جراحة التحويلة، الحق القلب قسطرة، والأوعية الدموية القياس الشكلي في الفأر نموذج لالناجم عن تدفق-الرئوي الشرياني ارتفاع ضغط الدم

تتمثل الأهداف العامة لهذه الإجراءات في إنشاء نموذج لارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي الناجم عن التدفق في الفئران ، وتحليل نقاط النهاية الديناميكية الدموية والنسيجية عن طريق قسطرة القلب الأيمن وقياس مورفوميتر الأوعية الدموية. نقدم إنشاء نموذج الفئران لارتفاع ضغط الدم الرئوي المرتبط بالتدفق والذي يتميز بإعادة تشكيل الأوعية الدموية من النوع الحميمي الجديد على غرار ارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي البشري ، والذي يسببه محفز معترف به سريريا جيدا ، وهو زيادة تدفق الدم الرئوي. ستعزز هذه الخصائص ترجمة النتائج الواردة في هذا النموذج إلى المرض البشري.

نعرض أيضا طرقا موحدة لتقييم ديناميكية الدم وتوصيف علم الأنسجة المرضية باستخدام التشكل الكمي. تمتد الآثار المترتبة على هذه التقنيات نحو اكتشاف وتقييم استراتيجيات العلاج الجديدة وتسمح بتقييم التأثيرات المحددة على ديناميكا الدم الرئوية ومورفولوجيا الأوعية الدموية. سيوضح الإجراءات Annemieke Smit-Van Oosten و Michel Weij ، الجراحين المجهريان من هذا المختبر.

قبل البدء في الجراحة ، افرك جلد الفئران المخدرة باستخدام هيكسادين الكلوريد للتطهير وحقن البوبرينورفين تحت الجلد لتسكين الألم بعد الجراحة. بعد ذلك ، استخدم المقص لعمل شق خط الوسط على طول البطن ، بدءا من سنتيمتر واحد أسفل الحجاب الحاجز ، ويمتد إلى أعلى الأعضاء التناسلية مباشرة. انقل الأمعاء إلى شاش معقم مبلل بنسبة 0.9٪ محلول ملحي إلى الجانب الأيسر من وقم بتغطية العضو بشاش أكثر رطوبة ومعقمة.

استخدم مسحات جديدة لفصل الأغشية التي تربط الشريان الأورطي البطني والوريد الأجوف السفلي من الأنسجة المحيطة. تحت مجهر تشريح ، استخدم ملقطا منظيا لإزالة الدهون الأبهرية حول الأوعية الدموية فوق التشعب مباشرة على الجانب الأيمن من الشريان الأورطي حيث سيتم إدخال الإبرة. بعد ذلك ، افصل الشريان الأورطي والوريد الأجوف عن ملليمترين أعلى من الموقع ، موقع إدخال الإبرة ، لتوفير مساحة لمشبك العارض.

الآن ضع خياطة فضفاضة 5-O حول الشريان الأورطي وضع مشبك Kocher على الخيط لخلق شد على الرباط فوق الشق. ضع مشبك العارض أعلى من الخيط ، واستخدم مقايضة جديدة لضغط الوريد الأجوف بعيدا قدر الإمكان لإعاقة التدفق. بعد ذلك ، قم بثني إبرة قياس 18 بزاوية 45 درجة مع وضع الشطبة للخارج ، مع إمساك الإبرة 90 درجة للحيوان ، وأدخل طرف الإبرة في الشريان الأورطي فوق التشعب مباشرة مع مواجهة الشطبة إلى اليسار.

قم بتشريح الأغشية المحيطة بالشريان الأورطي والوريد الأجوف بما يكفي لخلق رؤية جيدة لمنطقة إدخال التحويلة ، حيث سيؤدي التشريح المفرط إلى تسرب التحويلة. قم بمعالجة طرف الإبرة إلى اليسار وأدخل الإبرة في الوريد الأجوف حتى يمكن ملاحظتها داخل الوعاء. للوقاية من تجلط الدم، استخدم قطعة قطن جديدة لدفع الدم المتبقي من الشريان الأورطي عبر موقع الإدخال واستخدم شاشا معقما لتجفيف المنطقة المحيطة بالتحويلة.

قم بإزالة الإبرة وقم بتطبيق قطرة من غراء الأنسجة على الفور على موقع البزل. ثم قم بإزالة المشبك من الشريان الأورطي وحرر الرباط يدويا على الشريان الأورطي إلى التحويلة. يجب أن يصبح الوريد الأجوف البعيد عن التحويلة أحمر فاتحا ويخلق اضطرابا في موقع التحويلة.

بعد التحقق من التحويلة ، أعد الأمعاء إلى تجويف البطن واستخدم خيوط قابلة للامتصاص 4-0 لإغلاق طبقات العضلات والجلد. ثم قم بتهوية ب 100٪ أكسجين لاستعادة التخدير. لقسطرة القلب الأيمن، قم بتطهير الرقبة باستخدام سداسي الكلوريد واستخدم شفرة مشرط رقم 10 لعمل شق بطول 1.5 سم في الجانب البطني الأيمن من الرقبة من عظم الترقوة الأيمن إلى عظم الفك السفلي.

