الظهرية جذر حقن العقدة وظهري الجذر سحق إصابة نموذجا لالحسية أكسون التجديد

الهدف من هذا النهج الجراحي هو تطبيق العلاجات مباشرة على مستوى جسم الخلية العصبية ، وتقييم تجديد المحور العصبي بعد التدخل العلاجي ، دون الحاجة إلى إجراء آفة أكثر ضررا داخل الجهاز العصبي المركزي. يمكن أن تساعد هذه الطريقة في الإجابة على الأسئلة الرئيسية في مجال تجديد المحور العصبي ، مثل ، هل يمكن أن تتجدد المحاور المعالجة علاجيا في النخاع الشوكي ، وربما تصل إلى أهداف جذع الدماغ؟ الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنه يمكن للباحثين فحص تجديد محور الجهاز العصبي المركزي دون الحاجة إلى إصابة الحبل الشوكي مباشرة.

هذا يقلل من مضاعفات ما بعد الجراحة ويحسن رفاهية. ابدأ بتخدير بشكل صحيح. تأكيد مستوى التخدير الجراحي من خلال عدم وجود رد فعل على قرصة إصبع القدم.

ثم قم بوزن وسجل وزن ما قبل الجراحة. لحقن DRG الجراحي ، احلق الفراء على الرقبة من بين الأذنين إلى أسفل الكتف. تطهير المنطقة المحلوقة بمنتج مطهر.

حقن ملليلترين من المحلول الملحي تحت الجلد على خاصرة ، جنبا إلى جنب مع جرعة مناسبة من المسكن والمضادات الحيوية. ضع مرهم العين على كلتا العينين لمنع جفاف القرنية أثناء العملية. ضع في إطار تجسيمي عمودي ، وضع وسادة تدفئة عند 37 درجة مئوية أسفل.

ابدأ الجراحة عن طريق تحديد موقع العمليات الشوكية البارزة C2 و T2 على الجلد. ثم استخدم مشرطا رقم 10 لعمل شق في الجلد بين العمليات الشائكة C2 و T2. بمجرد فتح الجلد ، يجب أن يكون خط الوسط الليفي الأبيض مرئيا على الطبقة الأولى من العضلات ، والتي لها قوام يشبه الهلام.

قم بعمل شق مماثل الحجم على الطبقة الأولى من العضلات على طول خط الوسط الأبيض. لا تتجاوز أول عملية شوكة بارزة T2 ، حيث يوجد وعاء دموي رئيسي يقع بالقرب منه. اسحب الطبقة الأولى من العضلات باستخدام اثنين من الضاعات ، أحدهما يوضع بشكل مستقيم والآخر ذيلي.

يجب أن تكون الطبقة الثانية من العضلات ذات المظهر المخطط مرئية الآن. حدد موقع خط الوسط للطبقة الثانية من العضلات ، حيث يمكن ملاحظة عضلتين طوليتين متصلتين بنسيج غشائي رقيق. ثم استخدم زوجا من المقصات الدقيقة لتشريح الأنسجة الغشائية وفصل العضلات الطولية.

اضبط الضاعرات لكشف الطبقة الثالثة من العضلات الرقيقة التي تغطي العمود الفقري. يمكن الشعور بالعمليات الشائكة عن طريق اللمس برفق باستخدام زوج من الملقط فوق الطبقة الثالثة من العضلات. استخدم مقصا دقيقا لعمل شق صغير على الطبقة الثالثة من العضلات ، وكشط العضلات برفق من العظم ، باستخدام مكشطة أو مشرط بطريقة جانبية ، لكشف الفقرات بوضوح.

لتعريض C5 الأيسر إلى C8 DRG ، استخدم زوجا من مقصات العظام الدقيقة لإجراء استئصال الصفيحة الصفيحية اليسرى على الفقرات C4 إلى T1 ، عن طريق إزالة جزء من الصفيحة والعنيق بعناية. بمجرد أن يتم الكشف عن ما يكفي من DRG للحقن ، قم بإعداد المحقنة عن طريق وضع حقنة الميكرولتر المملوءة بالفيروسات والمزودة بإبرة حادة عيار 33 حسب الطلب على حامل الحقنة التجسيمية. بعد ذلك ، استخدم إبرة مشطوفة قياس 30 لعمل فتحة سطحية صغيرة على كل من DRG المستهدفة للمساعدة في إدخال إبرة الحقن.

اضبط الإحداثيات التجسيمية برفق لإدخال إبرة القياس 33 في مركز DRG. من الناحية المثالية ، يجب وضع الإبرة في وسط DRG لضمان الانتشار المنتظم لمحلول الحاقن في جميع أنحاء DRG. بمجرد إدخال الإبرة ، استخدم مضخة حقنة التسريب لحقن ميكرولتر واحد من الفيروس في كل DRG.

