غرس والتسجيلات مخطط كهربية اللاسلكية والجهد البصري المحرض في الجرذان واعية

الهدف العام من هذا الإجراء هو قياس إشارات ERG و VEP الواعية بعد الزرع الجراحي لمسبارات القياس عن بعد اللاسلكية. يمكن أن تساعد هذه التقنية في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال علم الأعصاب ، مثل كيفية تصرف الخلايا العصبية دون قيود التخدير العام في ظل كل من الظروف الصحية والحالة المريضة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها تسمح بالتسجيل المتزامن لفسيولوجيا الكهربية لشبكية العين والقشرة البصرية في الواعي.

لبدء هذا الإجراء ، قم بإعداد الأقطاب الكهربائية تحت المجهر. للقيام بذلك ، قم بفك قطب كهربائي مزدوج من الفولاذ المقاوم للصدأ تقطعت بهم السبل مع كماشة ذات رؤوس دقيقة. قم بقص أحد خيوط الفولاذ المقاوم للصدأ على بعد سنتيمتر واحد تقريبا من الحافة ، مع ترك خيط واحد أطول ومستقيم لتشكيل القطب الدائري.

بعد ذلك ، قم بطي الخيط الفردي المصنوع من الفولاذ المقاوم للصدأ مرة أخرى في الذات ولفه لتشكيل حلقة ناعمة عند طرف القطب. بعد ذلك ، قم بتشكيل قطب كهربائي نشط ERG عن طريق لف قاعدة الحلقة لتشكيل دائرة بقطر من النقطة اثنين إلى نقطة خمسة ملليمترات. بالنسبة لقطبين غير نشطين من ERG وواحد VEP غير نشط ، اجعل قطر الحلقة يصل إلى ثمانية ملليمترات.

في هذا المثال، قم بإعداد ERG نشط واحد وثلاثة أقطاب كهربائية غير نشطة. بعد ذلك ، قم بتوصيل القطب النشط الدائري VEP حول برغي من الفولاذ المقاوم للصدأ بحيث يستقر القطب على رأس المسمار. بعد ذلك ، قم بربط الأقطاب الكهربائية الثلاثة غير النشطة حول برغي ثان من الفولاذ المقاوم للصدأ.

سوف يذهب القطب الأرضي مباشرة إلى التجويف البريتوني ولا داعي لعمل حلقة عند الحافة. بعد حلق وتطهير الموقع الجراحي لحيوان مخدر ، قم بعمل شق 10 ملم على الرأس على طول الخط الأوسط بين الأذنين بمشرط جراحي. ثم قم بعمل شق بطول خمسة ملليمترات على البطن من خلال طبقة الجلد ، على طول الخط الأوسط أسفل القص.

بعد ذلك ، قم بحفر قنية بقطر خمسة ملليمترات تحت الجلد ، من شق البطن إلى شق الرأس. قم بتغذية أسلاك القطب الكهربائي للحشيشة من خلال القنية من البطن إلى الرأس. اترك القطب المرجعي مع قاعدة جهاز الإرسال.

ثم قم بتغطية جميع أطراف القطب الكهربائي بشاش معقم. بعد ذلك ، قم بتأمين رأس الفئران في منصة تجسيمية. مد شق الجبهة إلى 30 ملم بمقص جراحي.

ثم قم بتعريض منطقة جراحية عن طريق سحب الجلد بخرزتين. اكشط السمحاق الذي يغطي الجمجمة لكشف خيوط بريجما ولامدا وخط الوسط. بعد ذلك ، قم بحفر فتحتين من خلال الجمجمة في الإحداثيات التجسيمية غير النشطة VEP و ERG و VEP.

قم بتوصيل الأقطاب الكهربائية النشطة وغير النشطة بمسامير من الفولاذ المقاوم للصدأ بالجمجمة بعمق ملليمتر واحد تقريبا. لزرع أقطاب ERG النشطة ، استخدم خياطة لسحب الجفن العلوي للعين مؤقتا. بعد ذلك ، أدخل قنية قياس 16 إلى 21 تحت الجلد من خلف العين من خلال قب الملتحمة العلوي إلى الجبهة.

بعد ذلك ، قم بإزالة إبرة التوجيه. بعد ذلك ، قم بتغذية القطب النشط من خلال قسطرة بلاستيكية من الجبهة باتجاه العين. ثم قم بإزالة القسطرة البلاستيكية.

استخدم خياطة مؤقتة ، يتم تمريرها عبر حلقة القطب لمنع القطب من التراجع مرة أخرى إلى النفق. بعد ذلك ، قم بعمل شق نقطي بخمسة ملليمترات على الملتحمة العلوية ملليمتر واحد خلف الطرف. استخدم تشريحا حادا لكشف الصلبة الكامنة.

