تشخيص الرواية في مراجعة تقويم مفاصل: زرع Sonication ومتعدد تفاعل البوليميراز المتسلسل

الهدف العام من الإجراءات الموصوفة مع شفط المفاصل ، تفاعل البوليميراز المتسلسل متعدد الإرسال والصوتنة هو تقديم نتائج ميكروبيولوجية سريعة وموثوقة لجراحي العظام في حالات الاشتباه في عدوى المفصل المحيط بالأطراف الاصطناعية. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في المجال التشخيصي والعلاجي لعدوى المفصل المحيطة بالأطراف الاصطناعية ، مثل النتائج المبكرة لمسببات الأمراض ، وبالتالي العلاج الموجه المبكر. الميزة الرئيسية لهذه التقنيات هي تقديم نتائج سريعة.

يمكن أن يسرع التشخيص التفريقي في حالات الاشتباه في عدوى المفصل المحيط بالأطراف الاصطناعية. ضع المريض في وضع ضعيف على سرير الفحص. إذا كان سيتم ثقب الركبة ، ضع لفة الركبة تحت ركبة المريض بحيث تستقر الركبة في وضع مرن قليلا.

استخدم المقصات الكهربائية لتقصير شعر الجسم الكثيف أو الطويل. ثم قم بإعداد طاولة الأدوات واللباس للجراحة وفقا لبروتوكول النص. بعد ذلك ، استخدم مطهر للبشرة لغسل جلد المريض جيدا في موقع البزل.

باستخدام ستارة معقمة ، قم بتغطية موقع الثقب. ثم حدد موقع الثقب من خلال الستارة. باستخدام شفرة مشرط مدببة ، قم بعمل شق طعنة صغير عبر الجلد في موقع الشق.

اربط القنية بزلة اللور للحقنة. ثم أدخل القنية من خلال شق الطعنة. عند العطلة العلوية لمفصل الركبة ، استهدف زاوية 45 درجة ظهريا ووسطيا باتجاه التجويف ، أسفل القطب العلوي للرضفة ، وأدخل الإبرة على عمق حوالي 5 سم.

شفط سائل المفصل عن طريق سحب مكبس المحقنة. لمنع تكوين الأورام الدموية ، ضع ضمادة ، متبوعة بضمادة على شق الطعنة. استخدم مطهر كحولي لتطهير غشاء قارورة مزرعة دم الأطفال.

ثم ضع قنية جديدة على المحقنة وحقن 1 إلى 3 مل من سائل المفصل المستنشق في القارورة. تخلط عن طريق التحريك اللطيف أو التناوب لتحضير عينة شفط مفصل أصلية ، قم بإزالة القنية من المحقنة.

ثم افتح أنبوب جمع الدم بدون إضافات وحقن 1 مل من الشفط في أنبوب التجميع. استبدل الغطاء واربطه لتحليل PCR. انقل 1 إلى 4 مل من شفط المفصل إلى أنبوب جمع الدم يحتوي على EDTA لعدد الخلايا وتمايزها.

قم بإذابة أنبوب الخلط الرئيسي عن طريق وضعه في درجة حرارة الغرفة. انقل 180 مللي لتر من العينة التي تم جمعها إلى أنبوب العينة. أغلق أنبوب العينة بغطاء أنبوب العينة الذي يحتوي على بروتين كيناز K وجين تحكم داخلي لمراقبة جودة سير العمل بأكمله.

في قمرة القيادة ، افتح برنامج التشغيل عن طريق لمس الزر اختبار جديد في الزاوية اليسرى السفلية. استخدم شاشة اللمس لإدخال بيانات المريض أو عينة ID.To حدد العينة من القائمة المنسدلة ، واختر أولا خرطوشة ITI ، ثم جراحة العظام كوضع تطبيق ، وأخيرا ، حدد السائل الزليلي ، أو سائل الصوتنة كنوع العينة. ثم اضغط على زر البدء

امسح الرمز الشريطي الموجود أسفل أنبوب العينة. ثم أدخل أنبوب العينة في Lysator. بعد ذلك ، حدد العينة على شاشة قمرة القيادة لفتح أنبوب العينة من Lysator.

ثم قم بإزالة أنبوب العينة من Lysator وأغلق الغطاء العلوي ل Lysator. انقل أنبوب العينة إلى فتحة أنبوب العينة لخرطوشة PCR. ثم أدخل أنبوب المزيج الرئيسي المذاب في فتحة المزيج الرئيسية لخرطوشة PCR.

اتبع التعليمات الموجودة على شاشة قمرة القيادة لمسح خرطوشة PCR باستخدام المزيج الرئيسي وأنبوب العينة. أدخل خرطوشة PCR في فتحة الخرطوشة المشار إليها في المحلل. في شاشة اللمس في قمرة القيادة في الزاوية السفلية اليسرى، اختر الاختبارات النشطة، ثم اختر معرف العينة الصحيح لعرض نتائج الاختبار.

