Name: قياس توزيع حجم الجسيمات في عكر حلول كتبها الإنارة الديناميكي التشتت المجهر (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-09T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: تعلم قياس توزيع حجم الجسيمات في المحاليل العكرة باستخدام مجهر التشتت الضوئي الديناميكي. تتيح هذه الطريقة تحليل العينات المركزة دون تخفيفها مع الحفاظ على تركيزها الأصلي.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

تم دعم هذا العمل ماليا من قبل Grants-in-Aid for Research Research من وزارة التعليم والثقافة والرياضة والعلوم والتكنولوجيا (رقم 25248027 إلى MS).

التحضير 1. عينة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تنقية أحادية استجابة درجات الحرارة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حل 20 غراما من N -isopropylacrylamide (NIPA) في 100 مل من التولوين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصفية حل تحت الشفط لإزالة الغبار. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> خلط الراشح مع 500 مل من الأثير البترول. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع وعاء التفاعل في حمام الماء المثلج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحريك الحل حتى يتم ترسيب أحادية (عادة 30 دقيقة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تصفية حل تحت شفط للحصول على أحادية المترسبة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجفيف أحادية تحت ضغط منخفض (100 باسكال) بين عشية وضحاها. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحضير محلول البوليمر استجابة درجات الحرارة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ديغا 20 مل من الماء منزوع الأيونات ل 1.0 دقيقة باستخدام مضخة الحجاب الحاجز. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حل 780.8 ملغ من NIPA تنقيته في 9.5 مل من الماء نزع الغاز ومنزوع الأيونات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع وعاء التفاعل في حمام الماء المثلج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> درع رد فعل منضوء من خلال تغطية الجهاز مع رقائق الألومنيوم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحريك الحل بلطف لمدة 10 دقيقة في حين قدم تدفق معتدلة من الغاز هارون بلطف عن طريق طرف ماصة تعلق على اسطوانة غاز مع أنبوب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة 11.9 ميكرولتر من N، N، N '، N' -tetramethylethylenediamine إلى حل عن طريق micropipette. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحريك حل ل1.0 دقيقة في حين قدم غاز هارون، كما ذكر في الخطوة 1.2.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع التحريك العينة، ويحل 4.0 ملغ من فوق كبريتات الأمونيوم في 0.5 مل من الماء نزع الغاز ومنزوع الأيونات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مزيج من محلول العينة (من الخطوة 1.2.7) والحل فوق كبريتات الأمونيوم (من الخطوة 1.2.8). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحريك الحل لمدة 30 ثانية في حين قدم غاز AR، كما ذكر في الخطوة 1.2.5. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية الحل مع رقائق الألومنيوم والاحتفاظ بها في الثلاجة (4 درجة مئوية) بين عشية وضحاها. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد يتصاعد عينة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع 60 ميكرولتر من محلول العينة (منخطوة 1.2.11) في شريحة تجويف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية الحل مع غطاء زجاجي دائري. يجب الحرص على عدم فقاعات فخ الهواء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الحل إزالة الزائدة باستخدام micropipette ومختبر مناديل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ختم العينة مع الغراء. اسمحوا الجافة الغراء في درجة حرارة الغرفة (عادة 6 ساعات). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد شريحة أخرى مليئة اتكس 0.1٪ بالوزن البوليسترين (100 نانومتر الجسيمات القطر) تعليق باتباع الخطوات 1.3.1-1.3.4. يستخدم هذه الشريحة كمعيار. </li></ol></li></ol> 2. حجم الجسيمات قياس مع الإنارة الديناميكي التشتت مجهر <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعظيم الاستفادة من أداة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع الشريحة تعليق البوليسترين اللاتكس (من الخطوة 1.3.5) على مسرح المجهر المقلوب. الجانب غطاء زجاجي يجب ان يواجه الهبوط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع المثبط شعاع أمام كاشف (وهو الضوئي الانهيار وautocorrelator). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق شعاع الليزر (ليزر الحالة الصلبة، λ = 488 نانومتر، 30 ميغاواط، مستمرةموجة) لعينة من خلال العدسة الشيئية (10 ×). جزء من الضوء المنعكس يمر عبر مرآة إطلاق المجهر ولوحظ بواسطة كاميرا CCD التي شنت في ميناء جانب المجهر (الشكل 1). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط ارتفاع عدسة موضوعية لتحديد نقطة محورية في تعليق عينة عن طريق تحويل ارتفاع عدسة الهدف من موقع منخفض إلى مرتفع. خلال هذا الإجراء، يتم تركيز الصورة ينعكس ثلاث مرات: في سطح الزجاج غطاء، في واجهة بين الزجاج غطاء والعينة، وعلى واجهة بين العينة والزجاج ثقب الشرائح. تعيين نقطة الوصل بين النقاط الثانية والثالثة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخفيف شدة الضوء المتناثرة من خلال تغيير قوة الليزر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدخال الضوء المتناثرة في كاشف عن طريق إزالة المثبط شعاع أمام كاشف. هذه الوحدة يقيس العلاقة وقت شدة الضوء. