نموذج من القلب إعادة عرض من خلال انقباض البطن الأورطي في الجرذان

الهدف العام من الإجراء الجراحي هو توفير منصة بسيطة لدراسة تضخم عضلة القلب وإعادة تشكيله والخلل الوظيفي. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال القلب والأوعية الدموية مثل الإشارات التي تنطوي على تضخم القلب وإعادة تشكيله. بالإضافة إلى اكتشاف أهداف علاجية جديدة في أمراض القلب الناجمة عن ارتفاع ضغط الدم.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها طريقة طفيفة التوغل تتطلب تقنيات جراحية بسيطة للغاية ومع ذلك فإن النتائج قابلة للتكرار بدرجة كبيرة. تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنيات إلى علاجنا لأمراض القلب الناجمة عن ارتفاع ضغط الدم. نظرا لأن انقباض الشريان الأورطي البطني يؤدي إلى زيادة الضغط ويؤدي في النهاية إلى تضخم القلب وإعادة التشكيل وفشل القلب.

للبدء ، قم بإعداد إبرة حقنة قياس 22 باستخدام حجر شحذ لتخفيف الحافة. ثم باستخدام كماشة ، قم بتحريك الإبرة بزاوية قائمة. تحضير المواد الجراحية المطلوبة بما في ذلك قفص الإنعاش والأوتوكلاف للأدوات الجراحية.

حافظ على الفئران حوالي 200 جرام واحتفظ بها تحت 12 ساعة من دورات الضوء والظلام في درجة حرارة مضبوطة مع حرية الوصول إلى الطعام والماء. ضع الجرذ في وضع ضعيف على منصة جراحة مع وسادة تدفئة للحفاظ على درجة حرارة الجسم. حلق المنطقة الجراحية بالكامل لتجنب تلوث الجرح من خلال ملامسة الفراء.

ثم ، باستخدام البيتادين أو كاشف آخر ، افرك البطن الحليق بشكل نظيف. بعد ذلك ، باستخدام مشرط ، قم بعمل شق بطول سنتيمترين على طول خط الوسط من البطن. بعد ذلك ، باستخدام محلول ملحي عادي ، قم بترطيب أعضاء البطن والحفاظ على رطوبة الأعضاء أثناء الجراحة.

باستخدام كرات القطن ، قم بإزاحة الأعضاء الهضمية بعناية إلى الجانب لفضح الوريد الأجوف السفلي والمنطقة البريتونية الخلفية. ثم حدد الشريان الأورطي البطني الذي يقع جنبا إلى جنب مع الوريد الأجوف السفلي وعادة ما يساره. الآن ، باستخدام الملقط ، اخترق الصفاق للكشف عن الأوعية تحتها.

اعزل الشريان الأورطي البطني بجوار الشرايين الكلوية برفق وقم بتمرير خياطة حريرية بطول ثمانية سنتيمترات 4/0 أسفل الوعاء الدموي بين أصول الشرايين الكلوية اليمنى واليسرى. اصنع عقدة مزدوجة فضفاضة بالخياطة واترك حلقة قطرها ثلاثة ملليمترات. ثم ضع إبرة قياس 22 الضعيفة والمثنية داخل الحلقة.

شد العقدة حول الشريان الأورطي والإبرة ثم قم بإزالة الإبرة على الفور لتحقيق انقباض قطره 0.7 ملليمتر. مع 6/0 خيوط أغلق تجويف البطن. ثم استخدم خيوطا بسيطة متقطعة لإغلاق شقوق العضلات والجلد.

استخدم صبغة اليود لفرك موقع الجراحة لمنع العدوى. لمنع ألم ما بعد الجراحة ، عالج بعقار الأسيتامينوفين وراقب عن كثب حتى يستعيد وعيه الكافي كما يتضح من حرية الحركة وتناول الطعام ويحافظ على الاستلقاء القصي. في 10 أسابيع بعد الجراحة ، تزن الفئران.

بعد تخدير والتأكد من عمق التخدير ، ضع الجرذ على صينية معدنية. الآن قم بعمل شق بطول خمسة سنتيمترات في المنطقة الصدرية حول خط الوسط لعملية الخنجري. باستخدام ملقط حاد يخترق الحجاب الحاجز.

ثم ، باستخدام المقص ، قم بقص وإزالة القفص الصدري على طول الخطوط الوسطى الترقوة على كلا الجانبين لفضح القلب. استئصال القلب بعناية على طول حدود القلب والأوعية الدموية. ثم قم بإزالة القلب برفق دون الإمساك بالأنسجة.

قم بتركيب القلب على جهاز نضح لانجندورف المعدل عن طريق ربط جذع الأبهر بإبرة التروية. ثم استخدم عازلة كريبس لنقل القلب وغسل الدم. قم بوزن القلب واحسب نسبة وزن القلب إلى وزن الجسم.

بعد ذلك ، أثناء ارتداء قناع ، ضع العضو في 4٪ بارافورمالدهيد وثبته على الجليد طوال الليل. بعد تثبيت أنسجة القلب ، ضعه على جهاز تقسيم الأنسجة ، وقم بتقطيعه إلى شريحتين بسمك ملليمترين ، وضع الأقسام في شريط مدمج. بعد تضمين البارافين والتقسيم الإضافي وفقا لبروتوكول النص ، قم بإزالة الشرائح عن طريق وضعها في خزان يحتوي على الزيلين لمدة 30 دقيقة.

ثم أعد ترطيب الأنسجة في سلسلة كحول مخففة بالتتابع متبوعة بالماء المقطر. بعد ذلك ، استخدم محلول picrosirius الأحمر المناسب لتغطية أقسام الأنسجة بالكامل واحتضانه لمدة ساعة واحدة. ثم استخدم محلول حمض الأسيتيك 0.5٪ لشطف الشرائح مرتين.

وشطف العينات مرتين في الكحول المطلق. جفف العينات بالهواء وقم بتركيبها في راتنج صناعي مع زلة غطاء. ثم استخدم الضوء المرئي تحت المجهر بتكبير 200X لتصوير الشرائح.

أخيرا ، احسب النسبة المئوية للمنطقة الموجبة الحمراء picrosirius على المساحة الإجمالية مما يشير إلى مدى التليف. كما هو موضح هنا ، زاد حجم القلب بعد جراحة انقباض الأبهر البطني. كما يتضح من ارتفاع نسبة وزن القلب إلى وزن الجسم وهو مؤشر على تضخم القلب.

باستخدام تلطيخ بيكروسيريوس الأحمر ، يمكن تمييز عضلة القلب الليفية مع زيادة محتوى الكولاجين عن المناطق الطبيعية. كما هو موضح في هذه العينات الملطخة ، زاد التليف القلبي بعد جراحة انقباض الأبهر البطني مقارنة بالضوابط. بمجرد إتقان الجراحة ، يمكن إجراؤها في 30 دقيقة إذا تم إجراؤها بشكل صحيح.

بعد هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل تخطيط القلب بالصدى من أجل الإجابة على أسئلة إضافية حول وظيفة القلب. بعد تطويرها ، مهدت هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال أمراض القلب الناجمة عن ارتفاع ضغط الدم لاستكشاف الآليات التي تنطوي على تضخم القلب وإعادة التشكيل والفشل. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء انقباض الأبهر البطني للحث على تضخم القلب وإعادة تشكيل عضلة القلب في الفئران.