تسجيل وقت واحد من تخطيط كهربية الشبكية والإمكانيات البصرية مستدعى في الفئران تخدير

الهدف العام من هذا الإجراء هو قياس المجام الكهربائي والشبكية والإمكانيات البصرية في الفئران في نفس الوقت. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال علم الأعصاب الشق. مثل ما إذا كان تأثير الشيخوخة أو الأمراض يؤثر على مكونات معينة في المسار البصري.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بتقييم شامل لوظيفة الشبكية وتأثيرها الأولي على الوظيفة القشرية المستحثة بصريا. لبدء هذا الإجراء ، قم بتصميم أقطاب ERG غير النشطة المصنوعة خصيصا عن طريق قطع سلك فضي بطول 70 ملم وتشكيل حلقة قطرها ثمانية ملليمترات لتطويق عين الجرذ. قم بإعداد دائرة موحدة واضبط حجم الحلقة عن طريق تشكيلها على طرف رأس أنبوب بطول ملم واحد.

هذا مهم لأن الحلقة الصغيرة جدا قد ترفع الضغط المفصلي عن غير قصد ، حيث يمكن أن تزيد الحلقة كبيرة الحجم من تباين الإشارات. بعد ذلك ، قم بتصميم القطب الكهربائي غير النشط VEP المصنوع خصيصا عن طريق قطع الفضة بطول 70 ملم. وتشكيل قطع ناقص يبلغ قطره ثمانية ملليمترات لتثبيته على قواطع الفئران.

بعد ذلك ، قم بتصميم الأقطاب الكهربائية النشطة ERG المصنوعة خصيصا عن طريق قطع سلك فضي بطول 30 ملم وتشكيل حلقة صغيرة يبلغ قطرها حوالي ملليمتر إلى ملليمترين والتي تستخدم للاتصال برفق بقرنية الفئران مع الحد الأدنى من سحجات القرنية. بعد ذلك ، قم بتوصيل الأقطاب الكهربائية بإحكام بأسلاك القطب الكهربائي عن طريق ربط الفضة بالسلك الداخلي المكشوف. اعزل المعدن المكشوف الزائد بشريط لاصق لتقليل القطع الأثرية الكهروضوئية.

بالنسبة للأقطاب الكهربائية النشطة ERG ، يمكن تطبيق المزيد من طبقات الشريط اللاصق لتحقيق غلاف أكثر سمكا وصلابة بحيث يسهل حمل القطب باستخدام مناور دقيق. على كل قطب كهربائي غير نشط ERG ، قم بلصق قطعة صغيرة من قفل الخطاف والحلقة بشريط التقنيع لتمكين التثبيت الثابت بحزام عنق القوارض. بعد ذلك ، لكل قطب كهربائي نشط VEP ، قم بتوصيل مشبك التمساح بالسلك الداخلي لسلك القطب.

مباشرة قبل التسجيلات ، قم بطلاء الأسطح المكشوفة للأسلاك الفضية بالكلوريد لتحسين توصيل الإشارة. للقيام بذلك ، قم بتوصيل الكاثود بالطرف السالب للبطارية واغمر الطرف الآخر في المحلول الملحي. بعد ذلك ، اغمر الطرف الفضي على سلك الأنود في محلول ملحي عادي وقم بتوصيل الطرف الآخر من سلك القطب هذا ، بالطرف الموجب لبطارية تسعة فولت.

افصلها بعد 20 ثانية ويجب طلاء الطرف الفضي لسلك القطب بالتساوي باللون الأبيض. كرر إجراء المعالجة بالكلور لجميع أقطاب ERG و VEP الفضية. في هذا الإجراء ، قم بتطهير المنطقة المحلوقة للحيوان المخدر باستخدام 10٪ بوفيدون اليود ثلاث مرات.

قم بعمل شق سهمي على طول خط الوسط على الرأس بمشرط واستئصال دائرة قطرها 20 ملم من الأنسجة الجلدية لكشف عظم الجمجمة. بعد ذلك ، قم بإزالة السمحاق الأساسي عن طريق الكشط والتجفيف بالشاش ، لفضح الغرز القحفية الإكليلية والسهمية. احفر فتحتين من خلال الجمجمة على نصفي الكرة الأرضية.

قم بربط مسامير من الفولاذ المقاوم للصدأ في الفتحتين المعدة مسبقا حتى عمق ملليمتر واحد للسماح بالتثبيت الثابت. بعد ذلك ، قم بإعداد المنطقة الجراحية لملغم الأسنان عن طريق تجفيف عظم الجمجمة بالشاش وسحب الجلد بخرزتين. بعد ذلك ، انشر ملغم الأسنان على الجمجمة المكشوفة لتثبيت الأقطاب الكهربائية اللولبية في مكانها والتأكد من تعرض حوالي 1.5 ملم من البراغي للتسجيل.