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تعيين الثقب (φ = 50 ميكرون) betwالتابعين المجهر وكاشف لتحقيق التأثير متحد البؤر. ضبط الموقف من الثقب إلى تحقيق أقصى قدر من شدة الضوء في كاشف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس وظيفة ارتباط وقت شدة الضوء المتناثرة لمدة 30 ثانية قبل بدء تشغيل خاسسرح عن طريق الكمبيوتر. وكثيرا ما أعرب عن وظيفة ارتباط يقاس ز (2) (ر) - 1، حيث t هي المرة ارتباط 4 و <img alt="المعادلة 1" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq1.jpg"> . هنا، الأول (ر) هو شدة الضوء المتناثرة في الوقت t و (•••) T حان الوقت المتوسط. الوقت تسوس سيكون ما يقرب من 0.1 مللي ثانية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط نقطة محورية للحصول على مجموعة واسعة من أجل السعة الأولية وظيفة الوقت الارتباط (ز (2) (ر = 0) - 1). ملاحظة: إن السعة الأولية تتأثر بشدة من كمية الضوء المنعكسة. عن طريق تحريك سحب نقطة البؤريايه ار دى واجهة بين الزجاج غطاء والعينة، وكمية ضوء الزيادات ينعكس. لعدسات ضوء قوي، مثل اللاتكس البوليسترين، واتساع الأولية يمكن تغييرها من 0 إلى 1. ومع ذلك، فإنه من الصعب تحديد السعة الأولية وثيقة إلى 1 لحلول البوليمر أكثر شيوعا بسبب شدة الضوء المنعكس هو أعلى بكثير من أن من الضوء المتناثرة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق معكوس لابلاس تحول (باستخدام برنامج تنظيم مقيدة CONTIN 13،14) إلى وظيفة الوقت الارتباط التي تم الحصول عليها للحصول على وظيفة حجم التوزيع. في الحالات التي يتم فيها تعيين السعة الأولية إلى أقل من 0.2، فإن وظيفة توزيع نصف قطرها الهيدروديناميكية تظهر ذروة حادة نحو 100 نانومتر، وهو ضعف نصف قطر الفعلي (انظر مناقشة للحصول على التفاصيل). </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس عينة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط درجة الحرارة مرحلة إلى 25 درجة مئوية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضع شريحة أعدت مع بولي NIPA (PNIPA) solutأيون (الخطوة 1.3.4) على مسرح المجهر. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس وظيفة الوقت علاقة لشدة الضوء المتناثرة باتباع الخطوات 2.1.4-2.1.8. إذا كانت السعة الأولية أكبر من 0.2، وضبط نقطة محورية لجعل السعة الأولية وظيفة الوقت ارتباط أقل من 0.2 باتباع الخطوة 2.1.9. والسعة الأولية صغيرة يبسط تحليل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضبط درجة الحرارة مرحلة إلى 35 درجة مئوية، والانتظار حتى يتحول الحل العكرة. درجة حرارة المحلول أقل الحرجة (LCST) من حل PNIPA 32 درجة مئوية (15). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قياس وظيفة ارتباط الوقت عن طريق الخطوات التالية 2.1.4-2.1.8. إذا كان ذلك ممكنا، وضبط الموقف من النقطة المحورية لجعل السعة الأولية وظيفة الوقت ارتباط أقل من 0.2. عن حلول العكرة، تميل سعة الأولية إلى زيادة، لأن شدة الزيادات الضوء المتناثرة في حين أن الضوء الذي ينعكس يزال مستمرا. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطبيق معكوس لابلاس transformatiإلى وظائف ارتباط وقت الحصول عليها للحصول على وظائف حجم التوزيع. لاحظ أن الحجم الفعلي هو نصف قيمة تم الحصول عليها في الحالات التي يكون فيها السعة الأولية هي أقل من 0.2. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Hiroi, T., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+Light+Scattering+Microscope%3A+Accessing+Opaque+Samples+with+High+Spatial+Resolution%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Express%22%5BJournal%5D)">Dynamic Light Scattering Microscope: Accessing Opaque Samples with High Spatial Resolution.</a> Opt. Express. 21, 20260-20267 (2013).</li>
<li>Barth, H. G., Flippen, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle+Size+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Particle Size Analysis.</a> Anal. Chem. 67, 257-272 (1995).</li>
<li>Liu, Y., Wang, Z., Zhang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+supramolecular+polymers%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Soc.+Rev%22%5BJournal%5D)">Characterization of supramolecular polymers.</a> Chem. Soc. Rev. 41, 5922-5932 (2012).</li>
<li>Berne, B. J., Pecora, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBerne%2C+BJ+%22Dynamic+Light+Scattering+with+Applications+to+Chemistry%2C+Biology+and+Physics%22">Dynamic Light Scattering with Applications to Chemistry, Biology and Physics</a>. , Dover Publications, Inc. (2000).</li>
<li>Phillies, G. D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+demonstration+of+ruultiple-scattering+suppression+in+quasielastic-light-scattering+spectroscopy+by+homodyne+coincidence+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+A%22%5BJournal%5D)">Experimental demonstration of ruultiple-scattering suppression in quasielastic-light-scattering spectroscopy by homodyne coincidence techniques.</a> Phys. Rev. A. 24, 1939-1943 (1981).</li>
<li>Phillies, G. D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Suppression+of+multiple+scattering+effects+in+quasielastic+light+scattering+by+homodyne+crosscorrelation+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Phys%22%5BJournal%5D)">Suppression of multiple scattering effects in quasielastic light scattering by homodyne crosscorrelation techniques.</a> J. Chem. Phys. 74, 260-262 (1981).</li>
