باستخدام البيولوجيا الاصطناعية إلى المهندس الخلايا الحية تتفاعل مع المواد القابلة للبرمجة

الهدف العام من هذه الإجراءات هو استخدام بكتريا قولونية هندسية صناعيا للتحكم في أسطح المواد القابلة للبرمجة ومعالجتها من خلال الجمع بين استراتيجيات التعديل الجيني ووظائف السطح. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجالات مثل الطب الجزيئي والمراقبة البيئية. باستخدام الخلايا المبرمجة وراثيا لتفسير بيئة محلية وتعديل مادة وظيفية وفقا لذلك ، فإننا نقدم أداة معيارية لمجموعة متنوعة من التطبيقات.

الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن الخلايا الحية قادرة على العمل كأجهزة استشعار ديناميكية قادرة على قراءة ومعالجة وتسجيل الظروف المحيطة بها عبر واجهات وظيفية. بعد تحضير المحاليل وجمع المادة الطافية الغنية بالبيوتين من الإشريكية القولونية المنتجة للبيوتين وفقا لبروتوكول النص ، أضف 1.4 ميكرولتر من محلول SPDP إلى 20 ميكرولترا من محلول الستربتافيدين أو محلول SA. لف الأنبوب بورق الألمنيوم واحتضنه في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة ونصف للسماح للرابط المتقاطع SPDP بالارتباط ب SA عبر مجموعة أمينية ، لتشكيل SA المنشط بالبيريديلديثيو. بعد الحضانة ، أضف 2.4 ميكرولتر من محلول DTT إلى الأنبوب واحتضان العينة في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة للسماح بانقسام البيريدين -2-ثيون مما يؤدي إلى SA المنشط بالسلفهيدريل. بعد ذلك ، أضف 7.5 ميكرولتر من محلول SCC إلى 72 ميكرولتر من محلول HRP ، ولفه بورق الألمنيوم ، واحتضانه في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة ونصف.