الجلدي إزالة التعصيب الجراحي: هناك طريقة لاختبار شرط لالأعصاب في نماذج الماوس من الأمراض الجلدية

الهدف العام من هذا الإجراء هو فحص تأثير الأعصاب على الجلد الطبيعي والمرضي. يمكن استخدام هذه الطريقة للإجابة على الأسئلة الرئيسية في بيولوجيا الجلد الطبيعية ، مثل ما إذا كانت الأعصاب الجلدية تؤثر على التوازن والمرض. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكنك مقارنة عينات الجلد السليمة ومنزوعة التعصيب من نفس.

العرض البصري لهذه التقنية أمرا بالغ الأهمية حيث قد يكون من الصعب التعرف على الأعصاب وإزالتها بأقل قدر من الضرر الذي يلحق بالأنسجة المحيطة. أولا ، قم بتخدير الماوس وتأكد من وصوله إلى المستوى المناسب من التخدير باستخدام قرصة إصبع القدم. تأكد أيضا من أن الفأر يظهر التنفس وضربات القلب الطبيعية.

الآن ضع على وسادة تدفئة في منطقة جراحية معقمة. باستخدام ماكينة قص كهربائية ، قم بإزالة الشعر بعناية من الجانب الظهري حيث سيتم أخذ الخزعة. ثم امسح المنطقة المحلوقة باستخدام مناديل البيتادين والكحول.

تأكد من إزالة جميع قصاصات الشعر من الموقع. الآن حدد موقع الخزعة باستخدام قلم تحديد أسود. للحصول على أقسام طولية من بصيلات الشعر ، يجب أن تعمل الحافة الأطول للخزعة في الاتجاه الأمامي إلى الخلفي إلى خط الوسط الظهري.

باستخدام مشرط ، قم بإجراء استئصال كامل السماكة دون الإضرار باللفافة العضلية الأساسية. عادة ما يكون النزيف ضئيلا. يجب أن تشمل عينة الخزعة البشرة والأدمة والدهون تحت الجلد والبانيكولوس السرطاني.

افرد عينة الجلد المستأصل على منشفة ورقية جافة ، بحيث يكون جانب الأدمة لأسفل. قم بقص المنشفة الورقية الزائدة ، وقم بتخزين العينة على TBS بارد لمدة تصل إلى ساعة إذا كانت هناك حاجة إلى جمع عينات أخرى. بالعودة إلى الفأر ، قم بخياطة موقع الخزعة باستخدام 60 خيوط نايلون على بعد حوالي ثلاثة ملليمترات.

ثم راقب الماوس في قفص التعافي حتى يستعيد وعيه. استخدم المسكنات وفقا لرعاية المؤسسية المعينة ، واتبع إرشاداتها إذا بدا الفأر مضطربا. في غضون سبعة إلى 10 أيام من الجراحة، قم بإزالة الغرز.

تابع معالجة الخزعات للأنسجة أو تلطيخ التثبيت بالكامل. قم بتخدير ، وحلق الجلد الظهري بالكامل ، وتنظيف المنطقة المشابهة لإجراء الخزعة. الآن قم بعمل شق باستخدام مشرط معقم على طول خط الوسط الظهري من قاعدة الرقبة إلى ما يقرب من نصف سنتيمتر فوق الذيل.

باستخدام ملقط حاد معقم ، اسحب الجلد على الجانب الأيسر برفق بعيدا عن الجناح لتصور الأنسجة الأساسية من وسادات الدهون الكتفية بالقرب من الرقبة إلى الجزء الخلفي مباشرة. الآن حدد العصب الجلدي الظهري تحت مجهر ضوئي تشريح. تظهر هذه على شكل خيوط بيضاء تنتقل ذيليا عبر اللفافة الشفافة لجدار الجذع قبل إجراء انحناءات حادة ودخول النسيج الضام الرخو تحت الجلد.

بعد ذلك ، باستخدام ملقط متناهية الصغر ، قم بإزالة العصب حصريا من الجانب الأيسر من الموجود في المواقع التشريحية T3 إلى T12 عن طريق نتفها من حيث تنحني شرائحها عند جدار الجذع إلى مواقع دخولها إلى الجلد. قم بتوجيه الملقط عموديا وامسك الأعصاب على بعد حوالي نصف سنتيمتر أسفل مواقع الانحناء. بمجرد الإمساك بها ، اسحب لأعلى لجعل الأعصاب تتمدد وتنفصل عن الأنسجة المحيطة لإزالتها.