<li>Ishii, K., Yoshida, R., Iwai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single-scattering+spectroscopy+for+extremely+dense+colloidal+suspensions+by+use+of+a+low-coherence+interferometer%5BTitle%5D)+AND+%22Opt.+Lett%22%5BJournal%5D)">Single-scattering spectroscopy for extremely dense colloidal suspensions by use of a low-coherence interferometer.</a> Opt. Lett. 30, 555-557 (2005).</li>
<li>Xia, H., Ishi, K., Iwai, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrodynamic+Radius+Sizing+of+Nanoparticles+in+Dense+Polydisperse+Media+by+Low-Coherence+Dynamic+Light+Scattering%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn.+J.+Appl.+Phys%22%5BJournal%5D)">Hydrodynamic Radius Sizing of Nanoparticles in Dense Polydisperse Media by Low-Coherence Dynamic Light Scattering.</a> Jpn. J. Appl. Phys. 44, 6261-6264 (2005).</li>
<li>Maret, G., Wolf, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+light+scattering+from+disordered+media.+The+effect+of+brownian+motion+of+scatterers%5BTitle%5D)+AND+%22Z.+Phys.+B%22%5BJournal%5D)">Multiple light scattering from disordered media. The effect of brownian motion of scatterers.</a> Z. Phys. B. 65, 409-413 (1987).</li>
<li>Pine, D. J., Weitz, D. A., Chaikin, P. M., Herbolzheimer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diffusing+wave+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Diffusing wave spectroscopy.</a> Phys. Rev. Lett. 60, 1134-1137 (1988).</li>
<li>Cerbino, R., Trappe, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Dynamic+Microscopy%3A+ProbingWave+Vector+Dependent+Dynamics+with+a+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Differential Dynamic Microscopy: ProbingWave Vector Dependent Dynamics with a Microscope.</a> Phys. Rev. Lett. 108, 188102(2012).</li>
<li>Lu, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterizing+Concentrated%2C+Multiply+Scattering%2C+and+Actively+Driven+Fluorescent+Systems+with+Confocal+Differential+Dynamic+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Characterizing Concentrated, Multiply Scattering, and Actively Driven Fluorescent Systems with Confocal Differential Dynamic Microscopy.</a> Phys. Rev. Lett. 108, 218103(2012).</li>
<li>Provencher, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+constrained+regularization+method+for+investing+data+represented+by+linear+algebraic+or+integral+equations%5BTitle%5D)+AND+%22Comp.+Phys.+Comm%22%5BJournal%5D)">A constrained regularization method for investing data represented by linear algebraic or integral equations.</a> Comp. Phys. Comm. 27, 213-227 (1982).</li>
<li>Provencher, S. W., Stepanek, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+analysis+of+dynamic+light+scattering+autocorrelation+functions%5BTitle%5D)+AND+%22Part.+Part.+Syst.+Charact%22%5BJournal%5D)">Global analysis of dynamic light scattering autocorrelation functions.</a> Part. Part. Syst. Charact. 13, 291(1996).</li>
<li>Takata, S., Norisuye, T., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small-angle+Neutron+Scattering+Study+on+Preparation+Temperature+Dependence+of+Thermosensitive+Gels%5BTitle%5D)+AND+%22Macromolecules%22%5BJournal%5D)">Small-angle Neutron Scattering Study on Preparation Temperature Dependence of Thermosensitive Gels.</a> Macromolecules. 35, 4779-4784 (2002).</li>
<li>Pusey, P. N., van Megen, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+Light+Scattering+by+Non-Ergodic+Media%5BTitle%5D)+AND+%22Physica+A%22%5BJournal%5D)">Dynamic Light Scattering by Non-Ergodic Media.</a> Physica A. 157, 705-741 (1989).</li>
<li>Chu, B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChu%2C+B+%22Laser+Light+Scattering.+2nd+Ed%22">Laser Light Scattering. 2nd Ed</a>. , Academic Press. (1991).</li>
<li>Shibayama, M., Tanaka, T., Han, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small-Angle+Neutron-Scattering+Study+on+Poly%28N-Isopropyl+Acrylamide%29+Gels+near+Their+Volume-Phase+Transition-Temperature%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Chem.+Phys%22%5BJournal%5D)">Small-Angle Neutron-Scattering Study on Poly(N-Isopropyl Acrylamide) Gels near Their Volume-Phase Transition-Temperature.</a> J. Chem. Phys. 97, 6829-6841 (1992).</li>
<li>Tanaka, T., Sato, E., Hirokawa, Y., Hirotsu, S., Peetermans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+Kinetics+of+Volume+Phase+Transition+of+Gels%5BTitle%5D)+AND+%22Phys.+Rev.+Lett%22%5BJournal%5D)">Critical Kinetics of Volume Phase Transition of Gels.</a> Phys. Rev. Lett. 55, 2455-2458 (1985).</li>
<li>Hiroi, T., Ata, S., Shibayama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transitions+of+Aggregation+States+for+Concentrated+Carbon+Nanotube+Dispersion%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Phys.+Chem.+C%22%5BJournal%5D)">Transitions of Aggregation States for Concentrated Carbon Nanotube Dispersion.</a> J. Phys. Chem. C. 120, 5776-5782 (2016).</li>
</ol>

