نموذج الماوس لزرع البنكرياس باستخدام تقنية تعديل الكفة

اسمي بينو كارديني ، من مختبر أبحاث دانيال سواروفسكي التابع لقسم جراحة الأحشاء وزرع الأعضاء والصدر بجامعة إنسبروك الطبية. اليوم ، سوف نعرض لك نموذج فأر لزراعة البنكرياس باستخدام تقنية الكفة المعدلة. تخدير المتبرع بحقن داخل الصفاق من الكيتامين والزيلازين ، وحلق منطقة البطن.

ثم ضع المتلقي في حقل جراحي في وضع ضعيف ، وافرك المنطقة الجراحية ثلاث مرات باستخدام الكلورهيكسيدين. الآن ، قم بإجراء شق البطن في خط الوسط من منطقة العانة إلى الخنجري وقم بتوسيع الشق دون الcostly إلى كلا الجانبين للحصول على رؤية أفضل في مجال الجراحة. ثم قم بإخراج الأحشاء إلى الجانب الأيسر ، وحقن الهيبارين في الوريد الأجوف تحت الكلى.

في الخطوة التالية ، حدد الشريان الأورطي البطني القريب من عبور الوريد الكلوي الأيسر ، وتقويض الشريان الأورطي ، واربطه في تلك المرحلة. الآن ، انتقل إلى نقير الكبد ، وحدد وقم بتشريح القناة الصفراوية المشتركة بالقرب من الكبد ، وربطها بالقرب من البنكرياس. أخيرا ، قم بتمرير القناة الصفراوية المشتركة فوق الرباط.

بعد ذلك ، قم بتشريح الوريد البابي بالقرب من الكبد لتحقيق طول كاف للمفاغرة الوريدية. كنصيحة ، اترك قطعة صغيرة من الكبد على الوريد البابي لتسهيل التعرف عليها لاحقا. بعد ذلك ، قم بتقويض الوريد الكلوي الأيسر في الأنسجة حول الأبهر وربطه.

ثم يعبر الوريد الكلوي والأنسجة حول الأبهر ، ويبقى على الجانب الأيمن من الرباط. بعد ذلك ، قم بتشريح الشريان الأورطي البطني بصراحة من جذع الاضطرابات الهضمية إلى الحجاب الحاجز ، وقم بتقويض الشريان الأورطي القريب من الحجاب الحاجز وقم بتقطيعه في تلك المرحلة. بعد ذلك ، حدد جميع الفروع القطنية وتخثرها وقم بعرضها.

الآن قم بعرض الشريان الأورطي تحت الرباط المحدد مسبقا. الآن قم ببث البنكرياس عبر رقعة الأبهر بمحلول نضح مثلج حتى ترى النفايات السائلة تخرج من الوريد البابي. في الجزء العلوي ، يمكنك رؤية الوريد البابي المنفوخ وأسفل الشريان الأورطي المنفوخ.

الآن استبدل الأحشاء في التجويف البريتوني وافصل البنكرياس خطوة بخطوة عن الأمعاء باستخدام 8-0 أربطة الحرير. بدءا من منطقة ما بعد الثورة ، قم بتقويض الاثني عشر مرتين وسحب 8-0 أربطة الحرير من خلاله. ثم اربطه وافصل البنكرياس عن الاثني عشر بحدة.

يتم تنفيذ هذا النهج بشكل متكرر حتى الوصول إلى رباط Treitz. من الضروري عدم إتلاف الاثني عشر لأنه سيستبعد الكسب غير المشروع من التجارب بسبب التلوث المحتمل. بعد فصل البنكرياس تماما عن الاثني عشر ، انتقل إلى المساريق ، وقم بتقويضه وربطه ثم عبره.

قياسا على الخطوات السابقة ، افصل البنكرياس عن القولون المستعرض عن طريق تقويضه وربطه وأخيرا عبره. الآن باستخدام نفس النهج ، افصل البنكرياس عن المنطقة الصفراوية عن طريق تشريحه بحدة بعد الربط. بعد ذلك ، قم بتشريح البنكرياس بصراحة من المعدة.

تحديد الشريان المعدي الأيسر وربطه وتمريره. في النهاية ، قم بإزالة البنكرياس مع الطحال المرفق وضعه في محلول إعادة التروية المثلج حتى مزيد من الزرع. استخدم الطحال كمقبض.

قياسا على المتبرع ، قم بتخدير المتلقي بحقن داخل الصفاق من الكيتامين والزيلازين وحلق منطقة عنق الرحم. بعد ذلك ، ضع المتبرع في حقل الجراحة في وضع ضعيف وافرك منطقة عنق الرحم ثلاث مرات باستخدام الكلورهيكسيدين. بعد ذلك ، قم بإجراء شق جلدي من شق الوداجي إلى زاوية الفك السفلي اليمنى.

بعد ذلك ، حدد جميع الفروع الجانبية للوريد الوداجي الخارجي الأيمن ، وقم بتعبئتها وتقويضها وتقسيمها بعد التخثر ثنائي القطب. بعد ذلك ، أمسك القطب السفلي للغدة تحت الفك السفلي اليمنى ، وارفعه في الجمجمة وقم بتشريحه بعد التخثر ثنائي القطب لأوعية التغذية الخاصة به. الآن قم بتمرير جميع الفروع الإنسية للوريد الوداجي الخارجي الأيمن بعد التخثر ثنائي القطب.