بعد ذلك ، قم بإزالة خيوط التراجع. بالنسبة للتسجيلات الاسكتلندية ، يتم تنفيذ جميع الإجراءات في غرفة مظلمة. لأغراض التوضيح ، يتم إجراء تحديد موضع القطب الكهربائي تحت إضاءة الغرفة العادية هنا.

كان مظلما قبل 12 ساعة وتم تخديره بالكيتامين والزيلازين. بعد توسيع حدقة العين والتخدير الموضعي ، قم بربط قطب VEP غير النشط حول القواطع السفلية. بعد ذلك ، ضع على منصة ERG أمام وعاء Ganzfeld الموجود في قفص فاراداي.

قم بتأمين على المنصة بشريط من قفل الخطاف والحلقة الموضوعة بإحكام ولكن ليس بإحكام حول مؤخرة العنق. بعد ذلك ، ضع أقطاب ERG غير النشطة عن طريق تطويق الحلقة السلكالية بشكل غير جراحي حول خط الاستواء للعينين. حوالي ثلاثة أمتار خلف الطرف.

قم بتثبيت ذلك عن طريق توصيل القطب الكهربائي بشريط قفل الخطاف والحلقة حول مؤخرة العنق. كرر الإجراء للعين المقابلة. الآن ، اربط أقطاب VEP النشطة عن طريق ربط مشابك التمساح بمسامير الفولاذ المقاوم للصدأ ، المزروعة مسبقا على الجمجمة.

قبل وضع القطب الكهربائي النشط ERG ، ضع قطرة صغيرة من 1٪ كربوكسي ميثيل سلولوز الصوديوم على القطب لتحسين جودة الإشارة. ضع الأقطاب الكهربائية النشطة ERG للمس سطح القرنية المركزي برفق باستخدام مناور دقيق متصل بالذراع التجسيمي المصمم خصيصا. تأكد من أن كربوكسي ميثيل سلولوز الصوديوم يلامس القرنية فقط وليس السلارا ، عن طريق مسح السوائل الزائدة بعيدا.

ثم أدخل ملليمترين إلى خمسة ملليمترات من قطب الإبرة الأرضية المصنوع من الفولاذ المقاوم للصدأ ، تحت الجلد في الذيل. حرك المنصة بالقرب من وعاء Ganzfeld وتأكد من محاذاة عيون مع فتحة الوعاء لتمكين الإضاءة المتساوية لشبكية العين. بعد ذلك ، أغلق قفص فاراداي لتقليل الضوضاء الدخيلة.

باستخدام البروتوكول أعلاه ، يمكن تسجيل كومة من أشكال موجات ERG استجابة لمجموعة من المحفزات مع عرض الوميض الأكثر تعتيما في الأسفل والأكثر سطوعا في الأعلى. عند مستويات الضوء الخافتة جدا ، يمكن تسجيل استجابات عتبة سكوتوبية. مع زيادة سطوع التحفيز ، تهيمن الموجة B على أشكال الموجة ثم تظهر الموجة السالبة A عند ألمع المحفزات.

يمكن فحص وظيفة المستقبلات الضوئية للقضيب باستخدام P3 لنمذجة الموجة A. يوضح هذا الشكل أن سعة P2 تنمو مع زيادة طاقة التحفيز. يمكن فحص وظيفة الخلية ثنائية القطب من خلال نمذجة نظريات استجابة الشدة للقضيب P2 بوظيفة ناكا رشتين.

يتم فحص وظيفة الخلية العقدية الشبكية عند الطاقات المضيئة الخافتة ويتم قياسها كميا من خلال سعة ذروة pSTR وتوقيتها. يتم استنباط وظيفة الخلية المخروطية ثنائية القطب من خلال نموذج فلاش مزدوج ويتم قياسه كميا بواسطة سعة ذروة المخروط P2 وتوقيته. يؤخذ تحليل سعة VEP على أنه ذروة السعة و troph إلى ذروة السعات التي تعطي توقيت هذه الاستجابات.

يتشكل اتساع موجة VEP مع زيادة طاقة التحفيز. عندما يتم إتقانها ، يمكن إجراء هذه التقنية في غضون 30 إلى 45 دقيقة باستثناء وقت تحضير القطب ووضع القطب الكهربائي والتكيف. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم بشكل خاص الانتباه إلى مدى دقة وضع الأقطاب الكهربائية وإتاحة الوقت الكافي للتكيف.

بعد هذا الإجراء ، يمكن إجراء إجراءات أخرى مثل تعديل المرض أو العلاجات للإجابة على أسئلة محددة. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تحضير الأقطاب الكهربائية ووضعها وكذلك كيفية تسجيل وتحليل أشكال موجات ERG و VEP.