أثناء الحقن ، سيتغير لون DRG ببطء إذا كان محلول الفيروس يحتوي على صبغة ملونة. لا تفرط في إدخال الإبرة ، فقد يتسبب ذلك في تسرب السوائل من الجانب البطني من DRG. في حالة حدوث تسرب أثناء الحقن ، اضبط موضع الإبرة على الفور.

بعد ثلاث دقائق من انتهاء الحقن ، اسحب إبرة الحقن. لإجراء إصابة متزامنة بسحق الجذر الظهري من C5 إلى C8 ، سحق كل جذر ثلاث مرات لمدة 10 ثوان ، باستخدام زوج من الملقط ذي الرؤوس الدقيقة. معارضة تماما نهايات الملقط.

يجب أن يظهر خط أبيض في الأنسجة في موقع السحق. بعد العمليات الجراحية ، تأكد من عدم وجود نزيف أو قطع صغيرة من شظايا العظام المتبقية في موقع الشق قبل الإغلاق. إذا كنت تفضل ذلك ، ضع قطعة صغيرة من الإسفنجة الجراحية القابلة للامتصاص فوق الحبل الشوكي المكشوف و DRG.

اسمح للطبقة الثالثة من العضلات بالتراجع بشكل طبيعي إلى العمود الفقري ، دون خياطة. قم بخياطة العضلات الطولية بشكل غير محكم على الطبقة الثانية بمادة خياطة قابلة للامتصاص 6-0. خياطة الطبقة الأولى من العضلات بمادة خياطة قابلة للامتصاص 6-0.

خياطة الجلد بمادة خياطة قابلة للامتصاص 5-0. في حالة حدوث نزيف حاد أثناء الجراحة ، قم بحقن ملليلتر إلى ملليلتر من المحلول الملحي تحت الجلد لتعويض فقدان السوائل من ، على النحو المسموح به بموجب اللوائح المحلية. توفير جل مرطب صالح للأكل ، والسماح للحيوان بالتعافي تماما من التخدير.

راقب بشكل متكرر لمدة ساعة واحدة على الأقل قبل العودة إلى منطقة الاحتجاز. تظهر الصور التالية تعافي ما بعد الجراحة في اليوم الأول ، واليوم السابع ، وبعد إزالة خياطة الجلد ، وفي اليوم 14. قبل أسبوع واحد من جمع الأنسجة ، قم بتخدير بشكل صحيح كما كان من قبل ، ثم قم بتثبيت المخلب الأمامي الأيسر عن طريق لصق الطرف على الطاولة.

قبل حقن CTB ، استخدم إبرة مشطوفة قياس 30 لعمل فتحة سطحية صغيرة على الجلد للمساعدة في إدخال إبرة الحقن. ثم استخدم حقنة ميكرولتر مزودة بإبرة قصيرة عيار 33 حسب الطلب ، لحقن ميكرولتر واحد ببطء من 1٪ CTB تحت الجلد في وسط وسادة القدم المجرية وأربعة أرقام. اسمح للحيوان بالتعافي تماما من التخدير قبل العودة إلى منطقة الاحتجاز.

توضح هذه الصورة نتيجة حقن DRG دون إصابة سحق الجذر الظهري. تظهر أجسام الخلايا الإيجابية GFP والمحاور في الحبل الشوكي بوضوح بعد أربعة أسابيع من حقن AAV5GFP. تظهر صورة التكبير الأعلى هذه المحاور في العمود الظهري والقرن الظهري.

تظهر هنا أجسام الخلايا المسماة GFP في DRG. تظهر هذه الصورة أطراف محورية إيجابية CTB في نواة Cuneate بعد أسبوع واحد من حقن CTB. تظهر الصور التالية نتائج إصابة سحق الجذر الظهري الكاملة.

كما هو موضح هنا ، يمكن أن تتجدد المحاور الحسية المحسمة ب GFP حتى منطقة دخول الجذر الظهري ، ولكن ليس في الحبل الشوكي بعد الإصابة. هذه صورة لنواة Cuneate في نفس. تغيب أطراف المحور العصبي الإيجابي CTB بعد إصابة سحق الجذر الظهري الكاملة.

وجود محاور عصبية مصنفة في الحبل الشوكي بعد الإصابة إما إصابة غير مكتملة أو تجديدا. يشير وجود أطراف إيجابية CTB في نواة Cuneate إلى إصابة غير مكتملة ، بينما يشير غيابها إلى إصابة كاملة وربما تجديد جزئي في النخاع الشوكي. أثناء حضور هذا الإجراء ، من المهم إزالة الكمية المناسبة من عظام الفقرات لفضح DRG والجذر الظهري ، دون إحداث أي ضرر غير مرغوب فيه ، خاصة للنخاع الشوكي.

خلاف ذلك ، قد يؤدي ذلك إلى مضاعفات غير متوقعة بعد الجراحة. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية إجراء حقن DRG. يمكنك دمجها في تقنيات أخرى مثل إصابة العمود الفقري المركزي ، والفيزيولوجيا الكهربية ، واختبار السلوك ، والتحليل التشريحي لفحص تجديد المحاور العصبية.