مارس 15, 2017
وكثيرا ما تستهدف تقييم المبيدات الحشرية ضد الحشرات البالغة، بدلا من المراحل غير ناضجة. هنا، نقدم بروتوكول لتقييم المبيدات الحشرية ضد البيض بق الفراش مع مقارنة لأول الحورية مرحلة بق الفراش. يمكن تعديل هذه البروتوكولات للحشرات أخرى لتقييم فعالية المبيدات الحشرية في مراحل الحياة غير البالغين.
الهدف العام من هذه التجربة هو تقييم فعالية المبيدات الحشرية في قتل بيض بق الفراش والأطوار الأولى. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال علم الحشرات ، مثل تأثيرات المقايسات السمية على بيض بق الفراش والحوريات الصغيرة. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها مصممة لعلاج مرحلة حياة الحشرات الصعبة بالمبيدات الحشرية ، وخاصة مرحلة البيض.
لبدء التجربة ، اسحب خمسة إلى 10 إناث بق الفراش البالغة المتزاوجة جيدا من مستعمرة وضع الإناث في طبق بتري بورق ترشيح. قم بإعداد 10 مكررات للتأكد من وجود بيض كاف لفحص المبيدات الحشرية. تحقق من الأطباق كل يوم لمعرفة ما إذا كانت الإناث قد وضعت البيض.
بمجرد أن تضع الإناث البيض ، أخرج الإناث من طبق بتري وضعها في أطباق بتري جديدة بورق ترشيح جديد يوميا. سجل البيانات على أطباق بتري القديمة والجديدة. اترك البيض يتقدم في العمر من أربعة إلى خمسة أيام قبل بدء الفحص.
بمجرد أن يتقدم البيض في العمر بشكل مناسب ، قم بإزالة بيض بق الفراش برفق من أوراق الترشيح باستخدام ملقط ناعم الرؤوس. اكشط قاع البيضة المرفقة بورق الترشيح برفق باستخدام الملقط ثم أمسك البيضة برفق دون الضغط الشديد لتجنب رمي بيض بق الفراش. ضع بيض بق الفراش الذي تمت إزالته في مجموعاته داخل أطباق بتري البلاستيكية.
افركي الجزء السفلي من كل طبق بتري من الخارج بورقة منعم للأقمشة للحد من الكهرباء الساكنة من قذف بيض بق الفراش. بعد ذلك ، قم بإعداد تخفيفات متسلسلة من المبيدات الحشرية للحصول على مجموعة من خمسة تركيزات مختلفة ومحلول تحكم بماء الصنبور فقط لكل منها بحجم 20 مل. خذ 50 مل من أنابيب الطرد المركزي مقطوعة مسبقا عند خط مل ثم قم بتقطيع شبكة دقيقة إلى مربعات كبيرة بما يكفي لتناسب الغطاء.
قم بربط الشبكة بإحكام ، مما يزيل أي نتوءات في أنابيب الطرد المركزي باستخدام غطاء أنبوب الطرد المركزي. بعد ذلك ، باستخدام فرشاة الرسم ، ضع مجموعة من بيض بق الفراش على الشبكة داخل أنبوب الطرد المركزي. اغمس مجموعة بيض بق الفراش داخل أنبوب الطرد المركزي المقطوع في تركيز مبيد حشري لمدة خمس ثوان.
قم بإزالة أنبوب الطرد المركزي من محلول المبيد الحشري. ضع أنبوب الطرد المركزي مباشرة على أنسجة المخاض لتجفيف الشبكة مع البيض بداخلها. بعد التجفيف ، قم بإزالة مجموعة البيض من أنبوب الطرد المركزي باستخدام فرشاة طلاء صغيرة ذات شعيرات ناعمة وضعها في طبق بتري نظيف بورق ترشيح نظيف.
سجل معدل نفوق البيض لمدة 14 يوما للتأكد من أن جميع البيض قد حان الوقت الكافي للفقس. تصحيح الوفيات في العلاج الضابط باستخدام صيغة أبوت. أدخل معدل الوفيات المسجل بالتركيزات المقابلة في برنامج التحليل لحساب قيم LC50.
افصل مجموعة من خمسة ذكور بالغين وخمس إناث بالغات تم إطعامهم في اليوم السابق وضعهم في طبق بتري بورق ترشيح. اسمح لبق الفراش البالغ بالتزاوج ووضع البيض لمدة ثمانية أيام. بعد ذلك ، قم بإزالة البالغين من أطباق بتري واترك البيض يفقس في الأطوار الأولى داخل أطباق بتري.
اجمع الأطوار الأولى غير المغذية من نفس العمر باستخدام فرشاة الرسم ، ثم ضعها في أطباق بتري نظيفة جديدة حتى فحص المبيدات الحشرية. Pipet 150 ميكرولتر من كل من المخففات الخمسة المعدة السابقة من المبيدات الحشرية والماء للمجموعة الضابطة على أوراق ترشيح فردية. قم بتوزيع المبيد الحشري بالتساوي عن طريق وضع قطرات حول حافة ووسط ورق الترشيح بالكامل.
ضع أوراق الترشيح المعالجة بشكل فردي فوق الألواح الصلبة الفردية. حرر مجموعات من الأطوار الأولى على أوراق الترشيح الفردية وهي لا تزال مبللة بالمبيدات الحشرية وقم بتغطية الأطوار الأولى بقاع طبق بتري مقلوب وضع وزنا فوق طبق بتري لمنع بق الفراش الأول من الهروب. سجل نفوق بق الفراش الأول بعد 24 ساعة من التعرض لجميع تركيزات المبيدات الحشرية.
تصحيح الوفيات في العلاج الضابط باستخدام صيغة أبوت. أدخل معدل الوفيات والتركيزات المسجلة في برنامج التحليل لحساب قيم LC50. زادت النسبة المئوية للاستجابة أو الوفيات لبيض بق الفراش من سلالة هارلين إلى خمسة تركيزات مختلفة من ميتوكلوبريد بيتا سيفلوثرين مع زيادة الجرعة.
وصلت الوفيات إلى 100٪ عند أعلى تركيز تم اختباره. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم أفضل لكيفية تقييم فعالية المبيدات الحشرية ضد بيض بق الفراش والأطوار الأولى.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
توضح هذه الدراسة بروتوكولاً لتقييم فعالية المبيدات الحشرية ضد بيض بق الفراش والمراحل الأولى. تهدف الطريقة إلى معالجة تحديات تقييم فعالية المبيدات الحشرية في مراحل الحياة غير البالغة، والتي غالبًا ما يتم تجاهلها في التقييمات التقليدية.
Evaluating insecticide efficacy across all life stages, including eggs and early instars, is critical for comprehensive pest control strategies in biopharma and public health R&D. This method enables quantitative assessment of toxicological impact on immature bed bug stages, supporting target validation and mechanistic de-risking in vector control programs. By generating concentration-response data and LC50 values for non-adult life stages, the approach improves predictive confidence in early-stage discovery and portfolio prioritization for novel insecticidal compounds.
The method integrates into the discovery continuum from early target validation through lead identification and preclinical evaluation, particularly for vector control and public health insecticide development.