ليس لدى المؤلفين ما يكشفون عنه.

السعة الأولية للدالة الارتباط الوقت يعتمد بشكل كبير على نقطة محورية، كما هو مبين في الشكل 2 (أ). هذا على ما يبدو يتناقض مع حقيقة أن الحل هو متجانس (باستثناء طبقة رقيقة على واجهة) 8. ويعزى هذا الاختلاف في السعة الأولية إلى التباين في كمية الضوء المنعكسة. جزئية نظرية مغايرة 16 تتنبأ بأن السعة الأولية، A، شدة الضوء المتناثرة، والصورة، وشدة الضوء المنعكس، وص، تلبية المعادلة التالية 1 <img alt="المعادلة 2" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq2.jpg"> وتظهر هذه المعادلة أن أكبر I ص يصبح، يصبح أصغر حجما. لذلك، ويتم تقليل من خلال تحديد موقف البؤري على مقربة من واجهة. نشر الواضح D المستمر وكاليفورنيان الحصول عليها عن طريق تركيب دالة الارتباط الوقت في حالة حلول monodisperse: <img alt="المعادلة 3" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq3.jpg"> أين <img alt="المعادلة 4" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq4.jpg"> . هنا، n هو معامل الانكسار من المذيب (الماء، 1.33)، θ هي الزاوية متفرقة (180 درجة)، وλ هو الطول الموجي للضوء (514.5 نانومتر). منذ طبقنا الهندسة ارتداد مبعثر، ويحدد قيمة ف. ومع ذلك، يتم حل هذه النقطة باستخدام موجات مختلفة من الضوء. يرجى ملاحظة أن أي نوع من مصدر ليزر الموجة المستمرة متاح لبناء المجهر DLS. بفضل حجم المشع صغير، ويقدر عامل تماسك 17 أن يكون أكثر من 0.99 ولا يكاد يذكر. عن حلول polydisperse، يتم الحصول على وظيفة توزيع D A عن طريق معكوس تحويل لابلاس. عشر مغايرة جزئيةيتوقع eory أيضا أن D وليس هو نفسه كما نشر الفعلي D المستمر. هذه الثوابت نشر اثنين من تلبية المعادلة التالية: <img alt="المعادلة 5" src="/files/ftp_upload/54885/54885eq5.jpg"> يتم تحويل D ثابت نشر في الهيدروديناميكية دائرة نصف قطرها R ح باستخدام معادلة اينشتاين ستوكس 4. عندما أ = 1، تصبح هذه العلاقة D A = D. في هذه الحالة، فإن عملية تحويل البيانات هي نفسها التي لتشتت الضوء الديناميكي المشترك. الخط الأحمر هو مبين في الشكل 2 (ب) يتوافق مع هذه الحالة. في المقابل، تصبح هذه العلاقة D A = 0.5 D في الحد من A → 0. لذلك، ويقدر حجم ليكون ضعفي حجم الفعلي عندما وصغيرة (أي عمليا وأقل من 0.2)، كما هو موضح من قبل الخط الأزرق في الشكل 2 (ب) (أ) هو صغير إلى حد كبير، والمحور الأفقي يمكن تحويل، كما هو مبين في الشكل 2 (ج). من حيث المبدأ، يمكننا تحويل D وإلى D لأي قيمة A. في الممارسة العملية، ومع ذلك، فمن الأفضل لتعيين السعة الأولية أصغر من 0.2، منذ بسيط تقريب D A ~ 0.5 D يصدق. وقد أظهرت السمات البارزة للتقنية نثر المجهر دينامية الخفيفة باستخدام محلول PNIPA. وقد تمت دراسة التشكل من PNIPA أسفل وأعلى LCST على نطاق واسع باستخدام النيوترونات زاوية صغيرة نثر 15،18. في المقابل، لم تستغل تشتت الضوء الحيوي لتحليل PNIPA فوق LCST بسبب تعكر 19 منه. يتم حل هذه المشكلة عن طريق الحيوي المجهر تشتت الضوء، كما هو مبين في الشكلين 3 (أ) و (ب). حجم هذه المجاميع هو عدة و# 181؛ م، والتي لا يمكن الحصول عليها إما صغيرة زاوية الأشعة السينية / تشتت النيوترونات أو تقنيات تشتت الضوء التقليدية. قياسات وقت حل باستخدام هذا النظام يعطي معلومات عن عملية التجميع خلال التغير في درجة الحرارة. ويتضح العيب من الحيوي المجهر تشتت الضوء أيضا في الشكل (3). للنتيجة دون LCST، وظيفة ارتباط الوقت يتأثر بشدة كمية صغيرة جدا من الغبار الحاضر (الخطوط السوداء في الشكل 3). على سبيل المثال، فإن وظيفة ارتباط الوقت لا يتحلل تماما، حتى في زمن ارتباط في ترتيب 1.0 ثانية. وذلك لأن حجم المشع مع هذا الجهاز (ما يقرب من 1.0 ميكرون) هو أصغر بكثير من أن المشع مع جهاز تشتت الضوء الحيوي المعتاد (حوالي 100 ميكرون). في الحالات التي يكون فيها شدة الضوء المتناثرة ضعيفة، تحجب إشارة من الضوضاء، مثل تلك التي تسببها الصورةكميات مول الغبار في الحل. ولذلك، فإن القمم الثلاث هو مبين في الشكل (3) (ب) لا يجوز أن يكون الأهمية الكمية على الرغم من أن النظام العام للحجم هو مفيد. لاحظ أن هذا المشتت الضعيف يمكن أن يقاس جهاز تشتت الضوء الحيوي التقليدي. لقد أثبتنا أن دينامية المجهر تشتت الضوء تمكننا من قياس العينات سواء شفافة وعكر مع نفس الإعداد. ومنذ مدة مسار بصري في العينات غير قصيرة، ويمكن تطبيق هذه التقنية لعينات امتصاص الضوء القوية، مثل تعليق أنابيب الكربون 20. وبالإضافة إلى ذلك، نظرا لدقة مكانية عالية، ويمكن تطبيق هذه التقنية على الخلايا البيولوجية. لتطبيقه على الأحياء، ويمكن أيضا هذه الطريقة تكون جنبا إلى جنب مع تقنيات التصوير الأخرى، مثل مضان والتصوير رامان. وبالتالي، فإننا نعتقد أن دينامية المجهر تشتت الضوء هو أداة قوية لمجموعة واسعة من المجالات البحثية.

حجم الجسيمات هو أحد أهم الخصائص الأساسية للمحاليل الغروية والبوليمر. يتم استخدام العديد من التقنيات لقياس حجم الجسيمات. يمكن قياس أحجام الجسيمات البالغة 1.0 ميكرومتر أو أكبر مباشرة باستخدام المجهر البصري. بالنسبة للجسيمات الأصغر ، يتم استخدام تقنيات بديلة ، مثل حيود الليزر أو المجهر الإلكتروني أو مجهر القوة الذرية2،3. تشتت الضوء الديناميكي هو تقنية شائعة الاستخدام لقياس توزيعات حجم الجسيمات في المحاليل4. النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام هذه التقنية ليست مشتقة من صور الجسيمات ولكن من الوقت المميز للتقلبات في شدة الضوء المتناثرة. تنشأ هذه التقلبات من الحركة البراونية التي تتميز بثابت الانتشار. يتم الحصول على توزيع الحجم من توزيع ثوابت الانتشار باستخدام معادلة أينشتاين ستوكس. نظرا لبساطته ، يستخدم تشتت الضوء الديناميكي على نطاق واسع للتقييم الروتيني للحلول ، مثل الدهانات وغرويات الطعام.
 المعالجة المسبقة مطلوبة لمعظم التقنيات المستخدمة لقياس حجم الجسيمات لعينات المحلول. في حالة الفحص المجهري الإلكتروني والفحص المجهري للقوة الذرية ، يجب تحليل العينة في ظروف الفراغ. لذلك ، من الصعب ملاحظة العينات في أشكالها الأصلية. علاوة على ذلك ، بالنسبة للحيود بالليزر وتشتت الضوء الديناميكي ، يمكن قياس العينات المخففة فقط الخالية من التشتت المتعدد وامتصاص الضوء. للتغلب على هذه الصعوبة ، تم اقتراح العديد من التقنيات الجديدة لقياس تشتت الضوء الديناميكي من المحاليل المركزة غير المخففة ، مثل التحليل الطيفي للارتباط المتبادل5،6 ، تشتت الضوء الديناميكي منخفضالتماسك 7،8 ، التحليل الطيفي للموجات المنتشرة9،10 ، والفحص المجهري الديناميكي التفاضلي11،12.
لقد طورنا جهازا جديدا يسمى مجهر تشتت الضوءالديناميكي 1. يمكننا هذا الجهاز من قياس العينات العكرة دون تخفيف عن طريق نظام بصري متحد البؤر يتم فيه التخلص من التشتت المتعدد باستخدام ثقب. ومع ذلك، فإن إجراءات القياس وتحليل البيانات أكثر تعقيدا قليلا من إجراءات الأدوات المتاحة تجاريا. يشرح هذا الفيديو إجراء القياس وتحليل البيانات بالتفصيل باستخدام تحليل البوليمر المستجيب لدرجة الحرارة ، بولي (N-isopropylacrylamide) ، كمثال.