احفظ النتائج على ذاكرة الجهاز واطبعها أو تصديرها لمزيد من الرجوع إليها. تحدث إلى عالم الأحياء الدقيقة الخاص بك وأطلعه على تفاصيل الحالة ، حتى يكون مستعدا لتحليل العينات على الفور. تحت مقعد عمل تدفق الهواء الرقائقي ، افتح الحاوية البلاستيكية ، مع إمساك الطرف الاصطناعي المزروع مسبقا من غرفة العمليات وأضف محلول كلوريد الصوديوم المعقم بنسبة 0.9٪ حتى يتم تغطية الجسم الغريب المزروع سابقا بنسبة 80٪ على الأقل أغلق الحاوية البلاستيكية.

ثم هز الحاوية البلاستيكية أو تحريكها جيدا لمدة 30 ثانية. انقل الحاوية البلاستيكية إلى حمام الصوتنة. ثم تحقق من مستوى السوائل في الحمام.

قم بتقطيع العينة لمدة خمس دقائق ، بتردد 40 زائد أو ناقص 2 كيلو هرتز وكثافة طاقة 0.22 زائد أو ناقص 0.04 واط لكل سنتيمتر مربع. ثم هز العينة أو دوامها جيدا لمدة 30 ثانية. داخل مقعد التدفق الصفحي ، اجمع 50 مل من سائل الصوتنة وانقله إلى أنبوب معقم قبل إغلاق الأنبوب بإحكام.

لإنشاء سائل صوتنة مركز ، قم بالطرد المركزي للأنبوب عند 4200 مرة G لمدة 10 دقائق ، مع ترك حجم متبقي يبلغ 10 مل ، استخدم الماصة للتخلص من المادة الطافية المتبقية. أعد تعليق الحبيبات عن طريق سحب العينات والدوامة. تلقيح كل قارورة من وسائط الثقافة المناسبة مع 0.5 مل من سائل صوتنة مركزة.

تلقيح قارورة مزرعة دم الأطفال مع 2 مل من سائل صوتنة المركز كما هو موضح سابقا في هذا الفيديو. ثم نقل 1 مل من سائل صوتنة مركز إلى أنبوب معقم دون إضافات لتحليل تفاعل البوليميراز المتسلسل . نقل وسائط الاستزراع الملقحة إلى الحاضنة.

احتضان الثقافات لمدة 14 يوما وتحقق من النمو يوميا. تم اعتبار وجود عدوى حول المفصل الاصطناعي مثبتا عند وجود معيار رئيسي واحد أو ثلاثة على الأقل من خمسة معايير ثانوية. تشمل المعايير الرئيسية وجود ناسور أو اكتشاف مسببات الأمراض في عينتين ميكروبيولوجيتين منفصلتين.

تشمل المعايير الثانوية عدد الخلايا الإيجابي أو تمايز الخلايا الإيجابي في شفط المفصل ، و CRP الإيجابي ومعدل الترسيب في عينات الدم ، والأنسجة الإيجابية في عينات الأنسجة ، أو الكشف عن العامل الممرض في عينة ميكروبيولوجية واحدة فقط. أظهرت النتائج هنا حساسية معتدلة لتشخيص تفاعل البوليميراز المتسلسل لسائل صوتنة وشفط المفصل ، ولكن خصوصية قوية جدا بنسبة 100٪ كلما أظهر تفاعل البوليميراز المتسلسل نتيجة إيجابية في شفط المفصل أو سائل الصوتنة ، تم الكشف عن نفس العامل الممرض لاحقا في إحدى الثقافات الميكروبيولوجية التقليدية. لم يظهر تفاعل البوليميراز المتسلسل للعينات المختلفة من الحالات غير العدوى أي نتائج إيجابية كاذبة.

تفويت ستة من أصل 16 مسببات الأمراض الحقيقية في عينات سائل الصوتنة وخمسة من أصل 13 مسببات الأمراض من ثقافة السوائل المشتركة عن طريق اكتشاف تفاعل البوليميراز المتسلسل حددت تشخيصات تفاعل البوليميراز المتسلسل المدمجة لكل من المواد ، والشفط المشترك ، والسائل الصوتنة 12 من أصل 18 حالة عدوى بشكل صحيح. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تحسين مسار التشخيص الخاص بك في عدوى المفصل المحيط بالأطراف الاصطناعية.

يمكنك أن ترى كيف يجب على علماء الأحياء الدقيقة وجراحي العظام العمل معا عن كثب لتحسين التشخيص التفريقي قدر الإمكان. إذا تم إجراؤها بشكل صحيح ، فستحصل على نتائج قيمة سريريا من تفاعل البوليميراز المتسلسل متعدد الإرسال القائم على الخرطوشة في غضون خمس ساعات بعد شفط المفصل. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر العمل بشكل معقم خلال العملية برمتها.

لا تنس أن العمل مع عينات الأنسجة البشرية أو العينات الميكروبيولوجية يمكن أن يكون خطيرا للغاية. يجب دائما اتخاذ جميع الاحتياطات ، مثل معدات الحماية الشخصية ، أثناء تنفيذ هذا الإجراء.