تصميم تجريبي ليزر تسليخ مجهري RNA تسلسل: دروس من تحليل التنمية الذرة ورقة

الهدف العام لهذه الطريقة هو تحديد تراكم النسخ في خلايا أو مجالات خلوية معينة بحيث يمكن إجراء مقارنات بين مجالات مختلفة أو بين المجالات المكافئة في عينات النوع الطافرة والبرية. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في علم الأحياء التنموي مثل كيفية تحديد مجالات الأعضاء أو كيف تؤثر الطفرات المحددة على التعبير الجيني. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن قياس تراكم النسخ في مجالات دقيقة ومحددة بدقة وصغيرة جدا بحيث لا يمكن تشريحها يدويا.

قبل البدء في هذا الإجراء ، قم بزراعة مسطحات شتلات الذرة في ظل ظروف قياسية حتى عمر أسبوعين. لتشريح قمم البراعم للأقسام الجانبية ، قم أولا باستئصال الشتلات أسفل خط التربة مباشرة. ثم استخدم شفرة حلاقة لإزالة شرائح رفيعة من قاعدة الساق حتى يظهر شكل بيضاوي من الهدوء محاط بورقة أو ورقتين ناضجتين.