تقييم تأثير المواد الكيميائية البيئية على عسل النحل التنمية من الفرد إلى مستعمرة مستوى

الهدف العام من هذه التجربة هو تقييم كيفية تأثير بقايا المبيدات الحشرية في البيئة على نحل العسل الفردي في الحالة الطبيعية لمستعمرات خلايا النحل. الميزة الرئيسية لهذه الطريقة هي أنها تقوم بمسح آثار المبيدات الحشرية أو الملوثات الأخرى ذات الأهمية على كل من نحل العسل الفردي والمستعمرات بأكملها. يعد العرض المرئي لهذه الطريقة أمرا بالغ الأهمية لأن التلاعب بالشرانق صعب لأنها هشة.

سيوضح الإجراء كو تشونغ يو ، طالب دكتوراه من مختبري. قبل التجربة ، قم بإطعام كل مستعمرة لترا من شراب السكر بنسبة 50٪. قم بتجديد خزان الطعام أسبوعيا ، وستحتوي المستعمرة الصحية على تسعة إطارات من أمشاط النحل وملكة واحدة تضع البيض.

للبدء ، حدد موقع الملكة في المستعمرة واستبدل إطارا واحدا على الأقل على جانبها من المستعمرة بإطار فارغ. ثم أدخل مستبعدات الملكة لعزل الملكة إلى قسم رباعي الإطارات يحتوي على إطار فارغ واحد على الأقل. في اليوم التالي ، تحقق من الإطارات بحثا عن بيض طازج وضع البيض بعيدا عن الملكة لمدة 72 ساعة.

ثم قم بإزالة هذه الإطارات ، وقم بتنظيف النحل العامل ، واستعد لمعالجة اليرقات في خلايا الحضنة. لكل علاج ، قم بتغطية 50 يرقا تم اختيارها عشوائيا عمرها يوم واحد في الإطار بشرائح شفافة. قم بتأمين الشرائح باستخدام مسامير الإبهام ، ثم قم بعمل معلومات تعريفية على الشرائح بعلامة دائمة.

الآن باستخدام BLD الدافئ إلى 35 درجة مئوية ، قم بعمل تركيزات مختلفة من معالجة PPN تتراوح من 0.1 إلى 100 جزء في المليون في أحجام 100 مل. خلال الأيام الثلاثة القادمة ، عالج مجموعات خلايا الحضنة. لعلاج اليرقات ، اكشف عنها وأضف 10 ميكرولتر من محلول PPN BLD إلى كل خلية حضنة.

كرر العلاج في اليوم التالي باستخدام 10 ميكرولتر من محلول العلاج ، وكرر العلاج في اليوم الثالث باستخدام 20 ميكرولتر من محلول العلاج. بعد العلاج الثالث ، دعهم يتطورون في المستعمرة في التصميم التجريبي ، قم بتكرار كل مجموعة علاج أربع مرات باستخدام مستعمرات مختلفة. في اليوم السابع ، افحص اليرقات المعالجة ب PPN ، وسجل معدلات الوفيات والحد الأقصى في مجموعات العلاج.

في اليوم 13 ، سجل معدل الإغلاق لكل مجموعة علاجية. أولا ، قم بإزالة شمع النحل من خلايا الحضنة المغطية. ثم قم بإزالة الشرانق باستخدام ملاقط مائلة للإمساك بها برفق شديد ، وسحبها برفق.

عند إزالة الشرانق ، استخدم قبضة بين الرأس والصدر وأخرج الشرانق برفق شديد. سيكون من الضروري التدرب عدة مرات للحصول على معدل بقاء لا يقل عن 90٪ قبل إجراء التجربة. انقل الشرانق إلى 24 لوحة زراعة أنسجة جيدة مبطنة بطبقتين من أنسجة المختبر.

تأكد من ملاحظة أي ضرر في الوفيات يحدث أثناء النقل. حافظ على ألواح الاستزراع عند 34 درجة مئوية مع رطوبة نسبية 70٪ حتى ظهورها. خلال الأيام الثمانية المقبلة ، سجل معدل الإغلاق.