<table><tbody><tr><td>N-isopropylacrylamide ، 98٪</td> <td>طوكيو للصناعة الكيميائية المحدودة</td><td>I0401</td><td></td></tr><tr><td>تولوين ، 99٪</td> <td>واكو للصناعات الكيميائية النقية ، المحدودة.</td><td>201-01876</td><td></td></tr><tr><td>الأثير البترولي ، درجة حرارة التقطير 30 ~ 60 درجة ؛ سي</td><td>واكو للصناعات الكيماوية النقية المحدودة</td><td>169-22565</td><td></td></tr> <tr><td>< م > ن ، ن ، ن ، ن < / م > رباعي ميثيل إيثيلين ديامين ، 99 ٪</td> <td>سيجما</td><td>T9281</td><td></td></tr><tr><td>بيرسلفات الأمونيوم ، 98 ٪</td> <td>سيجما</td><td>248614</td><td></td></tr><tr><td>تعليق اللاتكس البوليسترين ، 1 بالوزن ،</td> <td>ديوك ساينتيك كوربوريشن</td><td>3500 أمبير</td><td></td></tr><tr><td>أرجون</td><td>كويكي سانسو كوجيو المحدودة</td><td></td><td>نقاء > 99.999 vol.٪</td></tr> <tr><td>تجويف الشريحة</td><td>ماتسونامي الزجاج المحدودة</td><td>83-0336</td><td></td></tr><tr><td>المجهر المقلوب</td><td>نيكون Instech المحدودة</td><td>ECLIPSE Ti-U</td><td></td></tr><tr><td>Thermo Plate</td><td>Tokai Hit CO.، Ltd</td><td>TP-108R-C</td><td></td></tr><tr><td>ليزر الحالة الصلبة</td><td>متماسك</td><td>OBIS 488LX</td><td></td></tr><tr><td>الثنائي الضوئي الانهيار</td><td>الجليدي ALV-GmbH ALV-GmbH</td><td>ALV-High Q.E. الانهيار</td> الجليدي صور الصمام <td></td></tr><tr><td>الثنائي</td><td>المرتبط ALV-GmbH</td><td>ALV-5000 / EPP</td><td></td></tr></tbody></table>

قياس توزيع حجم الجسيمات في عكر حلول كتبها الإنارة الديناميكي التشتت المجهر

Measurement of Particle Size Distribution in Turbid Solutions by Dynamic Light Scattering Microscopy

تم وصف بروتوكول لقياس التشتت المتعدد لمحاليل البوليمر المركزة باستخدام تشتت الضوء الديناميكي. تشتت الضوء الديناميكي هو تقنية تستخدم لقياس توزيع حجم محاليل البوليمر أو الجسيمات الغروية. على الرغم من أن هذه التقنية تستخدم على نطاق واسع لتقييم محاليل البوليمر ، إلا أنه من الصعب قياس حجم الجسيمات في المحاليل المركزة بسبب تأثير التشتت المتعدد أو امتصاص الضوء القوي. لذلك ، يجب تخفيف المحاليل المركزة قبل القياس. يساعد تنفيذ المكون البصري متحد البؤر في مجهر تشتت الضوءالديناميكي 1 على التغلب على هذا الحاجز. باستخدام مثل هذا النظام المجهري ، يمكن تحليل كل من الأنظمة الشفافة والعكرة في ظل نفس الإعداد التجريبي دون تخفيف. كمثال تمثيلي ، تم إجراء قياس توزيع الحجم لمحلول بوليمر مستجيب لدرجة الحرارة. كانت أحجام سلاسل البوليمر في محلول مائي عدة عشرات من النانومتر عند درجة حرارة أقل من درجة حرارة المحلول الحرجة المنخفضة (LCST). في المقابل ، زادت الأحجام إلى أكثر من 1.0 ميكرومتر عندما تكون أعلى من LCST. تتوافق هذه النتيجة مع الملاحظة القائلة بأن المحلول تحول إلى عكر فوق LCST.

