضغط الدم في الانتقال بحرية الفئران عن طريق القياس

استكشف المزيد من الفيديوهات