اربط الوريد الوداجي الخارجي مرتين في الجمجمة قدر الإمكان وقسمه بين الأربطة. مرر الطرف القريب من الوريد الوداجي الخارجي من خلال صفعة من البولي إيثيلين. من المهم هنا أن يواجه مقبض الكفة جراح العملية.

كخطوة تالية ، ضع المشبك الوريدي الوعائي الدقيق القادم من الجانب الجانبي. الآن بلل الوريد بالهيبارين ، وقم بإزالة الرباط واسحب الوريد برفق فوق صفعة البولي إيثيلين. في النهاية ، قم بتثبيت الوريد فوق الكفة بدائري 8-0 أربطة حريرية مع عقدة واحدة في الخلف وثلاثة في الأمام.

للوصول إلى الشريان السباتي المشترك الأيمن، قم بتعبئة العضلة القصية الترقوية الخشائية اليمنى وعرضها بعد التخثر القريب والبعيد. بعد ذلك ، قم بتعبئة الشريان السباتي المشترك برفق ، مع الحرص على عدم الإضرار بالهياكل المجاورة مثل العصب المبهم. قياسا على الوريد ، اربط الشريان السباتي المشترك مرتين ، بأكبر قدر ممكن من الجمجمة ، وقسمه بين الأربطة.

الآن مرر الوعاء عبر الكفة الشريانية. أخيرا ، قم بإصلاح الكفة الشريانية بمشبك الأوعية الدموية الدقيقة ، القادم من الجانب الإنسي. بعد ذلك ، قم بإزالة الرباط وتوسيع تجويف الشريان باستخدام موسعات الأوعية الدموية.

بعد الاتساع الكافي للتجويف ، اسحب الشريان فوق الكفة الشريانية. في النهاية ، قياسا على الوريد ، قم بإصلاح الشريان ب 8-0 أربطة الحرير. هنا يمكنك رؤية الوريد والشريان الذي تم إصلاحه للمفاغرة الوريدية الشريانية.

للزرع ، ضع الكسب غير المشروع على آس مبلل في منطقة عنق الرحم. ثم اسحب الوريد البابي من خلال 8-0 حلقة الرباط الحريري ، قم بتقصير الوريد للحصول على مفاغرة خالية من التوتر ثم اسحب الوريد البابي فوق الكفة الوريدية. أخيرا ، قم بإصلاح الوريد بدائري 8-0 أربطة الحرير.

قياسا على الوريد ، مرر جذع الأبهر عبر حلقة الرباط وتقصير الشريان الأورطي. بعد ذلك ، اسحب الشريان الأورطي فوق الكفة الشريانية وقم بإصلاحه أخيرا بدائري 8-0 أربطة الحرير. قبل إعادة التروية ، حدد أوعية الطحال وربطها وأخيرا قم بتشريحها بشكل حاد وإزالة الطحال.

لإعادة التروية ، قم أولا بإزالة المشبك الوريدي ، متبوعا بالمشبك الشرياني. تظهر إعادة التروية الكافية للطعم نبضا مرئيا للشريان ولون وردي للطعم بأكمله. بلل الكسب غير المشروع بمحلول ملحي طبيعي حراري.

قبل إغلاق الجرح ، قم بإزالة مقبض الكفة الوريدية لتجنب التواء الوعاء. في النهاية ، أغلق الجرح بخياطة 6-0 وحقن 0.5 مل من محلول ملحي طبيعي تحت الجلد. للتحقق من صحة النموذج ، اختبرنا وظيفة الغدد الصماء للبنكرياس المزروع.

أصبحت الفئران تعاني من نقص السكر في الدم عن طريق المعالجة المسبقة بالستربتوزوتوسين قبل أربعة أيام من الجراحة واعتبرت منخفضة السكر في الدم إذا كانت مستويات الجلوكوز في الدم أعلى من 300 ملليغرام بالمائة. تظهر هذه اللقطة الخطية مستويات الجلوكوز في الدم للفئران الحية غير المزروعة باللون الأحمر ، وكذلك متلقي الطعوم التي لم تتعرض لوقت نقص تروية البرد لفترات طويلة باللون الأزرق. بالإضافة إلى ذلك ، تظهر مستويات الجلوكوز في الدم لدى متلقي ترقيع البنكرياس المعرضين لوقت نقص التروية الباردة لمدة 16 ساعة باللون الأخضر.

ظلت الفئران الحية تعاني من نقص السكر في الدم طوال فترة المراقبة. في المقابل ، أدى زرع ترقيع البنكرياس الذي لم يتعرض لوقت نقص تروية البرد الطويل إلى نسبة السكر في الدم الطبيعية في غضون 24 ساعة ، مما يؤكد وظيفة الغدد الصماء للطعم. لم يؤد زرع الطعوم المعرضة لوقت نقص التروية البارد لمدة 16 ساعة إلى استعادة نسبة السكر في الدم الطبيعية للمتلقين.

علاوة على ذلك ، في هذه المجموعة ، كان لا بد من التضحية بجميع الفئران في غضون 48 ساعة بسبب إصابة نقص التروية المرتبطة بتلف الكسب غير المشروع المبكر. في هذا الفيديو قدمنا طريقة لزراعة البنكرياس في الفئران باستخدام تقنية الكفة غير الخياطة. هذا ممكن تقنيا وجراحيا مع معدلات نجاح ممتازة.

ومع ذلك ، نظرا للتليف التدريجي للبنكرياس ، بسبب انسداد القناة ، فإننا نرى أن هذا النموذج هو الأنسب لمجالات البحث التي تركز على تلف الكسب غير المشروع المرتبط بإصابة نقص التروية في وقت مبكر.