تم قياس في نقاط الاتصال المختلفة، كما هو مبين في الشكل 2 (أ): وظائف وقت الارتباط من شدة الضوء المتناثرة لتعليق البوليسترين اللاتكس (50 نانومتر الجسيمات دائرة نصف قطرها). تم تحويل هذه الوظائف ارتباط في وظائف توزيع نصف قطرها الهيدروديناميكية بواسطة معكوس تحويل لابلاس (انظر الشكل 2 (ب) و (ج)). باستخدام نفس الإجراء، تم الحصول على وظائف علاقة الوقت وظائف توزيع نصف قطرها الهيدروديناميكية من الحل PNIPA عند 25 درجة مئوية و 35 درجة مئوية، على التوالي. الأرقام 3 (أ) و (ب) تظهر وظائف الساعة ارتباط من شدة الضوء المتناثرة وظائف توزيع حجم المقابلة من الحل PNIPA أدناه (25 درجة مئوية) وفوق (35 درجة مئوية) وLCST. تم الحصول على وظائف توزيع حجم من قبل معكوس لابلاس تحول تليهاتصحيح مغايرة جزئي. متوسط ​​نصف قطر الهيدروديناميكية تحت LCST هو عدة عشرات من نانومتر، وهو الأمر المعهود عن حلول البوليمر. في المقابل، فإن نصف قطر الهيدروديناميكية فوق LCST حوالي 1.0 ميكرون. هذه النتيجة تتفق مع حقيقة أن الحل هو عكر فوق LCST. الخطوط الحمراء والزرقاء في الشكل (3) تمثل توزيع حجم حلول PNIPA التي تم الحصول عليها مباشرة بعد و20 دقيقة بعد الحل أصبح العكرة، على التوالي. الشكل (3) (ب) يشير بوضوح الى نمو التجميع. <img alt="شكل 1" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig1.jpg"> الشكل 1. مخططات من الحيوي المجهر تشتت الضوء. الثقب (PH)، شعاع الخائن (BS)، المستقطب (بولندا)، والثنائي الضوئي سيل (الهادئ). <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54885/54885fig1large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض</a>نسخة أكبر من هذا الرقم. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig2.jpg"> الشكل 2. ممثل النتائج لتعليق البوليسترين اللاتكس. (أ) وظائف ارتباط وقت شدة الضوء المتناثرة لتعليق البوليسترين اللاتكس. في دائرة نصف قطرها الاسمي هو 50 نانومتر، وتركيز 0.1٪ بالوزن. تم الحصول على مجموعتين من البيانات من نقاط نثر مختلفة. (ب) و (ج) المقابلة وظائف توزيع حجم لتعليق البوليسترين اللاتكس التي حصل عليها معكوس لابلاس تحول من (أ). الخط الأحمر يتوافق مع وظيفة الارتباط الوقت الذي ما يقرب من 1.0 السعة الأولي، والخط الأزرق يقابل ذلك مع اتساع الأولية أن ما يقرب من 0.2. تم حساب المحور الأفقي دون (ب) و مع (ج) النظر في تأثير heterodyning جزئية (PHD) عندما و&lt;&lt; . 1. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/54885/54885fig2large.jpg" target="_blank">الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.</a> <img alt="الشكل (3)" src="/files/ftp_upload/54885/54885fig3.jpg"> الشكل 3. ممثل النتائج عن حل PNIPA. (أ) وظائف ارتباط وقت شدة الضوء المتناثرة من أجل حل PNIPA. (ب) المقابلة وظائف توزيع حجم من أجل حل PNIPA التي حصل عليها معكوس لابلاس تحول من (أ). تم حساب المحور الأفقي النظر في تأثير heterodyning جزئية لكل مجموعة البيانات. يمثل خط أسود على البيانات التي تم الحصول عليها عند 25 درجة مئوية. يمثل خطا أحمر البيانات التي تم الحصول عليها بعد تحول حل عكر (35 درجة مئوية). يمثل الخط الأزرق البيانات التي تم الحصول عليها بعد قياس 20 دقيقة من الخط الأحمر./54885/54885fig3large.jpg "الهدف =" _ فارغة "&gt; الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

ويرد بروتوكول للقياس المباشر لتوزيع حجم الجسيمات في الحلول المركزة باستخدام ديناميكية المجهر تشتت الضوء.

A protocol for measuring polydispersity of concentrated polymer solutions using dynamic light scattering is described. Dynamic light scattering is a ...

