بديل والمصادق عليها طريقة حقن للوصول إلى الفضاء تحت الشبكية عبر نهج Transcleral الخلفي

الهدف العام من هذه الدراسة هو وصف تقنية حقن تحت الشبكية الجديدة التي يمكن استخدامها لاستهداف النواقل الفيروسية أو العوامل الدوائية أو تحفيز الخلايا الجذعية متعددة القدرات في الفضاء تحت الشبكية في الفئران. يمكن لهذه الطريقة الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجالات علم الرؤية وطب العيون ، مثل تقييم فعالية التدخلات العلاجية الجديدة لتنكس الشبكية. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن استخدامها لتوصيل المواد إلى الفضاء تحت الشبكية ، بفعالية عالية ، وأقل ضرر ، واستعادة سريعة لبنية الشبكية ووظيفتها.

سيوضح الإجراء ساشين بي ، فني من مختبري. لبدء هذا الإجراء ، قم بقص شعيرات الفأر المخدر لتسهيل التصور ، والحفاظ على درجة حرارة جسم عند 37 درجة مئوية باستخدام وسادة مياه متداولة. بعد ذلك ، قم بتوسيع تلاميذها باستخدام قطرات العين 2.5٪ من فينيل إيفرين.

بعد ذلك ، ضع قطرات العين ميثيل السليلوز لمنع الجفاف ، وتقليل إعتام عدسة العين العابر الناجم عن التخدير. تعقيم الأدوات قبل الجراحة. بعد ذلك ، قم بإعداد الفلورسين المخفف في خزانة السلامة الحيوية.

املأ المحقنة بالكمية المناسبة من الفلورسين. بعد ذلك ، قم بإجراء قرصة إصبع القدم للتأكد من تخدير بعمق ، وضع الفأر بحيث تكون العين المراد حقنها متجهة لأعلى ومرئية بوضوح في مجهر التشريح. اضغط برفق على الملتحمة الصدغية باستخدام زوج من الملقط ذي الرؤوس الدقيقة.

بعد ذلك ، قم بعمل شق محيطي بحوالي 90 درجة باستخدام مقص Vannas المنحني. كرر الإجراء على كبسولة تينون الأساسية. بعد ذلك ، قم بإزالة المشكلة الضامة المحيطة باستخدام ملقط رفيع الرؤوس ، أثناء تدوير الكرة الأرضية عن طريق الأنف.

اعمل باتجاه موقع الحقن على بعد حوالي 0.5 ملم من العصب البصري واحرص بشدة على تجنب تعطيل الجيوب الأنفية المدارية الرجعية. تتمثل الخطوة الحاسمة في تعريض موقع الحقن الذي يتطلب دوران العين ، دون الإضرار بالعين نفسها ، أو الهياكل المرتبطة بها ، ولا سيما تجنب تلف كيس الدم المداري في هذا الإجراء ، قم بعمل شق صغير في صلبة موقع الحقن ، عن طريق خدش كوب العين برفق بشفرة عيون 22.5 درجة.

يجب أن يكون هذا الشق كبيرا بما يكفي للسماح لطرف الإبرة بالمرور عبر الصلبة. بعد ذلك ، أدخل الإبرة المشطوفة قياس 33 في بضع التصلب مع مواجهة المائل وزاوية موازية لشبكية العين. حقن الكمية المطلوبة من 0.01٪ فلورسين عن طريق الضغط على المكبس ببطء مع ضغط متساو.

لاحظ أنه عندما تكون الإبرة في الفضاء تحت الشبكية ، ستشعر بمقاومة طفيفة أثناء الضغط على المكبس. لن تكون هناك مقاومة إذا ثقبت الإبرة شبكية العين ، ولكن مقاومة عالية إذا لم تخترق الإبرة الصلبة أو RPE. خطوة أخرى حاسمة هي الحقن الذي يستهدف الفضاء تحت الشبكية.

يجب تحقيق ذلك دون اختراق شبكية العين الحسية العصبية ، إلى التجويف الزجاجي. انتظر عدة ثوان قبل سحب الإبرة لتقليل التدفق العكسي. بعد ذلك ، اشطف العين بمحلول ملحي معقم ، وتأكد من عودة العين إلى وضعها الطبيعي.

بعد ذلك ، ضعي طبقة سميكة من كريم العين ثلاثي المضادات الحيوية على سطح قرنية العين المحقونة. بعد ذلك ، ضع الماوس في قفص انفرادي نظيف للتعافي. راقب التنفس ودرجة الحرارة أثناء التعافي من التخدير ، وتأكد من قدرته على الحفاظ على الاستلقاء القصي.

إجراء مراقبة وعلاج إضافيين مناسبين بعد الجراحة، بما في ذلك حقن الكاربروفين تحت الجلد، للتحكم في الألم بعد الجراحة. فيما يلي إعادة بناء ثلاثية الأبعاد للفقاعة على شكل قبة في موقع الحقن. ثم يتم ملء الفقاعة على شكل قبة باللون الأبيض الكثيف لإظهار مدى وهوامش انفصال الشبكية.

يمكن رؤية المقاطع العرضية للشبكية من OCT باللون الأبيض ، بينما تظهر المساحة المملوءة بالسوائل على مستوى RPE والمستقبلات الضوئية باللون الأسود. وفي هذا الشكل ، تظهر فحوصات OCTB التمثيلية في موقع انفصال الشبكية القصوى قبل الحقن ، وبعد 10 دقائق من الحقن ، وأربعة أسابيع بعد الحقن. توضح هذه الصورة تكوين ودقة فقاعة مسطحة من حقن 0.3 ميكرولتر.

وتظهر هذه الصورة تكوين ودقة فقاعة مقببة من حقن 0.5 ميكرولتر ، بينما توضح هذه الصورة تكوين ودقة فقاعة مقببة من حقن ميكرولتر واحد. أخيرا ، إليك مثال على التندب المشيمي الشديد وترقق الشبكية في موقع الحقن. تحتفظ شبكية العين بالوظيفة الطبيعية بعد حل الفقاعة.

في تسع شدة إضاءة ، تظهر الأشكال الموجية للاستجابات بوساطة قضيب سكوتوبي قبل الحقن وأربعة أسابيع بعد الحقن ل 0.3 ميكرولتر و 0.5 ميكرولتر و 1 ميكرولتر. بمجرد إتقانها ، يمكن إكمال هذه التقنية في 10 إلى 15 دقيقة لكل عين. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم تقييم صحة العينين قبل البدء.

استبعاد العيون ذات العتامة في القرنية أو العدسة ، أو العيون العميقة التي سيكون هذا الإجراء صعبا للغاية. بعد هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل التصوير المقطعي الآلي وتصوير قاع العين من أجل تقييم جودة الحقن.