تحت مجهر التشريح ، استخدم المقص لنشر الأنسجة ، ثم استخدم الملقط لفصل الأنسجة برفق حتى يظهر الوريد الوداجي. قم بتشريح الأغشية حول الوريد الوداجي باستخدام ملقط منشق. ثم ضع خياطة 5-O فضفاضة حول الوعاء وقم بلصق الرباط بقناع التهوية لزيادة التوتر على الوريد.

في اتجاه مجرى موقع الإدخال ، ضع رباط فضفاض حول الوعاء. بعد ذلك ، استخدم مقابض الملقط لثني طرف إبرة قياس 20 قليلا مع توجيه الشطبة إلى الداخل وإدخال طرف الإبرة في الوريد. ضع قنية تحتوي على قسطرة داخل الوعاء بسرعة وقم بإزالة الإبرة ، وأغلق الرباط السفلي حول القنية لتثبيت القنية في مكانها.

الآن قم بتوصيل القنية والقسطرة في الوريد الوداجي ، مع مناورة القنية تحت عظم الترقوة لدخول الأذين الأيمن. وجه طرف القنية نحو القلب لدخول البطين الأيمن. يجب أن يظهر منحنى ضغط البطين الأيمن على شاشة السرير.

عندما يكون منحنى ضغط البطين الأيمن ثابتا ، سجل ضغط البطين الأيمن الانقباضي والانبساطي ، وقم بمعالجة طرف القنية إلى اليسار وإلى الأعلى. ادفع القسطرة داخل القنية، ثم ادفع القسطرة إلى الشريان الرئوي الرئيسي. عندما يكون منحنى ضغط الشريان الرئوي ثابتا ، سجل الانقباضي والانبساطي ومتوسط ضغط الشريان الرئوي.

ثم قم بدفع القسطرة داخل القنية حتى تصبح الكرة الموجودة في طرف القسطرة مثبتة في الشريان الرئوي. يجب ملاحظة الانخفاض في منحنى الضغط على شاشة السرير. عندما يكون منحنى ضغط الإسفين ثابتا ، سجل ضغوط الوتد الانقباضي والانبساطي ومتوسط.

ثم اسحب القسطرة ببطء للخلف ، واسترشادا بالمنحنيات الموجودة على شاشة السرير ، وسجل القيم الخاصة بضغط PA و RV. عندما تصل القسطرة إلى البطين الأيمن، اسحب القنية والقسطرة للخلف قليلا وقم بقياس متوسط الضغط الأذيني الأيمن. في هذه التجربة التمثيلية ، بعد 28 يوما من إعطاء MCT وزيادة تدفق الدم الرئوي ، لوحظ ارتفاع متوسط في البطن الأيمن الانقباضي ، والشريان الرئوي الانقباضي ، ومتوسط ضغط الشريان الرئوي.

تزداد نسب وزن البطين الأيمن إلى البطين الأيسر والحاجز بشكل ملحوظ من اليوم 14 بعد العلاج حتى مرحلة فشل البطين الأيمن ، مما يشير إلى تضخم البطين الأيمن. تزداد نسبة الكبد الرطب إلى الجاف بشكل كبير في مرحلة فشل البطين الأيمن ، مما يشير إلى وذمة الكبد ، وكذلك فشل البطين الأيمن الاحتقاني. يزداد العضلات في الأوعية بين الأسينار تدريجيا أثناء تطور ارتفاع ضغط الدم في الشريان الرئوي مع ما يقرب من نصف الأوعية تظهر الوسائط العضلية الكلية بحلول اليوم 14 بعد العلاج في جميع الشرايين العضلية تقريبا في المرحلة النهائية من المرض.

علاوة على ذلك ، لوحظت الآفات الحميمة الجديدة لأول مرة في اليوم 21 مع ما يقرب من 65٪ من جميع الشرايين تظهر طبقة حميمة جديدة بنهاية تطور المرض. ينتج عن هذا انسداد الأوعية الدموية التدريجي مع انسداد ما يصل إلى 60٪ من التجويف في المرحلة النهائية من المرض. بمجرد إتقان هذه التقنيات ، يمكن أن تكتمل هذه التقنيات في 20 دقيقة لكل تقنية.

بعد هذا الإجراء ، يمكن إجراء طرق أخرى مثل تخطيط صدى القلب أو تكرار حجم الضغط للإجابة على أسئلة إضافية حول وظيفة البطين الأيمن. بعد تطويرها ، تمهد هذه التقنية الطريق للباحثين في مجال ارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي لاستكشاف آثار زيادة تدفق الدم على الأوعية الدموية الرئوية. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إنشاء نموذج لارتفاع ضغط الدم الشرياني الرئوي الناجم عن التدفق في الفئران ، وكيفية تحليل نقاط النهاية الديناميكية الدموية والنسيجية الأساسية.