الهدف العام من هذه التجربة هو إثبات أنه يمكن استخدام تشتت الضوء الديناميكي والفحص المجهري متحد البؤر لقياس توزيع حجم الجسيمات في المحاليل العكرة دون تخفيف. هذا هو إعداد المجهر الديناميكي لتشتت الضوء. يحتوي على ليزر الحالة الصلبة قادر على تشغيل موجة مستمرة تبلغ 30 مللي واط عند 488 نانومتر.يوجد أيضا الصمام الثنائي الضوئي للانهيار الجليدي ، وهو رابط تلقائي متصل بجهاز كمبيوتر للقياسات. يحتوي المجهر المقلوب في الإعداد على مرحلة مع منظم درجة الحرارة. يحتوي الصندوق على العناصر البصرية المتبقية المطلوبة للتجربة.يوفر هذا التخطيطي عرضا أكثر اكتمالا للتخطيط للإعداد. بعد تشكيل ملف تعريف الشعاع ، يتم إدخال الشعاع في المجهر. يتم الحصول على تشتت الضوء بهندسة تشتت خلفي ويتم توجيهه إلى الكاشف.تسمح مرآة الإطلاق بمراقبة بعض الضوء المنعكس عبر كاميرا CCD. يجب تحضير عينات التجربة قبل يوم واحد. يتطلب تحضير العينة 20 مل من الماء منزوع الأيونات ومنقى الأيونات بالإضافة إلى NIPA المنقى.بالإضافة إلى ذلك ، فإنه يتطلب كميات صغيرة من TMEDA وبيرسلفات الأمونيوم. تستفيد خطوات التحضير أيضا من حمام ماء مثلج على محرك ، ووعاءين للتفاعل ، ورقائق الألومنيوم ، ومصدر لتدفق غاز الأرجون. ابدأ بقياس 9.5 مل من الماء منزوع الغازات ومنزل الأيونات في وعاء تفاعل.أضف NIPA إلى الماء. بعد ذلك ، انقل وعاء التفاعل إلى حمام الماء المثلج على النمام ، وأضف قضيب التحريف. استخدم رقائق الألومنيوم لتغطية الحمام والوعاء لحماية التفاعل من الضوء.استخدم طرف ماصة متصل بمصدر الأرجون لترتيب تدفق معتدل للأرجون إلى المحلول. قم بتشغيل النمام لتقليب المحلول برفق لمدة 10 دقائق. بعد ذلك ، استخدم ماصة دقيقة لقياس 11.9 ميكرولتر من TMEDA.باختصار ، اسحب ورق القصدير لإضافة TMEDA إلى المحلول ثم استمر في التقليب تحت غاز الأرجون لمدة دقيقة أخرى. أثناء تقليب العينة ، اعمل مع وعاء التفاعل الثاني. ضع 4 ملليغرام من بيرسلفات الأمونيوم في الوعاء.ثم أضف 0.5 مل من الماء منزوع الغازات ومنزوع الأيونات. عندما يذوب بيرسلفات الأمونيوم ، أضف المحلول إلى محلول العينة واستمر في التقليب لمدة 30 ثانية تحت تدفق الأرجون. بعد 30 ثانية ، قم بإزالة وعاء التفاعل من الحمام الجليدي والمحرك.استعدادا للتخزين ، قم بتغطية الوعاء بورق الألمنيوم ، وانقل المحلول إلى الثلاجة للتخزين عند أربع درجات مئوية طوال الليل قبل استخدامه. بعد استرداد محلول العينة ، قم بإعداده للاستخدام مع المجهر. جهز شريحتين للتجويف ، وغطاءين زجاجيين دائريين ، وغراء مناسب ، من أجل عمل عينة وشريحة مرجعية قياسية.بالنسبة لشريحة العينة ، قم بقياس 60 ميكرولترا من محلول العينة. ضع المحلول في إحدى شرائح التجويف. قم بتغطية المحلول بغطاء دائري ، مع الحرص على عدم حبس فقاعات الهواء.قم بإزالة المحلول الزائد باستخدام مبيبت دقيق ومناديل معملية. ثم ضع الغراء على محيط الغطاء لإغلاق شريحة المحلول. بعد ذلك ، قم بإنشاء مرجع قياسي.لهذا ، استخدم محلول لاتكس البوليسترين بنسبة 0.1 بالمائة. في شريحة التجويف الثانية ، أضف 60 ميكرولترا من محلول لاتكس البوليسترين ، وقم بتغطيته بغطاء زجاجي ، وتأكد من عدم احتجاز الفقاعات. بعد إزالة أي محلول زائد ، ضع الغراء لإغلاق المحلول في الشريحة.لكلتا الشريحتين ، اترك الغراء يجف في درجة حرارة الغرفة. في هذه المرحلة ، خذ الشريحة المرجعية إلى المجهر المقلوب المجهز بعدسة موضوعية 10 مرات ، وضعها على مرحلة المجهر. يجب أن يكون زجاج الغطاء متجها لأسفل.استمر بوضع مخمد شعاع أمام الكاشف. بعد ذلك ، قم بتطبيق شعاع الليزر على العينة من خلال العدسة الشيئية. انتقل إلى العمل مع العدسة الموضوعية.اضبط ارتفاع العدسة لضبط النقطة المحورية. عند النظر إليها باستخدام CCD ، عندما يرتفع الهدف من أدنى موضع له ، ستركز الصورة المنعكسة أولا على سطح زجاج الغطاء. سيركز بعد ذلك على الواجهة بين زجاج الغطاء والعينة.سيركز مرة ثالثة على الواجهة بين العينة والزجاج المنزلق. قم بتعيين النقطة المحورية بين واجهة نموذج الغلاف وواجهة شريحة العينة. خفف الضوء المتناثر عن طريق تقليل طاقة الليزر.ثم قم بإزالة كتلة الشعاع لإدخال ضوء متناثر في الكاشف. عندما تكون جاهزا ، ابدأ قياس الارتباط الزمني لمدة 30 ثانية عبر كمبيوتر التحكم. بعد ذلك ، اضبط النقطة المحورية للمجهر قبل تكرار القياس.استخدم عدة نقاط محورية للحصول على نطاق واسع للسعة الأولية لوظيفة الارتباط الزمني. عندما يتم جمع بيانات كافية ، ضع مخمد شعاع أمام الكاشف. في المجهر، قم بإزالة الشريحة المرجعية القياسية.ابدأ عملية قياس العينة بمرحلة مجهر فارغ واضبط درجة الحرارة على 25 درجة مئوية. بعد ذلك ، ضع شريحة العينة المعدة على المسرح مع وضع جانب الغطاء لأسفل. اضبط ارتفاع العدسة الموضوعية لتحديد واجهة عينة الغطاء.اضبطه بشكل أكبر للعثور على واجهة الشريحة النموذجية. للقياس ، قم بتعيين النقطة المحورية بين هذين الموضعين. قم بإزالة مخمد الشعاع من أمام الكاشف.في الكمبيوتر ، قم بإجراء قياس ارتباط لمدة 30 ثانية. بعد ذلك ، اضبط درجة حرارة المرحلة على 35 درجة مئوية. نظرا لأن هذا المعتدل أعلى من درجة حرارة المحلول الحرجة المنخفضة ، فإن المحلول سينتقل من صاف إلى عكر.قم بإجراء قياس آخر لوظيفة الارتباط الزمني. فيما يلي وظائف الارتباط الزمني لمعيار تعليق البوليسترين اللاتكس في نقطتين محوريتين مختلفتين. يتوافق المنحنى الأحمر مع دالة ارتباط الوقت التي يكون اتساعها الأولي واحدا تقريبا.يتوافق المنحنى الأزرق مع السعة الأولية البالغة حوالي 0.2. هذا هو توزيع الحجم الذي تم الحصول عليه عن طريق تحويل لابلاس العكسي للبيانات بسعة أولية تبلغ 0.2. يأخذ الحساب في الاعتبار تأثير التغاير الجزئي.نصف قطر الجسيمات الاسمي هو 50 نانومتر. وظائف الارتباط الزمني هذه مخصصة للبولي (NIPA) أسفل وأعلى من درجة حرارة المحلول الحرجة المنخفضة. يتوافق المنحنى الأسود مع قياس عند 25 درجة مئوية.يتوافق المنحنى الأحمر مع قياس عند 35 درجة مئوية ، وبعد أن يصبح المحلول عكرا مباشرة. المنحنى الأزرق مخصص للقياس عند 35 درجة مئوية ، بعد 20 دقيقة من أن يصبح المحلول عكرا. فيما يلي توزيعات الحجم المرتبطة بكل حالة من شروط القياس.تحت درجة حرارة المحلول الحرجة المنخفضة ، يبلغ متوسط نصف القطر الهيدروديناميكي عدة أعشار النانومتر. فوق درجة الحرارة الحرجة ، يبلغ الحجم حوالي 1 ميكرومتر. يشير التحول في المنحنيات مع الاعتدال والوقت إلى نمو التجميع.

measurement-particle-size-distribution-turbid-solutions-dynamic-light

Research

JoVE Journal

Chemistry

الكيمياء

يصف هذا بروتوكول طريقة قذف لإعداد الحويصلات الدهون من دون ميكرون الأحجام مع وجود درجة عالية من التجانس. هذا الأسلوب يستخدم نظام الضغط التي تسيطر عليها مع تسيطر عليها معدلات تدفق النيتروجين لإعداد الحويصلية. ودهن...