قم بالإعداد كما كان من قبل مع مستعمرة صحية من تسعة إطارات حيث تقتصر الملكة على قسم من أربعة إطارات يحتوي على إطار فارغ واحد على الأقل. اتصل بالجزء A من قسم الإطارات الأربعة وجزء قسم الإطارات الخمسة B.Be تأكد من أن استبعاد الملكة يقسم المستعمرة تماما حتى لا تتمكن الملكة من التنقل بين الأقسام. هذا التقسيم أمر حيوي لجمع مجموعات من اليرقات التي يبلغ عمرها يوم واحد.

في اليوم التالي ، قم بتسمية مجموعة من 100 خلية حضنة بالبيض الطازج كما كان من قبل. هذه هي المجموعة الأولى ، أعدها إلى الجزء أ لمدة ثلاثة أيام. بعد يومين ، انقل الملكة إلى الجزء ب لوضع البيض.

في اليوم التالي ، قم بتسمية 100 بيضة طازجة في الجزء ب كمجموعة ثانية وأعد القسم إلى الجزء ب في المستعمرة. بعد يومين آخرين ، انقل الملكة مرة أخرى إلى الجزء أ ، والآن كرر العملية لتكوين مجموعة أخرى واستمر في تبادل الملكة بين الجزء أ إلى الجزء ب كل ثلاثة أيام حتى يتم تعيين تسع مجموعات من البيض البالغ من العمر يوما واحدا على فترات ثلاثة أيام. خلال الأيام الخمسة الأولى من التطور ، سجل معدل الفقس لكل مجموعة مصنفة من خلايا الحضنة.

بعد 11 يوما من التطور ، ابدأ في تسجيل عدد خلايا الحضنة المغطاة في كل مجموعة. في اليوم 13 من التجربة ، عالج المستعمرة بنسبة 50٪ من شراب السكر الذي يحتوي على PPN بمعدل 10 أو 100 جزء في المليون. قم بتحميل صندوق تغذية مع لتر واحد من العلاج وقم بتوصيله بالمستعمرة.

المجموعة الأولى هي عنصر تحكم غير معالج حيث يجب الآن تغطية هذه الخلايا. بدءا من اليوم 17 ، سجل معدل الانسقاق لكل مجموعة. للقيام بذلك ، انقل اليرقات كما هو موضح سابقا إلى صفيحة 24 بئرا ، ثم احتضان اللوحة ثم سجل معدل الإغلاق لاحقا.

بعد 49 يوما ، يجب معرفة بيانات الإغلاق من جميع المجموعات التسع. تم التعامل مع خلايا الحضنة الفردية كما هو موضح باستخدام PPN BLD. لوحظ بسهولة التأثير السلبي للمبيد على نحل العسل في مرحلة اليرقات وكان يعتمد على الجرعة.

تضمنت هذه التأثيرات الميلانيز وتشوه الجناح. لمحاكاة مستعمرات نحل العسل التي تعاني من بقايا PPN البيئية ، تم تغذية مستعمرات بأكملها بشراب PPN. المجموعة الأولى هي عنصر تحكم حيث تطور هذا النحل إلى البالغين قبل العلاج.

تم تنفيذ المجموعة الثانية والثالثة في البداية في مرحلة اليرقة ، وتم تنفيذ المجموعات من الرابع إلى التاسع في البداية كبيض. حدثت تغييرات في الفقس ، والسد ، والإغلاق ، والتشوهات مع علاجات PPN. كان 100 جزء في المليون من PPN أكثر فعالية من 10 أجزاء في المليون ، باستثناء معدل الفقس.

علاوة على ذلك ، بعد العلاجات ، ماتت العديد من الشرانق ببشرة سوداء أو بالفشل في الظهور. في علاج PPN 100 جزء في المليون ، تم تدمير الخلايا المغطاة وإزالة الشرانق المصابة من المستعمرة. بمجرد إتقانها ، يمكن إجراء علاج المستعمرة في غضون شهر واحد تقريبا ، ويمكن الانتهاء من التلاعب اليومي بخادرة في غضون ساعتين تقريبا.

أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر التحقق بانتظام من حالة مستعمرتك وأن تتدرب جيدا على التعامل مع الشرانق قبل إجراء تجربة. لا تنس أن العمل مع نحل العسل يمكن أن يكون خطيرا بسبب حساسية سم النحل. يجب دائما اتخاذ الاحتياطات مثل ارتداء الملابس الواقية أثناء تنفيذ هذا الإجراء.