بعد ذلك ، قم بزرع خياطة خلف الطرفين مباشرة بنصف سمك الصلبة واحرص على عدم ثقب مقلة العين. بعد ذلك ، قم بإزالة الخيط المؤقت من القطب النشط ERG. قم بتثبيت القطب النشط ERG على خياطة سمك نصف الصلبة عن طريق ربط ثلاث عقدة متتالية وتأكد من أن طرف القطب يقع بالقرب من الطرف للحصول على نسبة إشارة جيدة إلى الضوضاء.

إذا لزم الأمر ، اسحب سلك القطب الزائد للخلف حتى لا يصطدم القطب النشط بالقرنية. بعد ذلك ، أغلق رفرف الملتحمة باستخدام خيوط أو خيوط متقطعة لتغطية قطب ERG بالكامل. بعد ذلك ، قم بإزالة خياطة سحب الجفن.

كرر الإجراء للعين المقابلة. الآن ، ضع جل سيانوا أكريليت على الجمجمة لتأمين جميع مسامير الفولاذ المقاوم للصدأ وأسلاك القطب. تأكد من عدم سحب الأقطاب الكهربائية النشطة ERG بإحكام قبل تثبيتها لتمكين حركات العين.

بعد ذلك ، أغلق الشق باستخدام الغرز المتقطعة. ثم قم بتدوير القوارض لفضح منطقة البطن. قم بتمديد شق الجلد البطني إلى 40 ملم على طول الخط ألبا باستخدام مقص جراحي.

بعد ذلك ، قم بعمل شق 35 ملم عبر جدار العضلات الداخلي ، لفضح تجويف البطن الداخلي. باستخدام خيوط ، قم بتوصيل جسم الإرسال بجدار البطن الداخلي للحيوان على اليمين وتجنب ملامسة الكبد. قم بطي القطب الأرضي عن طريق تثبيته في حلقة بخيطتين ووضعه ، عائما بحرية ، في تجويف البطن جنبا إلى جنب مع خيوط القطب الكهربائي الأخرى.

بعد ذلك ، أغلق الصفاق باستخدام خياطة مستمرة. ثم أغلق شق الجلد باستخدام الغرز المتقطعة. لتسجيل الإشارات المظلمة المتكيفة ، تتكيف مع الظلام لمدة 12 ساعة ويتم إعداد جميع الإجراءات في غرفة مظلمة بمساعدة الضوء الأحمر الخافت.

لأغراض التوضيح ، سيتم إجراء التسجيلات في ظل ظروف إضاءة الغرفة العادية هنا. قبل التسجيل ، ضع التخدير الموضعي وقطرات التوسيع على قرنية الفئران. بعد ذلك ، قم بتوجيه الواعي إلى تقييد واضح ومخصص.

ضع الجرذ أمام وعاء Ganzfeld مع محاذاة عينيه مع فتحة الوعاء. قم بتشغيل جهاز الإرسال السكني عن طريق تمرير مغناطيس في حدود خمسة سنتيمترات منه. تحقق من تشغيل جهاز الإرسال عن طريق التحقق من مصباح حالة LED على قاعدة جهاز الاستقبال.

أغلق قفص فاراداي الذي يضم لوحة الاستقبال لتحسين نسبة الإشارة إلى الضوضاء. ثم اجمع الإشارات عبر مجموعة من الطاقات المضيئة. يوضح هذا الشكل أشكال موجة ERG في الفئران الواعية في اليوم السابع بعد الجراحة.

تم تسجيل استجابات ERG لنطاق طاقة التحفيز مع الاستجابة للوميض الخافت الموضح في الأسفل وألمع وميض في الأعلى. في اليوم 28 بعد الجراحة ، ظلت أشكال الموجة هذه مماثلة لتلك التي كانت في اليوم السابع. على مدى أربعة أسابيع ، لم يكن هناك تأثير زمني كبير لسعة مستقبلات الصور وحساسيتها.

الخلية ثنائية القطب قضيب وحساسيتها. سعة الخلية القطبية المخروطية. والوقت الضمني.

وبالمثل ، يبدو أن أشكال موجات VEP قابلة للمقارنة بعد سبعة و 28 يوما من الجراحة. مع معلمات السعة والتوقيت التي لا تظهر أي تأثير زمني كبير. أشارت هذه النتائج إلى استقرار قوي لإشارة ERG و VEP.

بمجرد إتقان المكون الجراحي للتقنية ، سيتم الانتهاء من المكون الجراحي للتقنية في غضون ساعة ونصف إلى ساعتين. يمكن إكمال مكون التسجيل الواعي ، إذا تم إعداده بشكل صحيح ، في 45 دقيقة. باتباع هذا الإجراء ، يمكن أيضا إجراء طرق أخرى مثل التلاعب الدوائي أو المرض.

سيجيب هذا على أسئلة إضافية في اكتشاف الأدوية بالإضافة إلى التجارب الطولية التاريخية. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أيضا إجراء هذا الإجراء في الأخرى إذا لزم الأمر. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية الزرع جراحيا وقياس إشارات القياس عن بعد ERG و VEP الواعية لاحقا.