ثابت الطريقة النتوء الضغط التي تسيطر عليها لإعداد الحويصلات الدهن نانو الحجم

Source: Moore, M. D., et al. Alternative In Vitro Methods for the Determination of Viral Capsid Structural Integrity. J. Vis. Exp. (2017)The video demonstrates a protocol for monitoring the heat-induced aggregation of virus-like particles using dynamic light scattering (DLS). It begins with preparing a monodisperse suspension of purified particles. The sample is then loaded into a preheated DLS instrument. As the capsid proteins denature with heat, exposed hydrophobic regions cause particle...

Tracking Aggregation of Virus-Like Particles Using Dynamic Light Scattering

يتم تقديم طريقة لعزل الإكسوسومات من الدم الكامل ومزيد من التحليل عن طريق تتبع الجسيمات النانوية باستخدام أداة شبه آلية في هذه المقالة. توفر التكنولوجيا المقدمة طريقة حساسة للغاية لتصور وتحليل الجسيمات في التعليق السائل.

طريقة مبتكرة لExosome الكمي وقياس الحجم

وتنص غير أثار-البلمرة هطول نهج النماذج قابلة للتكرار السريع لتركيب المحفزات الحساسة بولي (N -isopropylacrylamide) microgels من توزيع حجم الضيق. في هذا التوليف البروتوكول، وقد أثبت ضوء توصيف نثر واحدة تتبع الجسيمات مضان من هذه microgels في إعداد المجهر واسعة المجال.

التجميعي للرقابة وتتبع الإسفار بولي الموحد عالية (<em&gt; N</em&gt; -isopropylacrylamide) Microgels

هنا، نحن نقدم بروتوكول تدريجي تشتت المواد متناهية الصغر في الوسط المائي مع الوصف في الوقت الحقيقي تحديد شروط sonication الأمثل، وكثافة، ومدة لتحسين الاستقرار وتوحيد نانوحبيبات تشتت دون التأثير على سلامة العينة.

تشتت من المواد النانوية في الوسط المائي: نحو التحسين البروتوكول

ويصف هذا البروتوكول توليف الجزيئات المغناطيسية وتقييم خصائصها ربط الحمض النووي عن طريق نثر الضوء الديناميكي والغرواني الكهربي. يركز هذا الأسلوب على رصد التغيرات في حجم الجسيمات، وعلى بوليديسبيرسيتي والرئيسية إمكانات زيتا لسطح الجسيمات التي تلعب دور في ملزمة لمواد مثل الحمض الريبي النووي.

الحمض النووي-المغناطيسي الجسيمات ربط التحليل بتشتت الضوء الديناميكي والغرواني الكهربي

هنا ، يتم تقديم بروتوكول لتطبيق الجهد على الحل أثناء قياسات حجم الجسيمات المبعثرة للضوء الديناميكي بهدف استكشاف تأثير التغيرات في الجهد ودرجة الحرارة على تجميع البوليمر.

تطبيق الجهد في الضوء الديناميكي التشتت تحليل حجم الجسيمات

نحن نقدم بروتوكولات وبيانات تمثيلية لتصميم وتجميع وتوصيف micelles المعقدة polyelectrolyte ، والجسيمات النانوية الأساسية قذيفة التي شكلتها polyelectrolytes وهيدروفيلية مشحونة كتلة copolymers.

تجميع وتوصيف Micelles مجمع البولي كتروليت

نحن نبين كيفية استخدام أداة جديدة لتحليل تتبع الجسيمات النانوية لتقدير توزيع الحجم والتركيز الكلي للجسيمات الحويصلات خارج الخلية المعزولة عن الأنسجة الدهنية perigonadal الماوس والبلازما البشرية.

تحليل تتبع الجسيمات النانوية لتحديد كمي وحجم الحويصلات خارج الخلية

برز تشتت الضوء الديناميكي (DLS) كاختبار مناسب لتقييم حجم الجسيمات وتوزيع مجمعات الكربوهيدرات الحديدية التي يتم إعطاؤها عن طريق الوريد. ومع ذلك ، تفتقر البروتوكولات إلى التوحيد وتحتاج إلى تعديل لكل مركب من الحديد والكربوهيدرات يتم تحليله. يصف هذا البروتوكول التطبيق والاعتبارات الخاصة لتحليل سكروز الحديد.

تحليل تشتت الضوء الديناميكي لتحديد حجم الجسيمات لمجمعات الحديد والكربوهيدرات

يجمع الفحص المجهري الديناميكي التفاضلي (DDM) بين ميزات تشتت الضوء الديناميكي والفحص المجهري. هنا ، يتم عرض عملية استخدام DDM لتوصيف شبكات الهيكل الخلوي المعاد تشكيلها عن طريق تحديد الديناميكيات تحت الانتشار والمحبوسة للجسيمات في شبكات vimentin والحركة الباليستية لمركبات الأكتين - microtubule النشطة التي يحركها الميوسين.

تحديد ديناميكيات الهيكل الخلوي باستخدام المجهر الديناميكي التفاضلي

تعلم قياس توزيع حجم الجسيمات في المحاليل العكرة باستخدام مجهر التشتت الضوئي الديناميكي. تتيح هذه الطريقة تحليل العينات المركزة دون تخفيفها مع الحفاظ على تركيزها الأصلي.

قياس توزيع حجم الجسيمات في عكر حلول كتبها الإنارة الديناميكي التشتت المجهر

استكشف المزيد من الفيديوهات