يونيو 7, 2017
ينصح غسل اليدين على نطاق واسع لمنع انتقال الأمراض المعدية. ومع ذلك، هناك القليل من الأدلة على وسائل غسل اليدين الأكثر فعالية في إزالة مسببات الأمراض المعدية. وضعنا طريقة لتقييم فعالية أساليب غسل اليدين في إزالة الكائنات الدقيقة.
الهدف العام من هذه التجربة هو اختبار الفعالية النسبية لخيارات غسل اليدين على الأيدي التي تم تلقيحها تجريبيا بكائن حي ذي أهمية. يمكن أن توفر هذه الطريقة معلومات حول الأسئلة الرئيسية للمساعدة في الوقاية من الأمراض المعدية. من خلال السماح للباحثين بالتحقيق في فعالية غسل اليدين لكائنات معينة ذات أهمية.
الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أنها مرنة ويمكن تكييفها للسماح بالتحقيق في العديد من الكائنات الحية المختلفة. خطرت لنا فكرة هذه الطريقة لأول مرة عندما أدركنا أن محاليل الكلور تستخدم لغسل اليدين في سياقات الإيبولا ولم يكن هناك دليل على فعالية ذلك في ذلك الوقت. بعد تجنيد الأشخاص المؤهلين وإعداد محاليل غسل اليدين وفقا لبروتوكول النص ، قم بإعداد البكتيريا عن طريق وضع خيط غير ممرض من الإشريكية القولونية على ألواح أجار LB واحتضان المزارع عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة للحصول على مستعمرات مفردة.
قبل يوم واحد من بدء التجربة ، استخدم مزلقا معقما للاستيلاء على مستعمرة واحدة من اللوحة وتلقيح 10 مل من مرق LB. احتضان الثقافات عند 37 درجة مئوية ، مع الاهتزاز ، بين عشية وضحاها. في صباح يوم التجربة ، أضف ملليلترا واحدا من المزرعة الليلية إلى 20 مل من مرق LB الطازج.
احتضان الثقافات لمدة ساعتين ونصف تقريبا لتحقيق كثافة ملح أكبر من 10 إلى الثامن CFU لكل مليلتر. ثم استخدم مقياس الطيف الضوئي لتقدير تركيز الثقافة. قبل الاختبار مباشرة ، قم بإعداد لقاح مكون من 68٪ بكتيريا أو معلق فيروسي و 32٪ كلوريد الصوديوم أو حمل التربة.
قم بتدوير أو دوامة برفق للخلط. بعد إعداد المتطوعين وفقا لبروتوكول النص ، اختبر درجة الحموضة في جلد كل متطوع عن طريق وضع مسبار درجة الحموضة للجلد ذو الطرف المسطح في الفراغ المكفوف بين المؤشر والأصابع الوسطى. تأكد من أن القطب مسطح على الجلد وسجل قراءة الأس الهيدروجيني.
بعد ذلك ، اجعل كوب المتطوع كلتا يديه معا. بعد ذلك ، قم بتعبئة 750 ميكرولتر من اللقاح بعناية في كل راحة يد لرفع اليدين. عند رفع أيدي المتطوعين ، من المهم ألا ينسكب أي من اللقاح.
ذكر المتطوعين بأن هذا مهم وامنحهم الفرصة للتدرب على الماء قبل البدء في الإجراء. اطلب من المتطوعين فرك أيديهم معا برفق حتى يتم ترميز جميع أسطح اليد باللقاح ، مع تعريض اليدين لأقل قدر ممكن من الاحتكاك. اطلب من المتطوعين أن يمسكوا أيديهم ثابتة وبعيدا عن أجسامهم لمدة 30 ثانية إضافية للسماح للتلقيح بالجفاف.
ثم اغسل اليدين باستخدام إحدى الطرق الموضحة في بروتوكول النص. لغسل اليدين بالصابون ، استخدم 10 مل من الماء فائق النقاء لتبليل اليدين. اطلب من المتطوعين رغوة أيديهم بالصابون ثم فرك أيديهم معا لمدة 20 ثانية إضافية.
اشطف يدي المتطوع عن طريق سكب 500 مل من الماء عالي النقاء في درجة حرارة الغرفة من خلال قمع بمعدل تدفق 1.5 لتر في الدقيقة في كيس كبير لجمع العينات ومعالجة العينة في غضون ساعتين. بالنسبة لجميع محاليل الكلور ، صب 200 مل من محلول الكلور على يدي المتطوع من خلال قمع بمعدل تدفق 1.5 لتر في الدقيقة واطلب من المتطوعين فرك أيديهم جيدا. كطريقة أخرى لغسل اليدين ، اطلب من المتطوعين استخدام معقم اليدين لغسل أيديهم.
من المهم أن تفرك جميع أسطح اليد برفق ، وطلب من المشاركين التركيز على كل جزء ، والنخيل ، والأظافر ، بين الأصابع أثناء فركها ثم التأكد من شطف اليد بالكامل. للتحكم أ ، بعد التلقيح ، لا تقم بخطوة غسل اليدين. للتحكم ب ، استخدم الماء فائق النقاء فقط في درجة حرارة الغرفة لغسل اليدين من خلال قمع بمعدل تدفق معروف.
بعد غسل اليدين ، ضع يد كل متطوع على الفور للاختبار ، في كيس عينة يحتوي على 75 مل من Leeuwin حتى المعصم. أمسك الجزء العلوي من الكيس بإحكام حول المعصم. اطلب من المتطوعين فرك أيديهم برفق في المحلول لمدة 30 ثانية ، مع الحرص على الوصول بين الأصابع وتحت الأظافر.