تجنب إتلاف الأوعية الدموية المجاورة. تأكد من الحفاظ على رطوبة الأنسجة طوال العملية عن طريق وضع قطرات من محلول ملحي بنسبة 0.9٪ بشكل دوري. استمر في إزالة جميع الأعصاب الممتدة من جدار الجذع إلى الجلد ، ولكن لا تعطل الأعصاب داخل اللفافة الكثيفة لجدار الجذع.

بعد ذلك ، قم بإزالة أي أعصاب من سديلة الجلد المكشوفة. تتكون هذه الألياف من الفروع البعيدة للعصب الجلدي الظهري وتظهر على شكل خيوط بيضاء متفرعة تقع بشكل متقطع داخل النسيج الضام على الجانب الجلدي من سديلة الجلد. لإزالة هذه الفروع الدقيقة ، ضع الملقط بالتوازي تقريبا مع سطح الجلد ، وامسك العصب ونتف لأعلى.

قم بإزالة جميع الأعصاب المرئية بهذه الطريقة. لا تثقب الأوعية الدموية والجلد. خلال هذه الخطوة ، من المهم تجنب تمزق الأوعية الدموية المجاورة.

إذا وجدت عصبا به وعاء دموي مجاور، فقم باتباعه في النهاية إلى منطقة لا يوجد فيها وعاء مجاور وقم بإزالته عن طريق النتف. الآن ، قم بفك الجلد على الجانب الأيمن من شق خط الوسط الظهري ، لكن لا تزيل أي أعصاب. سيكون هذا بمثابة التحكم في عملية الزائفة المقابلة.

أخيرا ، قم بخياطة ومراقبته بعد الجراحة كما كان من قبل. في وقت لاحق ، للتأكد من الفقدان المستقر للأعصاب ، بعد أسابيع من الجراحة ، قم بوخز المنطقة منزوعة التعصيب برفق باستخدام إبرة معقمة تحت الجلد. لاحظ ما إذا كان يستجيب ، عادة عن طريق الارتعاش أو إدارة رأسه.

إذا تم إزالة التعصيب من منطقة الجلد بثبات ، فلن يظهر استجابة قليلة أو معدومة. حصاد خزعات الجلد من منطقة عدم الاستجابة والجانب الوهمي المقابل للعينات التجريبية والضابطة المتطابقة. من الخزعات ، من المهم أخذ عينات من أقسام نسيجية متعددة لتحديد الاختلافات المحتملة في وفرة قبة اللمس أو مورفولوجيا بين العينات الوهمية والعينات منزوعة العصاب.

تسمح سلالة الفأر glebe one cree ERT2 باستهداف إعادة التركيب الجيني الناجم عن عقار تاموكسيفين لمناطق الجلد التي تعرض نشاطا عاليا في مسار القنفذ مثل ظهارة قبة اللمس. تم عبور هذه الفئران لحث الفئران المراسلة abolaxi على تصور ظهارة قبة اللمس. تعتبر العقد ضرورية للحفاظ على كل من قباب اللمس العادية وكذلك خلايا ميركل المرتبطة بها.

يتضح ذلك تجريبيا من خلال الفقدان التدريجي لمورفولوجيا قبة اللمس الطبيعية بالإضافة إلى فقدان الكيراتين ثماني خلايا مترسبة بعد إزالة التعصيب. تعتبر الأعصاب أيضا ضرورية لتعزيز إشارات القنفذ في قبة اللمس كما يتم مراقبتها بواسطة تعبيرات Glebe one cree ERE2 ، والتلوين الجماعي الجانبي التجريبي المنزلي من كل من الجلد الوهمي والجلد منزوع الأعصاب. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية استئصال الأعصاب الجلدية الظهرية جراحيا من أجل اختبار ما إذا كانت هذه الأعصاب متورطة في وظيفة الجلد الطبيعية أو إذا كانت تعدل المرض.

بمجرد إتقانها ، يمكن تنفيذ هذه التقنية بشكل روتيني وموثوق بأقل قدر من الضغط على. بعد هذا الإجراء ، يمكن استخدام طرق مثل تلطيخ الفلورسنت الأميني لتأكيد ما إذا كانت الأعصاب قد استئصال بالكامل من الجلد ، وما إذا كان التعبير الجيني يتأثر.