قم بتدليك اليد برفق من خارج الكيس لمدة 30 ثانية للتأكد من شطف اليد بالكامل جيدا في Leeuwin ، وصولا إلى المعصم. أغلق الكيس وقم بمعالجته وفقا للمقال المناسب. قبل تكرار العملية مع كل طريقة لغسل اليدين ، اطلب من المتطوعين استخدام الصابون في الماء الدافئ لغسل أيديهم جيدا في الحوض.
أخيرا ، استخدم 70٪ من الإيثانول لرش أيدي المتطوع حتى يتم تغطيتها من كلا الجانبين ، واتركها تجف. لتحليل العينات ، قم بإعداد لهب ومشعب ترشيح مع قمع ترشيح معقم ووصلة فراغ. عقم الملقط عن طريق غمسها في الإيثانول وإشعال النيران.
استخدم الملقط لوضع مرشح 0.45 ميكرون على مشعب الترشيح بحيث تكون الشبكة متجهة لأعلى. ثم استخدم كمية صغيرة من PBS المعقم لتبليل الفلتر. ضع القمع على القاعدة والماصة أو اسكب العينة مباشرة على الفلتر.
قم بإشراك الفراغ حتى تمر العينة بأكملها عبر الغشاء. بعد ذلك ، استخدم PBS معقم لشطف جوانب القمع وإشراك المكنسة الكهربائية مرة أخرى. بعد ذلك ، قم بإزالة القمع ، وتعقيم الملقط باللهب ورفع الفلتر من القاعدة.
ثم ضع الفلتر برفق على الوسط في طبق بتري بحيث تكون الشبكة متجهة لأعلى ، مع التأكد من أن الفلتر يتدفق على السطح. اقلب الصفائح واحتضانها عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة. بعد الحضانة ، عد مستعمرات الإشريكية القولونية وسجل البيانات.
إجراء تحليل البيانات وفقا لبروتوكول النص. تم الانتهاء من البروتوكول الموصوف في هذا الفيديو مع 18 متطوعا تم اختبارهم باستخدام الإشريكية القولونية و Phi6 ، من أجل الإشريكية القولونية بدون حمل التربة ، وغسل اليدين باستخدام HTH و NaDCC و NaOCl المستقر ، كل ذلك أدى إلى تخفيضات أكبر بكثير في السجل من غسل اليدين بالماء فقط. مع حمل التربة ، أدى HTH إلى انخفاض أكبر بكثير في سجل الإشريكية القولونية من غسل اليدين بالماء فقط بالصابون و ABHS.
لم يكن هناك فرق كبير بين طرق Phi6 بدون حمل التربة. ومع ذلك ، بالنسبة ل Phi6 مع حمل التربة ، أدى الماء وحده إلى تقليل سجل أكبر من ABHS أو NaOCl المستقر ، وغسل اليدين بالصابون في تقليل سجل أكبر من ABHS ، واستقر NaOCl وولد NaOCl. كان لدى HTH أيضا انخفاض في السجل أكبر من ABHS وأدى استقرار NaOCl و NaDCC إلى انخفاض في السجل بشكل أكبر من NaOCl و ABHS المستقرين.
كما هو موضح في هذه الرسوم البيانية ، أدى الكلور إلى انخفاض أكبر بكثير في الإشريكية القولونية في ماء الشطف مقارنة بغسل اليدين بالصابون. أخيرا ، تم العثور على نفس النمط في Phi6 بدون حمل التربة مع جميع محاليل الكلور مما أدى إلى انخفاض أكبر بكثير في Phi6 في ماء الشطف من غسل اليدين بالصابون. لم يكن هناك انخفاض معنوي في مياه الشطف باستخدام Phi6 وحمل التربة.
أثناء محاولة هذا الإجراء، من المهم أن تتذكر أن نتائج الفعالية لكل حالة يتم حسابها من خلال مقارنة نتائج التحكمين. هذا يعني أنه من المهم جدا تنفيذ الخطوات باستمرار لكل خيار لغسل اليدين.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تُقدم هذه المقالة بروتوكولاً مختبرياً لتقييم ومقارنة فعالية طرق مختلفة لغسل اليدين في إزالة الكائنات الحية الدقيقة من أيدي البشر، وتقييم استمرارية هذه الكائنات في مياه الشطف. تعتمد الطريقة على استخدام كائنات دقيقة بديلة لضمان سلامة المتطوعين، وتوفر بيانات كمية حول مدى فعالية نهج مختلفة لنظافة اليدين، وهو أمر بالغ الأهمية للوقاية من الأمراض المعدية.
يوفر التقييم الكمي لفعالية غسل اليدين باستخدام كائنات دقيقة بديلة بيانات بالغة الأهمية لاستراتيجيات الحد من الأمراض المعدية في مجالات البحث والتطوير في الصناعات الدوائية الحيوية والصحة العامة. وتتيح هذه الطريقة إجراء مقارنة مباشرة بين تدخلات النظافة، مما يدعم اتخاذ قرارات قائمة على الأدلة للاستجابة لتفشي الأمراض وبروتوكولات التطهير البيئي. كما أن القياس الموثوق والقابل للتكرار للإزالة الميكروبية والاستمرارية يوجه إدارة المخاطر وتطوير منتجات النظافة الانتقالية.
تتكامل هذه الطريقة ضمن المسار الممتد من مرحلة الاكتشاف إلى المرحلة قبل السريرية لتطوير تدخلات النظافة الصحية، مما يدعم كلاً من الفحص في المراحل المبكرة والتحقق الانتقالي.